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Fehlerbehebung
Problem
Deformierte Probe gut
Proben, die nicht entlang einer
geraden Bahn
Double-banded Muster
Schlechte Band-Auflösung
Schaumstoff-Pads abziehen
•
p10
Lösung
L assen Sie das Gel für mindestens 30 Minuten eingestellt
und sicherzustellen, dass es bei Raumtemperatur, bevor Sie
den Kamm.
B eim Entfernen des Kammes, halten Sie es in einem leich-
ten Winkel und heben sich sehr langsam, um das Gel zu
Bruch gingen.
A chten Sie darauf, nicht beschädigen gut mit der Pipette
beim Laden der Probe; Ziel für die Mitte des Brunnens und
nicht durchlöchern den Boden mit der Pipettenspitze.
Wenn ein Kamm oder Laufen Tablett verzogen ist, zu ersetzen.
Reduzieren Sie die Spannung.
W ählen eines Puffers mit den entsprechenden Ionenstärke
und Pufferkapazität. (Die Pufferkapazität des TBE, beispiels-
weise höher ist als die von TAE.) Wenn der Puffer leer ist, zu
stoppen den Lauf, den Deckel und den Puffer pipettiert aus
jeder Kammer in der gegenüberliegenden Kammer, um den
Puffer wieder aufzufüllen.
W enn das Gel ist uneben, das Niveau Gelgießschale vor dem
Gießen des Gels.
Kamm muss senkrecht zu gut Form Verzerrung zu verhindern.
V erringern des Puffers auf 1 mm über der Oberseite des Gels,
um die vertikalen Temperaturgradienten zu reduzieren.
™
I n Ficoll
, Glycerin oder Saccharose auf die Probe Ladepuffer,
um sicherzustellen, dass die Probe sinkt auf den Boden der
Vertiefung. (Ficoll ist bevorzugt.)
Sicherstellen, dass die Probe vollständig gelöst ist.
Reduzieren Sie die Spannung.
Reduzieren Sie die Konzentration der Probe.
Reduzieren Sie die Probenvolumen.
M indestens 1 mm von Gel unter dem Boden des Kamms ist
erforderlich, um ein Austreten von Proben des Beckenbodens
zu verhindern.
Reduzieren Sie die Salzkonzentration der Probe.
Ü berprüfen Sie die Enzymaktivität, die Probe kann länger Ver-
dauung oder eine andere Beschränkung Puffer benötigen.
B ereiten Sie frische Probe, wenn Sie Nuklease Kontamination
vermutet.
Wählen Sie Agarose mit einem niedrigen Wert Endosmose.
I nstallieren Sie das Tablett laufen als wie auf Seite 5
beschrieben; nicht gerade nach unten andrücken.
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