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Leukozyten werden durch die neue asymmetrische Cyanin-Fluoreszenzsubstanz markiert.
Aufgrund
des unterschiedlichen
Gehalts
an
Nukleinsäure
in
den
verschiedenen
Subpopulationen der Leukozyten, der Reifestadien oder des abnormen Entwicklungsstatus ist
die Anreicherung des Fluoreszenzfarbstoffs, der die Nukleinsäuresubstanzen färbt,
unterschiedlich. Umgeben von einer Hüllflüssigkeit (Diluent), durchlaufen die Blutzellen das
Zentrum der Durchflusszelle in einer Reihe mit höherer Geschwindigkeit. Wenn die in der
Verdünnungsflüssigkeit suspendierten Blutzellen die Durchflusszelle passieren, werden sie
einem Laserstrahl ausgesetzt: Die vordere Streuung spiegelt die Zellgröße wider, die seitliche
Streuung die intrazelluläre Granularität, und die Intensität des Fluoreszenzsignals spiegelt den
Grad der Färbung der Zelle wider. Durch die Erfassung der Signalunterschiede in drei
Dimensionen der mit Lyse behandelten Zellen, unterscheidet der WBC-Kanal die
Subpopulationen der WBC (Lymphozyten, Monozyten, Neutrophile, Eosinophile und
Basophile) und liefert Hinweise auf verdächtige Stabkernige Granulozyten, atypische
Lymphozyten und kernhaltige Erythrozyten.
3.3 HGB Messung
3.3.1 Colorimetrische Methode
Ein Teil der Probe wird in das HGB-Bad gegeben, wo sie mit einer bestimmten Menge Lyse
vermischt wird, die Hämoglobin in einen Hämoglobin-Komplex umwandelt, der dann bei 530
nm messbar ist. An einer Seite des Bades ist eine LED Lichtquelle angebracht, die einen Strahl
monochromatischen Lichts aussendet, dessen zentrale Wellenlänge 530 nm beträgt. Das Licht
durchdringt die Probe und wird dann von einem optischen Sensor gemessen, der auf der
gegenüberliegenden Seite angebracht ist. Das Signal wird dann verstärkt, die Spannung wird
gemessen und mit der Leerwert-Referenzmessung verglichen (Messungen, die vorgenommen
werden, wenn sich nur Verdünnungsmittel im Bad befindet), und die HGB-Konzentration wird
im Analysegerät automatisch gemessen und berechnet.
3.3.2 HGB
Die HGB Konzentration wird nach der folgenden Gleichung berechnet und in g/dL
ausgedrückt.
HGB (g/dL) = Konstante × Log 10 (Leerwert-Fotostrom/Proben-Fotostrom).
3.4 RBC, PLT und RET Messung
3.4.1 RBC und PLT: Elektrische Mantelfluss-Impedanz-Methode
Die RBC und PLT werden mit der Mantelfluss-Impedanz-Methode gezählt und vermessen.
Diese Methode basiert auf der Messung der Änderungen des elektrischen Widerstands, die
ein Partikel, in diesem Fall eine Blutzelle, in einem leitfähigen Verdünnungsmittel erzeugt,
wenn es durch eine Öffnung mit bekannten Abmessungen hindurchgeht. Ein Elektrodenpaar
wird auf beiden Seiten der Öffnung in die Flüssigkeit getaucht, um die elektrische Leitung zu
ermöglichen. Wenn jedes Teilchen die Öffnung durchläuft, kommt es zu einer
vorübergehenden Änderung des Widerstands zwischen den Elektroden. Diese Änderung
erzeugt einen messbaren elektrischen Impuls. Die Anzahl der erzeugten Impulse steht für die
Anzahl der Partikel, die die Öffnung passiert haben. Die Amplitude jedes Impulses ist
proportional zum Volumen der einzelnen Partikel.
Vers.: 20230710DEU
Seite 21
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