Resultate Und Zu Erwartender Wertebereich - Remel Rapid Str System Bedienungsanleitung

GERMAN
VERFAHREN
Vorbereitung des Inokulums:
1. Die Testorganismen in reiner Kultur heranziehen, mit Gram-Färbung
prüfen und vor Verwendung des Systems auf Hämolyse testen.
Hinweis: Hämolyse wird verstärkt durch anaerobische Inkubation
oder durch Zugabe von 5-7% CO
2. Die Testorganismen können von nicht-selektiven Agarnährböden
entfernt werden. Die folgenden Medientypen werden empfohlen:
Tryptisches Soja-Agar (TSA) mit oder ohne 5% Schafblut; Nähragar,
Schokoladenagar.
Hinweise:
•
Einige Medienarten, welche Mono- oder Disaccharide enthalten
oder damit angereichert wurden, sind nicht zur Verwendung
empfohlen, da sie die glykolytische Aktivität unterdrücken und die
Empfindlichkeit des Tests reduzieren können.
•
Die Schalen für die Vorbereitung des Inokulums sollten
vorzugsweise 18 bis 24 Stunden alt sein. Langsam wachsende
Isolate können auf 48 Stunden alten Platten getestet werden.
•
Wenn andere Medien als die empfohlenen verwendet werden,
kann dies die Testergebnisse verfälschen.
3. Mit einem Baumwolltupfer oder einer Inokulationsschlinge ausreichend
Wachstum aus der Agar-Schalenkultur in RapID Inokulationsflüssigkeit
(1 ml) suspendieren, um eine sichtbare Trübung zu erzielen, die in
etwa dem McFarland Trübungsstandard Nr. 1 oder Äquivalent entspricht.
Hinweise:
•
Suspensionen mit deutlich geringerer Trübung als McFarland
Standard Nr. 1, führen zu anomalen Reaktionen.
•
Bakterielle Suspensionen, deren Trübung nur leicht stärker ist
als der Nr. 1 McFarland Trübungsstandard, beeinträchtigen die
Tests nicht. Ihre Verwendung wird für Lagerkulturen und
Färbungen zur Qualitätskontrolle empfohlen. Suspensionen,
die jedoch mit einer weit geringeren Trübung als McFarland
Standard Nr. 1 vorbereitet werden, können die Testergebnisse
beeinträchtigen.
•
Suspensionen sollten
gegebenenfalls verwirbelt werden.
•
Suspensionen sollten innerhalb von 15 Minuten nach
Vorbereitung verwendet werden.
4. Zur Erzielung größerer Reinheit kann eine Agarplatte sowie eventuell
erforderliche zusätzliche Tests inokuliert werden. Dies geschieht mit
einer Portion Testsuspension aus dem Röhrchen mit Inokulations-
flüssigkeit. Platte für 18-24 Stunden bei 35-37°C inkubieren.
Inokulation von RapID STR Behältern:
1. Den Deckel des Behälters nach hinten über den Inokulationsport
führen, indem die Lasche mit der Aufschrift „Peel to Inoculate" (Zur
Inokulation abziehen) nach oben und nach links gezogen wird.
2. Mit einer Pipette den gesamten Inhalt des Inokulations-
flüssigkeitsschlauchs vorsichtig in die obere rechte Ecke des
Behälters übertragen. Den Inokulationsport des Behälters wieder
versiegeln, indem die Lasche wieder festgedrückt wird.
3. Nach Zugabe der Testsuspension die Behälterrückseite von den
Reaktionskammern weg in einem ca. 45º-Winkel neigen, wobei der
Behälter auf ebener Oberfläche stehen muss (s. unten).
4. Den Behälter in diesem Winkel halten und dabei vorsichtig hin- und
herschwenken, damit sich das Inokulum entlang der hinteren
Auffangfläche gleichmäßig verteilen kann (siehe Abbildung unten).
5. In horizontaler Position (am besten die Oberkante der Auflage gegen
die Unterkante der Reaktionskammern gestützt) den Behälter
langsam nach vorne in Richtung der Reaktionskammern neigen, bis
das Inokulum entlang der Auffangfläche in die Reaktionskammern
fließt (siehe unten). Damit sollte das Inokulum vollständig aus dem
rückwärtigen Bereich des Behälters abfließen.
Hinweis: Wenn der Behälter zu plötzlich geneigt wird, könnte Luft im
Testkammeranschlussstück
Bewegungsraum der Flüssigkeit einengen.
.
2
gründlich durchmischt
Reaktionsschächte
Reaction Cavities
Inokulationsmulde
Inokulationsmulde
(Tablettrückseite)
(Tablettrückseite)
eingeschlossen werden und
Reaction Cavities
Reaktionsschächte
(Tablettvorderseite)
(Tablettvorderseite)
6. Den Behälter wieder in ebene Position bringen.
vorsichtig auf den Behälter klopfen, damit die in die Kammern
eingeschlossene Luft entweichen kann.
Hinweise:
•
Testkammern daraufhin untersuchen, ob sie frei von Blasen
und gleichmäßig gefüllt sind. Leichte Unterschiede bei der
Befüllung der Testkammern sind tolerierbar und haben keinen
Einfluss auf die Testergebnisse. Wenn der Behälter sehr
ungleichmäßig gefüllt ist, sollte ein neuer Behälter inokuliert
und der falsch gefüllte Behälter entsorgt werden.
•
Nach dem Einfüllen der Inokulationsflüssigkeit die Inokulation
durchführen, bevor weitere Behälter inokuliert werden.
•
Das Inokulum nicht längere Zeit im rückwärtigen Teil des
Behälters belassen, ohne den Vorgang abzuschließen.
Inokulation von RapID STR Behältern:
Inokulierte Behälter für 4 Stunden bei 35-37°C in einem CO
Inkubator inkubieren. Zur leichteren Handhabung können die Behälter in
den mit dem Kit gelieferten Chipboard Inkubationstabletts inkubiert werden.
Auswertung der RapID STR Behälter:
Ein RapID STR Behälter enthält 10 Testkammern, die zusätzlich zur
Hämolyse 15 Testresultate ergeben. Die Testkammern 7 bis 10 sind
bifunktional und enthalten zwei separate Tests pro Kammer. Bifunktionale
Tests werden zunächst ausgewertet, bevor ein Reagens hinzugefügt wird;
daraus ergibt sich das erste Testergebnis. Anschließend wird dieselbe
Kammer nach Hinzugabe des Reagens noch einmal ausgewertet, daraus
ergibt sich das zweite Testergebnis. Die bifunktionalen Testkammern, die mit
RapID STR Reagens gefüllt werden müssen, sind durch den ersten Test
und
über dem Strich und den zweiten Test unter dem Strich gekennzeichnet.
Teststellen der RapID STR Behälter
Kammer-Nr. 1 2
Testcode ARG ESC
1. RapID STR Behälter
Etikettendeckel über die Testkammern ziehen, indem die untere
rechte Lasche nach oben und dann nach links gezogen wird.
2. Ohne Zugabe des Reagens Testkammern 1 (ARG) bis 10 (PO
links nach rechts lesen und auswerten. Zur Interpretation Anleitung
aus Tabelle 2 verwenden. Testauswertungen in den entsprechenden
Kästchen des Berichtsformulars notieren, dabei den Testcode für
bifunktionale Tests oberhalb des Strichs verwenden.
3. 2 Tropfen RapID STR Reagens in die Kammern 7 (TYR) bis
10 (PYR) geben.
4. Mindestens 30 Sekunden und höchstens 3 Minuten Farbentwicklung
abwarten. Testkammern 7 bis 10 lesen und auswerten. Testauswer-
tungen in den entsprechenden Kästchen des Berichtsformulars
notieren, dabei den Testcode für bifunktionale Tests unterhalb des
Strichs verwenden
5. Hämolyse-Reaktion für das Testisolat in das dafür vorgesehene
Kästchen des Berichtformulars eintragen. Die Hämolyse-Reaktion
dient als Test Nr. 15 und darf nur für Beta-hämolytische Isolate als
positiv gewertet werden. Alpha- und Gamma-Hämolyse müssen als
negatives Ergebnis gewertet werden.
6. Den sich aus dem Berichtformular ergebenden Mikrocode im ERIC
zur näheren Bestimmung nachschlagen.

RESULTATE UND ZU ERWARTENDER WERTEBEREICH

Die RapID STR Differenzierungstabelle zeigt die für das RapID STR System
zu erwartenden Ergebnisse. Die Ergebnisse der Differenzierungstabelle
werden als Reihe positiver Prozentwerte für jeden Systemtest dargestellt.
Diese Informationen unterstützen jeden Test statistisch und stellen durch
numerische Kodierung der digitalen Testergebnisse die Basis für einen proba-
bilistischen Ansatz zur Identifikation der isolierten Testorganismen dar.
Die Bestimmung erfolgt unter Verwendung individueller Testauswertungen
der RapID STR Behälter in Verbindung mit anderen Laborinformationen
(z.B. Gram-Färbung, Hämolyse, Koloniemorphologie, Wachstum auf dif-
ferenzierten oder selektiven Medien), wobei ein Muster entsteht, das
statistisch der bekannten Reaktivität für Taxa gleicht, die in der Datenbank
des RapID Systems enthalten sind. Diese Muster werden mithilfe der
RapID STR Differenzierungstabelle verglichen oder durch Ableitung eines
Mikrocodes und Nachschlagen im RapID STR Code Kompendium bzw.
den
ERIC ermittelt.
2
3 4 5 6 7 8
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