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Diff-Kanal: Fluoreszenz-Durchflusszytometrie - Sysmex XT-4000i Muster-Standardarbeitsanweisung

Hämatologieanalysator
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Muster-Standardarbeitsanweisung
SYSMEX Hämatologie-System XT-4000i
1. Dokumentenname / Version:2
Abbildung 6: WBC/BASO-Scattergramm
1.5.

DIFF-Kanal: Fluoreszenz-Durchflusszytometrie

Im DIFF-Kanal werden vier Zellpopulationen der Leukozyten bestimmt:
Neutrophile, Eosinophile, Lymphozyten und Monozyten. Für die Messung wird ein
Reagenziensystem, bestehend aus einer Kombination von Lysereagenz und
Fluoreszenzfarbstoff, verwendet und mit dem Blut 1:51 verdünnt.
Die erstgenannte Reagenzkomponente, Stromatolyser-4DL, lysiert während dieses
Vorganges alle Erythrozyten und perforiert die Zellmembranen der Leukozyten. Der
Fluoreszenzfarbstoff Stromatolyser-4DS kann anschließend in die Zellen eindringen.
Bei diesem Prozess bleiben die Zellen intakt.
Stromatolyser-4DS ist ein Polymethin-Fluoreszenzfarbstoff, der Nukleinsäuren im
Kern und Zytoplasma der Leukozyten anfärben kann, wodurch Rückschlüsse auf die
Zellaktivität und den Reifegrad möglich sind (Abb. 7). Nach der Inkubationszeit wird
die Probe unter Verwendung des Halbleiterlasers durchflusszytometrisch analysiert.
Abbildung 7: Leukozyten nach Einwirkung von Stromatolyser-4DS & -4DL
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