Durchführung Einer Größenmessung - Particle Metrix Zetaview Pmx-120 Bedienungsanleitung

Durchführung einer Größenmessung
7 Durchführung einer Größenmessung
Die Partikelgröße in einer Probe wird bestimmt, indem jedes einzelne Partikel,
während es sich gemäß der Brown´schen Bewegung bewegt, verfolgt wird. Dabei wird
ein Video aufgezeichnet. Da das ZetaView®-Gerät jedes Partikel im Sichtfeld erkennt,
lokalisiert und verfolgt, kann die Software die durchschnittliche mittlere quadratische
Verschiebung (jedes
Diffusionskoeffizienten für jedes einzelne Partikel bestimmen. Der Diffusionskoeffizient
jedes einzelnen Partikels wird in die Stokes-Einstein-Gleichung aufgenommen. Die
Temperatur und die Viskosität des Puffers, in dem die Partikel gelöst sind, spielen
ebenfalls eine entscheidende Rolle und werden bei der Größenbestimmung
berücksichtigt.
2
< ��, �� ̅̅̅̅̅ >
���� =
4
Abbildung 7-1: Links: Berechnung der mittleren quadratischen Verschiebung für jedes Teilchen.
D = Diffusion coefficient; k
Rechts: Stokes-Einstein-Gleichung.
η = Viscosity of medium; < ��, ��
Die Größe der Partikel in einer Probe kann an allen 11 Messpositionen, in zwei
Positionen, welche die SL-Positionen darstellen (siehe
einer Position gemessen werden. Letztere repräsentiert die aktuell eingestellte
Messposition. Wenn es um eine gute statistische Reproduzierbarkeit geht, wird die
Messung in allen 11 Positionen empfohlen.
Im Allgemeinen wird vor der Analyse der Proben in allen 11 Positionen eine
automatische Ausrichtung der Optik („Autoalignment") unter Verwendung des 100nm-
Polystyrolstandards durchgeführt (siehe
NTA-Zellblock ausgestattet ist, wird dadurch eine korrekte Fokuseinstellung auf die
Partikel sichergestellt. Wenn das Gerät mit einem Z-NTA-Zellblock geliefert wird,
erfolgt darüber hinaus eine Symmetriekorrektur.
Um eine Größenmessung durchzuführen, müssen zunächst die folgenden
Bedingungen erfüllt sein:
•
Die Messzelle muss innen und außen sauber sein
•
Die Startroutine (automatische Ausrichtung und möglicherweise
Fokusoptimierung) muss erfolgreich abgeschlossen worden sein (siehe
•
Das ZetaView®-Gerät muss mit dem Puffer / der Flüssigkeit gefüllt werden, in
der die Partikel der Probe gelöst sind
•
Es dürfen sich keine Luftblasen im Flüssigkeitssystem oder in der Messzelle
befinden
•
Die Partikel der Probe müssen scharfgestellt sein
Partikles) pro
�� �� ��
D = Diffusionskoeffizient; k
�� =
η = Viskosität des Mediums: < ��, ��
6������
r = Radius
= Boltzmann constant; T = Temperature;
B
> = Mean square displacement; r = radius
2
̅̅̅̅̅
Zeitintervall quantifizieren
= Boltzmannkonstante; T = Temperatur;
B
2
̅̅̅̅̅ > = Mittlere quadratische Verschiebung;
Abschnitt
Abschnitt 6.2.2). Wenn das Gerät mit einem
und einen
13.2) oder in nur
Kapitel 5)
113