Verwandte Anleitungen für Hoefer SE615
Inhaltszusammenfassung für Hoefer SE615
- Seite 1 Deutsch Hoefer SE615 und SE675 Multiple Gel Caster SE615-IM/German/Rev.C0/08-12...
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Seite 2: Inhaltsverzeichnis
Inhalt Die Sicherheitshinweise und Warnungen ....ii Einführung ............1 Einrichten des Zaubernden ........5 Casting mit Teilerplatten ........7 Gießen Standard homogene Gele ......9 Gießen Standard Gradientengele ......11 Gießen Stapeln Gele ..........15 Entfernen polymerisierte Gele .......16 Fehlerbehebung ...........18 Pflege und Wartung ..........20 Anhang A: Gel-Identifikationsnummern ....21 Anhang B: Referenzen .........21 Bestellinformationen ..........22... -
Seite 3: Die Sicherheitshinweise Und Warnungen
Die Sicherheitshinweise und Warnungen • Acrylamid ist ein Nervengift. • Tragen Sie Handschuhe beim Umgang mit Acrylamid oder Polyacrylamid. • Tragen Sie eine Staubmaske, wenn mit einem Gewicht von Acrylamid oder Acrylamid- Lösungen vorbereiten. Zum Schutz Ihrer Anlage Um Ihr Instrument in sehr gutem Zustand zu halten, nehmen Sie bitte folgende wichtige Schritte: Wichtig! Die meisten... -
Seite 4: Einführung
Die resultierenden Gele sind kompatibel mit Hoefer SE400, SE600 und SE600 Chroma Vertical Slab-Gel-Elektrophorese Einheiten. Homogene und Gradientengele Der SE615 und SE675 kann zum Gießen sowohl homogene als auch Gradientengele verwendet werden. Gradientengele werden durch den Anschluss an der Unterseite des Zaubernden werfen. - Seite 5 Sie das Glas und Gel-Sandwich in der Elektrophorese-Einheit. Die maximale Anzahl von Gelen man gleichzeitig gegossen werden unter Verwendung des Gießvor- gang wird in Tabelle 1 gezeigt. Tabelle 1. Maximale Anzahl von Standard-Gele gegossen 0,75-mm 1,0-mm 1,5-mm Abstandhalter Abstandhalter Abstandhalter SE615 SE675 •...
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Seite 6: Casting Mit Teilerplatten
0,75-mm 1,0-mm 1,5-mm Abstandhalter Abstandhalter Abstandhalter SE615 SE675 Siehe Abb. 1 auf Seite 4, um die Komponenten der multiplen Rollen Gel zu identifizieren. Weitere Infor- mationen zu Ersatzteilen, Zubehör und zugehörige Ausrüstung, siehe Seite 22. Gießen der zweiten Dimension Gelen... - Seite 7 Abb. 1. Komponenten der SE615 und SE675 Multiple Gel Caster. SE615 und SE675 Komponenten Anzahl Beschreibung Caster Körper umfasst Faceplate Frühjahr Schelle (4) Schaumrippe Dichtung Silikon-Verschiebung Block* Acryl Distanzblock Kamm Polycarbonat Füllblatt Glasplatte Abstandhalter Einlassöffnung Nylon Rändelschraube * Eine kleine Silicon Verschiebeblock ist auch für die SE675 verfügbar.
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Seite 8: Einrichten Des Zaubernden
Einrichten des Zaubernden Abb. 2. Der Aufbau eines Glas-Sand- Rolle wich für Standard- Casting. Glasplatte Abstandhalter ein sandwich Glasplatte Wachspapier oder Polycarbonat-Platten Vorbereiten des Zaubernden Falls die Frontblende auf den Zaubernden befestigt ist, entfernen Sie sie. Entfernen Sie die vier seitli- chen Klemmen, lösen Sie die beiden Schrauben, und schieben Sie die Frontblende. -
Seite 9: Aufbau Der Stapel
Aufbau der Stapel Hinweis: Um die Trennung von Legen Sie eine Polycarbonat-Platten in den Zaubernden polymerisierten Gel Sandwiches so dass 1/3 des Blattes erstreckt sich von der Spitze. einfacher, statt Wachs Papierbögen in den Zaubernden Sie können dieses Blatt als Hebel verwenden Sie beim zwischen jedem Satz von Glas- Einsetzen Füllstoff Blatt, nachdem alle Sandwiches Sandwiches. -
Seite 10: Casting Mit Teilerplatten
Casting mit Teilerplatten Um die Anzahl der Gele gleichzeitig auf den SE600 und verwandte Einheiten laufen verdop- peln, platzieren Sie einen gekerbten Glas Teiler- platte und ein anderes Paar von Abstandshaltern zwischen den Standard-Glasplatten. Das Ergeb- nis ist ein “Club Sandwich”, mit zwei Schichten von Gel durch die drei Glasplatten gebildet. - Seite 11 Legen Sie eine Polycarbonat-Platten oder Wachspapier oben auf dem Club-Sandwich. Wiederholen Sie Schritt 3, abwechselnd Wachspapier und Club-Sandwiches. Hinweis: Für optimale Nach dem letzten Club-Sandwich, fügen Acryl Distanz- Sichtverhältnisse, legen Sie ein stücke und extra Polycarbonat-Platten, bis der gesamte Polycarbonat-Platten gegen die Stapel ist ca.
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Seite 12: Gießen Standard Homogene Gele
Tragen Sie eine Staubmaske, Gel-Caster benötigte Volumen Gradient Maker wenn mit einem Gewicht von (ml) Größe* Acrylamid oder Acrylamid SE615 190 –500 SG500 Vorbereitung Aktien. SE675 60 –150 SG100 oder SG500 *Die tatsächliche Größe hängt davon ab, berechnete Volumen. Bereiten Sie und Degas genug Monomerlösung auf alle Sandwiches auf das Niveau des Rastenplatte füllen. - Seite 13 Fügen Initiator und Katalysator, und gießen Sie die Achtung! Isobutanol Haarrisse Lösung in die Glas-Sandwiches von der Spitze. oder Wolken die Acrylsäure Die Lösung fließt von einem Sandwich zum anderen Nachlauf Wände, was es durch die Nut an der Unterseite des Zaubernden und schwierig macht, die Gele zu sehen.
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Seite 14: Gießen Standard Gradientengele
Herstellen einer 50% Glycerin Verschiebung Lösung, die eine kleine Menge von Bromphenolblau: ca. 75 ml für die SE615 und 35 ml für die SE675. Berechnen Sie die Höhe der Steigung Lösung, die Sie mit Bezug auf die Formel auf Seite 9 benötigen. - Seite 15 Montieren Sie die Gradienten-Komponenten. (Siehe Abb. 5). A. Schließen Sie alle Ventile Gradient Maker und setzen Sie ein Rührstab in der Mischkammer, die mit dem Schlauch-Anschluss-Port. B. Befestigen Sie ein Ende von einem Stück Schlauch an den Ausgang des Gradient Maker. C.
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Seite 16: Gießen Gradienten Trenngelen
Gießen Gradienten Trenngelen Warnung! Acrylamid ist ein Nervengift. Tragen Sie Bereiten Sie und Degas die beiden Monomer-Lösun- Handschuhe beim Umgang mit gen für den Gradienten Maker. Acrylamid oder Polyacrylamid. In Glycerin oder Saccharose zu der Lösung höherer Tragen Sie eine Staubmaske, Konzentration, um die Acrylamid-Gradienten zu stabi- wenn mit einem Gewicht von lisieren, wenn die Lösung auf Abnahme der Konzen-... - Seite 17 Wenn fast alle die Acrylamid-Lösung aus dem Gradienten Maker wird abgelassen, die Pumpe und schließen Sie das Mischventil. Neigen Sie den Gradi- enten Maker zur Auslassseite und entfernt die letzten paar Milliliter-Mix. Es dürfen keine Luftblasen, um den Schlauch zu gelangen. Fügen Sie die Verschiebung Glycerin-Lösung in die Mischkammer und die Pumpe starten.
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Seite 18: Gießen Stapeln Gele
Gießen Stapeln Gele Sie können hinzufügen, Stapeln Gele auf den gesamten Satz von polymerisierten Gele (homo- gene oder Gradient), während die Brötchen noch in der Casting-Box, oder Sie fügen Sammelgel zu einzelnen Gele unmittelbar vor der Verwendung. Um eine optimale Auflösung, fügen Sie die Stacking-Gel in der letzten Minute, um die Diffusion von Puffern zwischen den beiden Gel- Schichten zu verhindern. -
Seite 19: Entfernen Polymerisierte Gele
Ersetzen Sie den Zaubernden in eine vertikale Posi- Hinweis: Sauerstoff hemmt tion. Achten Sie darauf, die Oberfläche des Trenngels Gelpolymerisation. Nicht ist frei von Flüssigkeit. einklemmen Luftblasen unter Mit einer Pipette auf jedes Sandwich individuell füllen der Kammzähne. mit Stapeln-Gel-Monomer-Lösung. Hinweis: Verwenden Sie Gele mit Stapeln Gele sofort. -
Seite 20: Um Gele Für Eine Spätere Verwendung Speichern
Entfernen Sie vorsichtig einzelnen Glas-und Gel- Hinweis: Der SDS-Puffer macht Sandwiches aus dem Stapel. Falls nötig, legen Sie die Glasplatten rutschig. eine Wunderkeil zwischen benachbarten Sandwiches, Hinweis: Verwenden Sie keine sie zu trennen. Metall-Spatel auf die Sand- Arbeiten Sie langsam und vorsichtig, wenn neugieri- wiches zu trennen. -
Seite 21: Fehlerbehebung
Fehlerbehebung Symptom mögliche Ursache empfohlene Aktion 1. Gele auf Glasplatten Schmutz, Fett oder Einweichen Platten in einem starken Reini- haften beim Öffnen Fingerabdrücke auf gungsmittel Labor; gut ausspülen in destilliertem Tellern anrichten. Wasser. Mit Handschuhen arbeiten nur. Sandwich. 2. Gele gegossen glei- Unterschiedliche Verwenden Sie die gleiche Menge an Overlay auf Mengen von Overlay... - Seite 22 Symptom mögliche Ursache empfohlene Aktion 8. Kein Polymerisation Zu wenig oder APS Steigern sowohl APS und TEMED um 30-50%. von SDS-Gel TEMED. APS-Lösung ist alt. Make-up frisch APS jeden Tag. (oder unvollständige APS-Stack ist nass. APS ist hygroskopisch. Öffnen Sie eine neue Flasche. Polymerisation.) in Gel-Lösung.
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Seite 23: Pflege Und Wartung
Pflege und Wartung • Nicht autoklavieren oder heizen jeden Teil über 45 °C • Setzen Sie den Zaubernden oder seine Teile in organischen Lösungsmitteln. Reinigung Spülen Sie den Nachlauf, Faceplate, Silikon- stopfen und Polycarbonat-Platten in verdünnten Reiniger und Klarspüler mit destilliertem Wasser. Lassen Sie das Gerät an der Luft vollstän- dig trocknen. -
Seite 24: Anhang A: Gel-Identifikationsnummern
Anhang A: Gel-Identifikationsnummern Für eine positive Identifizierung von Gelen, versehen sie jede Platte durch den Einbau eines kleinen Label auf dünnem Filterpapier in der unteren Ecke des Gels gedruckt. Verwenden Sie einen Kohlenstoff Schreibmaschinen-Farbbänder, Kopierer oder Laserdrucker, diese Etiketten zu machen, da viele flüssige Tinten aus Papier während einer SDS-Elektrophorese Elektropho- rese laufen werden. -
Seite 25: Bestellinformationen
Bestellinformationen Produkt Menge Code SE615 Multiple Gel Caster-Kit, 10 Gele SE615 Inklusive, 20 Glasplatten, Platzsparer Platte, 5 Blätter Füllstoff, 100 Blatt Wachspapier und Spacer-Mate-Schablone. (Bestell-Kämme und Spacer getrennt.) SE675 Multiple Gel Caster-Kit, 4 Gele SE675 Inklusive, 8 Glasplatten, 3 Platzsparer Platten, 5 Blätter Füllstoff, 100 Blatt Wachspapier und Spacer-Mate-Schablone und Blindstopfen. - Seite 26 Kämme Anzahl der Dicke Breite vertiefungen (mm) (mm) Menge Code 0,75 SE511-10-.75 1,00 SE511-10-1.0 1,50 SE511-10-1.5 0,75 SE511-12-.75 1,00 SE511-12-1.0 1,50 SE511-12-1.5 0,75 SE511-15-.75 1,00 SE511-15-1.0 1,50 SE511-15-1.5 0,75 SE511-20-.75 1,00 SE511-20-1.0 1,50 SE511-20-1.5 0,75 SE511-28-.75 1,00 SE511-28-1.0 1,50 SE511-28-1.5 Comb Tiefe 15 mm, alle anderen 25 mm. Präparative Kämme Diese Kämme sind 25 mm tief, einstellbar auf 10 oder 15 mm.
- Seite 27 Hoefer, Inc. 84 October Hill Road Holliston, MA 01746 Toll Free: 1-800-227-4750 Telefon: 1-508-893-8999 Fax: 1-508-893-0176 E-mail: support@hoeferinc.com Web: www.hoeferinc.com Hoefer ist ein eingetragenes Warenzeichen von Hoefer, Inc. © 2012 Hoefer, Inc. Alle Rechte vorbehalten. Gedruckt in den USA.