BD Macro-Vue Bedienungsanleitung Seite 12

Macro-Vue RPR Card Tests
B
Prueba cualitativa y cuantitativa en tarjeta con círculo de 18 mm
Equipo de diagnóstico de Brewer para la detección serológica de la sífilis
USO PREVISTO
La prueba Macro-Vue RPR (reagina plasmática rápida) en tarjeta con círculo de 18 mm es un procedimiento de análisis no treponémico para la
detección serológica de la sífilis.
RESUMEN Y EXPLICACION
La prueba Macro-Vue RPR en tarjeta en lágrima (usando sangre obtenida por punción de un dedo) fue la prueba en tarjeta original y fue desa-
rrollada para usarse donde pudiera realizarse la prueba sin equipos de laboratorio.
anulares y otros cambios técnicos, la prueba en tarjeta con círculo de RPR fue desarrollada para usarse en pruebas a gran escala en laboratorios
de salud pública y laboratorios clínicos.
La prueba de RPR en tarjeta con círculo de 18 mm se recomienda cuando se emplea una muestra de sangre venosa y se dispone de un gran
volumen de suero, situación aplicable a los laboratorios de salud pública y laboratorios clínicos.
floculación con una coaglutinación de las partículas de carbón del antígeno de RPR en la tarjeta que aparecen como grumos negros contra el fondo
blanco de la tarjeta revestida de plástico. Al contrario, las muestras no reactivas tienen un color gris claro uniforme.
En situaciones especiales en que se requieran resultados rápidos de la prueba no treponémica y la muestra se obtenga como plasma EDTA, la
prueba de RPR en tarjeta con círculo de 18 mm puede usarse si la prueba se realiza dentro de un límite de 24 h.
PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO
La suspensión de antígeno de RPR es un antígeno de cardiolipina con partículas de carbón
similar a los anticuerpos presentes en el suero o plasma de personas sifilíticas, y ocasionalmente en el suero o plasma de personas con otras
condiciones agudas o crónicas. La reagina se liga al antígeno de la prueba, que consiste en partículas de colesterol cubiertas de cardiolipina y
lecitina, lo que produce una floculación macroscópica.
REACTIVOS
Los ingredientes* de la suspensión de antígeno de RPR son
0,0125 M de EDTA, solución 0,01 M de Na
especialmente, BD), 10% de cloruro de colina, peso-volumen y agua desionizada/destilada.
* Ajustados y/o suplementados para satisfacer los criterios de rendimiento.
Advertencias y precauciones:
Para uso diagnóstico in vitro.
En las muestras clínicas puede haber microorganismos patógenos, como los virus de la hepatitis y el virus de la inmunodeficiencia humana. Para
la manipulación de todos los elementos contaminados con sangre u otros líquidos corporales deben seguirse las "Precauciones estándar"
directrices del centro. Esterilizar en autoclave los recipientes para muestras y cualquier otro material contaminado antes de desecharlos.
Atención
H302 Nocivo en caso de ingestión. H315 Provoca irritación cutánea. H319 Provoca irritación ocular grave. P101 Si se necesita consejo médico,
tener a mano el envase o la etiqueta. P280 Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P264 Lavarse concienzudamente tras la
manipulación. P301+P312 EN CASO DE INGESTIÓN: Llamar a un CENTRO DE INFORMACION TOXICOLOGICA o a un médico en caso de
malestar. P501 Eliminar el contenido/el recipiente de conformidad con las normativas locales, regionales, nacionales e internacionales.
Antígeno: Se recomienda refrigerar solamente la suspensión de antígeno de RPR en tarjeta. No se debe guardar a la luz directa del sol o a
temperatu ras de más de 30 °C; dichas condiciones podrían producir un aspecto rugoso del antígeno cuando se usa con sueros no reactivos. Si la
ampolla de antígeno se congeló durante el envío, puede reconstituirse una vez calentándola hasta la temperatura ambiente; evite la congelación y
descongelación repetidas. El uso inmediato de un antígeno refrigerado puede producir una disminución de la sensibilidad de la prueba. Por lo tanto,
después de sacar del refrigerador, deje el antígeno a temperatura ambiente (entre 23 y 29 °C) antes de usarlo.
No use el antígeno después de la fecha de caducidad.
Tarjetas de prueba de diagnóstico: Tarjetas especialmente preparadas, revestidas de plástico, diseñadas para usarse con el antígeno en la
tarjeta de RPR. Durante su manipulación, tenga cuidado de no marcar con los dedos las áreas de prueba de la tarjeta, ya que esto puede dejar un
depósito de grasa y producir resultados inapropiados de la prueba. Cuando se extienda la muestra dentro de los límites de las áreas de prueba,
evite rayar la tarjeta con el dispositivo Dispenstirs. Si la muestra no se extiende al perímetro exterior del área de prueba, use otra área de prueba
de la tarjeta.
Dispenstirs y tubos capilares: Al realizar las pruebas en tarjeta, un dispositivo Dispenstirs (prueba cualitativa con círculo de 18 mm solamente)
o tubo capilar puede usarse para transferir la muestra a la superficie de la tarjeta. Debe usarse un nuevo dispositivo Dispenstirs o tubo capilar
para cada muestra de prueba. Cuando se transfiera desde el tubo de recogida, la muestra no debe extraerse hacia el bulbo de goma adjunto al
tubo capilar, ya que esto causará lecturas incorrectas en pruebas posteriores.
Agujas: Para mantenerlas permeables para un suministro de gotas exacto, al completarse la prueba retire la aguja del frasco dispensador y
enjuague la aguja con agua desionizada/destilada. No seque la aguja con un trapo, ya que de esta forma se eliminará el revestimiento de silicona
y podría afectar la exactitud de la gota de antígeno que se está dispensando.
Lectura de los resultados de la prueba en tarjeta: Lea inmediatamente después de la rotación, en estado "húmedo" bajo una lámpara
incandescente de alta intensidad o luz diurna intensa.
Rotación: La velocidad de rotación mecánica recomendada es de 100 ± 2 rpm. El rotador debe circunscribir un círculo de aproximadamente dos
centímetros de diámetro en el plano horizontal. Se debe usar una tapa humidificadora para evitar que las muestras se sequen durante la rotación.
Almacenamiento del antígeno: Refrigerados a una temperatura de entre 2 y 8 °C. Todos los demás componentes del juego deben almacenarse en un
lugar seco a temperatura ambiente en el paquete original. Vea "Advertencias y precauciones" para obtener información adicional.
Una vez colocado en el frasco dispensador (incluido en cada juego) y refrigerado (entre 2 y 8 °C), la reactividad del antígeno se mantiene
satisfactoria durante aproximadamente tres meses, o hasta la fecha de caducidad, si ésta es anterior.
Marque el frasco dispensador con el número de lote del antígeno, la fecha de caducidad y la fecha en que el antígeno se colocó en el frasco.
RECOGIDA Y PREPARACION DE LAS MUESTRAS
No se requiere preparación especial del paciente antes de la recogida de la muestra.
Las muestras derivadas de la sangre humana pueden ser infecciosas. Precaución: Manipúlelas como si fueran contagiosas.
Para analizar suero sin calentar: Recoja sangre por punción venosa en un tubo limpio y seco sin anticoagulante y permita que se coagule.
Coloque la muestra en una centrífuga con fuerza suficiente para sedimentar los elementos celulares. Mantenga el suero en el tubo de recogida
original o transfiera el suero a un tubo de ensayo limpio y seco si la prueba no va a ser realizada de inmediato. El suero, extraído del coágulo, puede
refrigerarse entre 2 y 8 °C durante un máximo de 5 días o congelarse a -20 °C o a una temperatura inferior en un vial de Pyrex (o equivalente) o
en un tubo de ensayo tapado
Para analizar suero calentado: Después de la recogida y centrifugación, al igual que para el suero sin calentar, transfiera a un tubo limpio y seco
y coloque en un baño de agua a 56 °C o en un bloque térmico durante 30 minutos.
Para analizar plasma no calentado: Recoja sangre por punción venosa en un tubo que contenga anticoagulante como EDTA, heparina, oxalato
de potasio, secuestreno de potasio o fluoruro de sodio. El EDTA y la heparina tienen la ventaja de no ser críticos con respecto a la concentración;
un mínimo de 1 mL de sangre en un tubo en el que generalmente se recogen 7 mL de sangre produce resultados satisfactorios. Con los otros
anticoagulantes, se recomienda recoger no menos de medio tubo de sangre. Centrifugue como se indicó anteriormente. Mantenga el plasma en el
tubo de recogida original, y en caso de almacenarlo, almacene la muestra entre 2 y 8 °C. Analice la muestra dentro de las 24 horas de la recogida
de la sangre.
PROCEDIMIENTOS Y RESULTADOS
Materiales suministrados: Se encuentran disponibles varios equipos de prueba de RPR en tarjeta (vea "Disponibilidad") con un abridor de
ampollas preinstalado que contienen suficiente suspensión de antígeno para realizar el número especificado de pruebas diarias de control en tarjeta
y pruebas en tarjeta y los frascos dispensadores, aguja dispensadora, tarjetas y los tubos capilares o los dispositivos Dispenstirs necesarios.
Materiales necessarios pero no suministrados:
1. Sueros de control con configuraciones establecidas de reactividad graduada que deben incluirse en las pruebas diarias para confirmar la
reactividad óptima de la suspensión de antígeno. Vea "Disponibilidad" para las tarjetas de control de la prueba en tarjeta con círculo de 18 mm
de RPR Macro-Vue.
2. Un agitador de 100 ± 2 rpm, circunscribiendo un círculo de 2 cm de diámetro, con cronómetro automático, accionamiento por fricción y una
cubierta que contiene una esponja humedecida o un secante humedecido.
3. Solución salina (0,9%) para usarla en pruebas cuantitativas. Prepare agregando 900 mg de cloruro sódico seco, ACS a 100 mL de agua
desionizada/destilada.
4. Suero no reactivo a la sífilis en solución salina al 0,9%, necesario para diluir las muestras de prueba dando un resultado reactivo en la dilución
1:16.
También se necesitan los aparatos de laboratorio apropiados para la preparación, el almacenamiento y la manipulación de muestras serológicas.
Preparativos preliminares: Vuelva a leer "Advertencias y precauciones" y "Recogida y preparación de las muestras" antes de efectuar las pruebas
en tarjeta. Cuando deban realizarse las pruebas, la suspensión de antígeno deberá verificarse con controles de reactividad graduada, usando
el proce dimiento de prueba determinado. Solamente deberán usarse aquellos antígenos que dan las reacciones pres critas. Los controles, la
suspensión de antígeno en tarjeta de RPR y las muestras de pruebas deberán estar a temperatura ambiente cuando se usen.
Antes de usar, agite vigorosamente la ampolla durante 10 a 15 s para volver a suspender el antígeno y dispersar cualquier partícula de carbón
alojada en el cuello de la ampolla. Si alguna partícula de carbón permanece en el cuello de la ampo lla después de agitarla, no debería tratar de
desalojarla ya que tendería a producirse un antígeno rugoso.
Verifique la dipensación de la aguja colocándola firmemente
en una pipeta o jeringa de 1 mL; llene la pipeta o jeringa con
la suspensión de antígeno y, sujetando la pipeta o jeringa
en posición vertical, cuente el número de gotas dispensadas
en 0,5 mL. El número correcto de gotas se especifica en la
tabla del lado opuesto:
Coloque la aguja en el accesorio en forma de huso del frasco dispensador. Asegúrese de que el antígeno esté debajo de la línea de rotura; parta el
cuello de la ampolla con el abridor de ampollas preinstalado y transfiera todo el antígeno al frasco dispensador comprimiendo el frasco y usándolo
como dispositivo de succión. Marque el frasco dispensador con el número de lote del antígeno, la fecha de caducidad y la fecha en que el antígeno
se colocó en el frasco. Agite suavemente el frasco dispensador con el antígeno antes de seguir adelante con cada serie de gotas de antígeno.
La aguja y el frasco dispensador deberán desecharse cuando se haya usado todo el juego.
Es imprescindible que las técnicas descritas en este documento sean seguidas con todo detalle.
Prueba cualitativa en tarjeta con círculo de 18 mm usando dispositivos Dispenstirs:
1. Sujete el dispositivo Dispenstirs entre el pulgar y el índice cerca del extremo sellado o de agitación. Comprima y no deje de ejercer presión
hasta que el extremo abierto quede por debajo de la superficie de la muestra, sujetando el tubo de muestra verticalmente para reducir al mínimo
la agitación de elementos celulares cuando se usa el tubo de sangre original. Deje de ejercer presión con los dedos para extraer la muestra.
2. Sujetando en posición vertical directamente sobre el área de prueba de la tarjeta a la cual debe agregarse la muestra (sin tocar la superficie
de la tarjeta), comprima el dispositivo Dispenstirs permitiendo que caiga una gota en la tarjeta (aproximadamente 0,05 mL; cada dispositivo
Dispenstirs está diseñado para proporcionar un poco más de 0,05 mL a fin de compensar la pequeña cantidad de muestra retenida en el
extremo de agitación).
3. Invierta el dispositivo Dispenstirs y con el extremo sellado de agitación extienda la muestra ocupando toda la superficie circular. (Si así se
desea, el resto de la muestra puede volverse a meter al tubo de muestra del cual fue extraída). Deseche el dispo sitivo Dispenstirs. Repita el
procedimiento para el número de muestras que se van a analizar.
4. Agite suavemente el frasco dispensador de antígeno antes de usarlo. Sujetándolo en posición vertical, dispense varias gotas en la tapa del frasco
dispensador para asegurarse de que el conducto de la aguja esté abierto. Deje caer por gravedad una gota (aguja de cánula amarilla, calibre 20)
en cada área de prueba. No vuelva a agitar; el antígeno y la muestra se mezclarán durante la rotación. Recoja el antígeno que se había vaciado
anteriormente en la tapa del frasco.
5. Gire durante 8 min (± 30 s) bajo la cubierta humidificadora en el rotador mecánico a 100 ± 2 rpm.
A continuación de la rotación, para ayudar a diferenciar los resultados no reactivos de aquellos de mínima reactividad, debe efectuarse una breve
rotación e inclinación de la tarjeta en forma manual (3 ó 4 movimientos laterales). Lea inmediatamente macroscópicamente en estado "húmedo"
bajo una lámpara incandescente de alta intensidad o luz diurna intensa.
Considere como: Reactivo — Cuando muestre una aglutinación característica que varía de leve pero definida (mínima a moderada) a marcada
No reactivo — Cuando no muestre aglutinación. Consulte la Guía de lectura.
1,2
HPO , solución 0,01 M de KH
2 4
1 . Evitar ciclos repetidos de congelación y descongelación de las muestras.
e intensa.
3,4 Al incorporar la rotación de la máquina, superficies de prueba
1 : 0,003% de cardiolipina, 0,020 – 0,022% de lecitina, 0,09% de coleste rol, solución
PO , 0,2% de azida sódica (conservante), 0,02% de carbón (preparado
2 4
Método de la Prueba
Círculo de 18 mm
12
5-12 Cuando una muestra contiene anticuerpos, aparece
13,14
1 que detecta la presencia de "reagina", substancia
Color de la Cánula Número de Gotas
de la Aguja
Amarilla, calibre 20
Español
15-18 y las
en 0,5 mL
30 ± 1 gota