BD Macro-Vue Bedienungsanleitung Seite 13

Nota: Con la prueba en tarjeta existen solamente dos informes finales posibles — reactivo o no reactivo, cualquiera que sea el grado de reac tividad.
La reactividad mínima a moderada (que muestra una aglutinación leve pero definida) siempre se considera como reactiva.
Las reacciones levemente granulares o "rugosas" deben repetirse utilizando un procedimiento alternativo. Estas pruebas pueden considerarse
"indeterminadas" hasta realizarse una evaluación futura de los donantes. Vea "Limitaciones del procedimiento".
Todas las pruebas reactivas de la sífilis deberán repetirse utilizando un procedimiento alternativo.
Prueba cualitativa en tarjeta con círculo de 18 mm usando tubos capilares:
1. Usando un nuevo tubo capilar, instale el bulbo de goma en el tubo capilar y extraiga 0,05 mL de muestra del tubo de recogida de sangre
permitiendo que ésta llegue a la línea de medida en el tubo capilar, teniendo cuidado de no transferir elementos celulares. (Puede usarse una
pipeta serológica si así se desea, pero no pipetee con la boca).
2. Coloque la muestra medida en el círculo de la tarjeta de diagnóstico de prueba, comprimiendo el bulbo de goma, manteniendo un dedo sobre
la abertura del mismo.
3. Usando un nuevo dispositivo Dispenstirs para cada muestra, extienda hasta ocupar todo el círculo. Deseche el dispositivo Dispenstirs.
Repita el procedimiento para el número de muestras que se van a analizar.
4. Agite suavemente el frasco dispensador de antígeno antes de usarlo. Sujetándolo en posición vertical, dispense varias gotas en la tapa del
frasco dispensador para asegurarse de que el conducto de la aguja esté abierto. Deje caer por gravedad una gota (aguja de cánula amarilla,
calibre 20) en cada área de prueba. No vuelva a agitar; el antígeno y la muestra se mezclarán durante la rotación. Recoja el antígeno que se
había vaciado ante riormente en la tapa del frasco.
5. Gire durante 8 min (± 30 s) bajo la cubierta humidificadora en el rotador mecánico a 100 ± 2 rpm.
A continuación de la rotación, para ayudar a diferenciar los resultados no reactivos de aquellos de mínima reactividad, debe efec tuarse una breve
rotación e inclinación de la tarjeta en forma manual (3 ó 4 movimientos laterales). Lea inmediatamente macroscópica mente en estado "húmedo"
bajo una lámpara incandescente de alta intensidad o luz diurna intensa.
Considere como: Reactivo — Cuando muestre una aglutinación característica que varía de leve pero definida (mínima a moderada) a marcada
No reactivo — Cuando no muestre aglutinación. Consulte la Guía de lectura.
Nota: Con la prueba en tarjeta existen solamente dos informes finales posibles — reactivo o no reactivo, cualquiera que sea el grado de reactividad.
La reactividad mínima a moderada (que muestra una aglutinación leve pero definida) siempre se considera como reactiva.
Las reacciones levemente granulares o "rugosas" deben repetirse utilizando un procedimiento alternativo. Estas pruebas pueden considerarse
"indeterminadas" hasta realizarse una evaluación futura de los donantes. Vea "Limitaciones del procedimiento".
Todas las pruebas reactivas de la sífilis deberán repetirse utilizando un procedimiento alternativo.
Prueba cuantitativa en tarjeta con círculo de 18 mm:
1. Para cada muestra a ser analizada, coloque 0,05 mL de solución salina al 0,9% en los círculos numerados del 2 al 5. Puede usarse un tubo
capilar (línea roja) o pipeta serológica de 1 mL o menor. ¡NO EXTIENDA LA SOLUCION SALINA!
2. Usando un tubo capilar (línea roja graduada cada 0,05 mL hasta la punta) con bulbo de goma adjunto, coloque 0,05 mL de muestra en el círculo 1.
3. Vuelva a llenar el tubo capilar hasta la línea roja con muestra de prueba, y sujetando en posición vertical prepare diluciones dobles en serie
extrayendo la mezcla de solucón salina y muestra de prueba hacia arriba y hacia abajo del tubo capilar 5 a 6 veces. Evite la formación de
burbujas. Transfiera 0,05 mL del círculo 2, al 3, al 4, al 5 mezclando después de cada transferencia. Deseche 0,05 mL después de mezclar el
contenido en el círculo 5.
4. Usando un nuevo dispositivo Dispenstirs para cada muestra, comience con la solución más diluida de suero (círculo 5) y extienda el suero, de
modo que ocupe la superficie completa del círculo. Prosiga con los círculos 4, 3, 2 y 1 y extienda el suero en forma similar.
5. Agite suavemente el frasco dispensador de antígeno antes de usarlo. Sujetándolo en posición vertical, dispense varias gotas en la tapa del frasco
dispensador para asegurarse de que el conducto de la aguja esté abierto. Deje caer por gravedad una gota (aguja de cánula amarilla, calibre 20)
en cada área de prueba. No vuelva a agitar; el antígeno y la muestra se mezclarán durante la rotación. Recoja el antígeno que se había vaciado
ante riormente en la tapa del frasco.
6. Gire durante 8 min (± 30 s) bajo la cubierta humidificadora en el rotador mecánico a 100 ± 2 rpm.
A continuación de la rotación, para ayudar a diferenciar los resultados no reactivos de aquellos de mínima a moderada (RM) reactividad, debe
efec tuarse una breve rotación e inclinación de la tarjeta en forma manual (3 ó 4 movimientos laterales). Lea inmedia ta mente macroscópicamente
en estado "húmedo" bajo una lámpara incandescente de alta intensidad o luz diurna intensa.
Informe en función de la solución más diluida que da un resultado reactivo, incluyendo la reacción mínima a moderada.
Ejemplos:
(Reacción de prozona — vea "Limitaciones del procedimiento")
R = Reactivo
N = No reactivo
RM = Reactivo mínimo a moderado
Suero sin calentar o calentado: Si la solución más diluida analizada (1:16) resulta reactiva, prosiga de la siguiente forma —
1. Prepare una dilución 1:50 de suero no reactivo en solución salina al 0,9%. (Esta se usará para preparar diluciones 1:32 y más diluidas de
muestras que serán sometidas a análisis cuantitativo).
2. Prepare una dilución 1:16 de la muestra de prueba agregando 0,1 mL de suero a 1,5 mL de solución salina al 0,9%. Mezcle bien.
3. Coloque 0,05 mL de suero no reactivo 1:50 en los círculos 2, 3, 4 y 5.
4. Usando un tubo capilar, coloque 0,05 mL de dilución 1:16 de la muestra de prueba en el círculo 1.
5. Vuelva a llenar el tubo capilar hasta la línea roja; prepare diluciones dobles y complete las pruebas en la forma descrita en los pasos 3 a 6.
(Vea "Prueba cualitativa en tarjeta con círculo de 18 mm").
Las soluciones más diluidas, en caso necesario, se preparan en suero no reactivo 1:50.
Plasma: Si debe establecerse una línea de referencia a partir de la cual puedan determinarse cambios de título, la prueba debería repetirse usando
suero sin calentar (vea "Suero sin calentar").
Lectura e informe de las pruebas Macro-Vue RPR en tarjeta: Las reacciones individuales deberán ser evaluadas en el estado "húmedo", bajo
una lámpara incandescente de alta intensidad o luz diurna intensa. Inmediatamente a continuación de la rotación, lea y anote si es reac tivo o
no reactivo.
Control de calidad por parte del usuario
El control de calidad debe llevarse a cabo conforme a la normativa local y/o nacional, a los requisitos de los organismos de acreditación y a
los procedimientos estándar de control de calidad del laboratorio. Se recomienda consultar las instrucciones de CLSI y normativas de CLIA
correspondientes para obtener información acerca de las prácticas adecuadas de control de calidad.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
El diagnóstico de la sífilis no debe hacerse en base a un solo resultado reactivo sin el respaldo de antecedentes o evidencia clínica positiva. Por
lo tanto, al igual que con cualquier procedimiento de análisis serológico, las muestras cuya prueba en tarjeta resulta reactiva deben someterse
a estudios serológicos adicionales. Las muestras de suero que resulten reactivas en pruebas cualitativas deben someterse a determinaciones
cuantitativas para establecer la línea de referencia a partir de la cual puedan determinarse los cambios de título, en particular para evaluar el
tratamiento. 1 El uso de muestras de plasma para establecer una línea de referencia a partir de la cual puedan determinarse cambios de título no
se ha evaluado.
Pueden ocurrir resultados negativos falsos debido a una falla en el reconocimiento de las reacciones de prozona. Las reacciones de prozona
ocurren en 1 a 2% de los pacientes que sufren de sífilis secundaria. Estas muestras pueden presentar un patrón no reactivo que es levemente
granular o "rugoso". Durante la dilución, la reactividad aumentará inicialmente y luego decrecerá al aproximarse al punto final de la titulación.
Todas las pruebas que presenten un aspecto rugoso deberán seguir evaluándose. Los resultados negativos falsos de las pruebas no treponémicas
también pueden observarse durante la incubación de la sífilis primaria y tardía.
No es necesario realizar el procedimiento cuantitativo en muestras reactivas de donante.
Las pruebas de RPR en tarjeta no pueden usarse para analizar líquidos cefalorraquídeos.
La muestra ideal para el análisis neonatal es el suero del infante que se obtiene mediante el procedimiento de punción del talón. Sin embargo, la
sangre del cordón umbilical se puede usar para el análisis básico cuando no hay disponible ninguna otra muestra.
Con los antígenos tipo cardiolipina se han informado reacciones positivas falsas en enfermedades tales como la mononucleosis infecciosa, lepra,
malaria, lupus eritematoso, vaccinia y neumonía viral. En la lepra, Portnoy
de 50 casos de lepra resultaron reactivos y Scotti
pruebas FTA-ABS y TPI. Dorwart
de lupus eritematoso sistémico resultaron reactivos en la prueba en tarjeta, mientras que sólo 5 resultaron reactivos con la prueba de preparación
microscópica VDRL. Solamente 1 de 23 casos de artritis reumatoidea resultó reactivo con la prueba de RPR en tarjeta y la prueba de preparación
microscópica VDRL. Durante el embarazo, varios informes indicaron la ocurrencia de reacciones positivas falsas.
las enfermedades del sistema autoinmune también podrían dar reacciones positivas falsas.
treponémicas producen reacciones positivas en esta prueba.
La lipemia no interferirá con las pruebas en tarjeta; sin embargo, si el grado de lipemia es tan severo que oculta el estado de las partículas de
antígeno, la muestra no debe considerarse apta para el análisis.
No analice muestras que están muy hemolizadas, contaminadas o extremadamente turbias; considérelas como "muestra no apta para ser analizada".
VALORES PREVISTOS Y CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO
La suspensión de antígeno de RPR se analiza para verificar la configuración establecida de reactividad con respecto a suspensiones de antígeno
de referencia y cumple con las especificaciones de productos de los U.S. Centers for Disease Control and Prevention (CDC) (Centros de Control
y Prevención de Enfermedades) para realizar las pruebas en tarjeta con círculo de 18 mm. Estas características de rendimiento se establecieron
a partir de un gran número de artículos de publicaciones científicas, en base a los rendimientos de pruebas diarias rutinarias en laboratorios de
pruebas serológicas de la sífilis y cumplen con las especificaciones de los CDC.
Los estudios existentes indican que las pruebas de RPR tienen la sensibilidad y especificidad adecuadas en relación con el diagnóstico clínico y
un nivel de reactividad similar al de la prueba de preparación microscópica VDRL.
El calentamiento de muestras de suero a 56 °C durante 30 minutos no ha demostrado tener ningún efecto sobre la reactividad.
Se efectuó una comparación cualitativa de 1104 muestras de suero y plasma EDTA tomadas simultáneamente, usando la prueba
Macro-Vue RPR en tarjeta con círculo de 18 mm. Hubo una concordancia completa en los resultados de las pruebas, que incluyeron 134 pares
reactivos y 970 no reactivos. En otros estudios se encontraron resultados comparables entre los pares de plasma y suero (306 muestras) con las
pruebas de RPR en tarjeta en procedimientos cualitativos y cuantitativos.
e intensa.
PRUEBA DE RPR EN TARJETA CON CIRCULO DE 18 MM
Reactivo Reactivo
Considere como reactivo
Sin diluir 1:2
Reactivo Reactivo
20 informó que 1 de 208 casos resultó reactivo con la tarjeta RPR que no eran reactivos con las
21 estudió la incidencia de reacciones BFP crónicas en varias afecciones del tejido conectivo. Seis de 41 casos
(Sin diluir) 1:1 1:2
RM N
R R
R R
GUIA DE LECTURA
PRUEBA CUALITATIVA
Reactivo
(Moderada)
PRUEBA CUANTITATIVA
TITULO
1:4
1:4
Reactivo
1
3 no informó resultados positivos falsos; Achimastos
1
6-10,24,25
14,26
13
1:4 1:8 1:16 Informe
N N N Reactivo, dilución 1:1
R N N Reactivo, dilución 1:4
R R N Reactivo, dilución 1:8
Reactivo
(Mínima) No reactivo
1:8 1:16
No reactivo No reactivo
1
11,22
23 La pinta, la frambesia, el bejel y otras enfermedades
19 informó que 14
La adicción a los narcóticos y
13
1