Vorgehensweise Beim Mikroskopieren; Scharfeinstellung; Einstellen Des Einfallswinkels Des Lasers - Olympus Wi-Cdeva Bedienungsanleitung

3-3 Mikroskopieren
@
²
ƒ
19
Abb. 4
|
³
Abb. 5
@
Abb. 6
1

Scharfeinstellung

1. Die Abdeckung für den Objektwechsel @ entfernen.
2. Immersionsöl auf die F rontlinse des Kondensors ² auftragen, das Objekt
auf den Tisch auflegen und anschließend das gewünschte Immersions-
objektiv in den Strahlengang einschwenken.
Durch Anbringen der Abdeckung für den Objekt wechsel @ an der ur-
sprünglichen Position wird mit der Abgabe des L aserstrahls begonnen.
3. Den Einstellknopf für den Laser-Einfallswinkel ³ bis zum Anschlag im
Uhrzeigersinn drehen.
In dieser Stellung ist der Einfalls winkel des Lasers kleiner als der kriti-
sche Winkel, daher wird keine Totalreflexion erreicht.
4. Das angezeigte Bild der Videokamer a beobachten und das Objekt
scharfstellen.
5. Den Leuchtfeldblendenring | der L aser-Beleuchtungseinheit fast auf
die kleinste Position stellen und den Einstellhebel für die K o ndensorhöhe
ƒ horizontal drehen, bis sich das Bild der L e uchtfeldblende in der Mitte
des Sehfelds befindet.
Nun ist der Kondensor richtig eingestellt.
TIPP
Wenn die durch den Laserstrahl erzeugte Fluoreszenz zu dunkel ist für
eine genaue Scharfeinstellung des Objekts, die Dur c hlichtbeleuchtung
einschalten, das Objekt scharfstellen, den Einstellhebel für die
Kondensorhöhe regulieren und das Bild der L e uchtfeldblende im Durch-
licht scharfstellen. Dadur ch wird später die Scharfeinstellung des Ob-
jekts mit der durch den Laser erzeugten Fluoreszenz erleichtert.
2
Einstellen des Einfallswinkels des Laserstrahls
}Folgende Einstellungen unter Beachtung der „Erläuterunsdiagr amme"
auf der nächsten Seite vornehmen. Die Diagramme zeigen, wie die Bil-
der auf dem Monitor je nach Einstellung des Laserstrahls aussehen.
}Wenn der Einstellknopf für den L aser-Einfallswinkel @ der F aser-
Beleuchtungseinheit ganz im Uhrzeigersinn gedr eht wird, ist der Ein-
fallswinkel des v om Kondensor abgegebenen L aserstrahls kleiner als
der kritische Winkel, daher wir d keine T otalreflexion erreicht (Erläuterungs-
diagramm 1).
# Den Einstellknopf nicht gewaltsam weiter im Uhrzeigersinn über
die oben angegebene Position hinaus drehen.
1. Das Bild auf dem Monitor beobachten und den Einstellknopf @ lang-
sam gegen den Uhrzeigersinn dr ehen, bis T otalreflexionsfluoreszenz
erreicht ist (Erläuterungsdiagramm 3).
Wenn sich der Einfallswinkel des Lasers dem kritischen Winkel
annähert (Erläuterungsdiagramm 2), verschwimmt der helle Teil
des Fluoreszenzbildes in vertikaler oder horizontaler Richtung
des Sehfelds. Wird der Winkel weiter vergrößert, verdunkelt sich
plötzlich die Hintergrundfluoreszenz, und TIRF (total internal
reflection fluorescence) ist erreicht (Erläuterungsdiagramm 3).
2. Durch Weiterdrehen des Einstellknopfes @ gegen den Uhrzeigersinn
wird der Bereich verringert, in dem TIRF beobachtet w erden kann (Tiefe
von der Deck glasoberfläche). Durch Dr ehen des Einstellknopfes im
Uhrzeigersinn wird der oben genannte Bereich größer.
}Wird der Einstellknopf zu w eit gegen den Uhrzeigersinn gedr eht, ist
schließlich nichts mehr zu sehen (Erläuterungsdiagramm 4).
(Abb. 4 & 5)
(Abb. 6)