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5. Fehlerbehebung
problem
Lächeln auf den Puffer vor
Protein-Streifen vertikal
Ungewöhnlich langsam
(oder schnell) laufen
Bands sind schief oder verzerrt
lösung
Um die Betriebstemperatur zu reduzieren
• Circulate Kühlmittel durch die obere Pufferkammer
Kern.
• Kühlen Sie das Puffer.
• Verringern Sie die Strom-oder Spannungs-
Einstellung. (10 mA pro Gel 0,75 mm, 15 mA pro
Gel 1,5 mm dick.)
• Führen Sie das Gel in den Kühlraum.
• Zentrifugiert oder filtriert Probe vor dem Laden, um
Partikel zu entfernen.
• Dialysieren oder Entsalzung der Probe.
Passen Sie die Lösungen
• Überprüfen Sie Rezepte, Gelkonzentrationen, Lösun-
gen und Verdünnungen. (Zum Beispiel, verwenden
Sie nicht Tris-HCl anstelle von Tris.)
• Wenn die erforderlichen pH-Wert einer Lösung über-
schritten wird, nicht zurück-titriert. Bereiten Sie
frischen Puffer.
• Entsorgen Sie ältere Acrylamid-Lösungen und
verwenden Sie nur Aktien von höchster Qualität.
• Verwenden Sie nur frisch deionisiert Harnstoff.
Passen Sie die Einstellungen für Spannung oder Strom:
• So erhöhen oder verringern Sie die Geschwindigkeit
der Migration, stellen Sie die Spannung oder Strom
von 25–50%.
Überprüfen Sie Gelzubereitung und Polymerisation
• Degas das Stacking-Gel-Lösung und Vermeidung von
Luftblasen unter der Kammzähne.
• Überlagern der Trenngel mit Wasser gesättigtem
n-Butanol vor Beginn der Polymerisation zur Verme-
idung der Bildung einer unebenen Oberfläche Gel.
Überprüfen Sie die Probenvorbereitung
• Dialysieren oder Entsalzung der Probe.
• Zentrifugiert oder filtriert Probe vor dem Laden, um
Partikel zu entfernen.
•
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