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Sarstedt miniPERM Bedienungsanleitung
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Sarstedt miniPERM Bedienungsanleitung

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Verwandte Anleitungen für Sarstedt miniPERM

Inhaltszusammenfassung für Sarstedt miniPERM

  • Seite 1 Bedienungsanleitung ® miniPERM...

  • Seite 3: Inhaltsverzeichnis

    ® Bedienungsanleitung miniPERM Inhaltsverzeichnis Einleitung ................................4 Konstruktion und Funktion des miniPERM ® Bioreaktors Arbeitsanleitung ..............................6 Am Beispiel einer Hybridomzellkultur Anhang ................................12 Hochzelldichte-Kulturmethode Produktionsrate Mediumwechsel ® Handling des miniPERM Bioreaktors Troubleshooting ..............................13 Problemstellung und Lösung Literatur ................................17 Publikation/Anwendungsberichte Zubehör ................................18 .............................19...

  • Seite 4: Einleitung

    Konstruktion des miniPERM Bioreaktors 1. Dialysemembran ® ® miniPERM Die semipermeable Dialysemembran im miniPERM Hybridomzellen und anderen Zellen in hoher Dichte z.B. die sezernierten monoklonalen Antikörper, passie- ren. • dem Produktionsmodul und im Medium physikalisch gelöste Gase (O , CO ®...
  • Seite 5 ® Bedienungsanleitung miniPERM 2. Silikonmembran 4. Universaldrehvorrichtung und somit eine optimale Versorgung der Zellen zu erreichen, muss sowohl das Versorgungsmedium als sphäre durch die Silikonmembran in das Produkti- auch die Zellsuspension im Reaktionsmodul ständig umgewälzt werden. ® zierte CO das Produktionsmodul.

  • Seite 6: Arbeitsanleitung

    ® Bedienungsanleitung miniPERM Arbeitsanleitung ® 1. Vorbereitung der Zellen für den miniPERM Bioreaktor am Beispiel einer Hybridomzellkultur in der sterilen Werk- ® classic werden. Die Zellen werden unter den im jeweiligen La- Zellen) benötigt eingestellt. ® Bei der Verwendung des miniPERM ®...

  • Seite 7: Einfüllen Der Zellsuspension In Das Produktionsmodul

    ® Bedienungsanleitung miniPERM ® 3. Befüllen des miniPERM Bioreaktors 3.1 Einfüllen der Zellsuspension in das Produkti- onsmodul des Produktionsmoduls mit der Zellsus- • Der zusammengesetzte miniPERM ® Bioreaktor wird mit dem Produktionsmodul nach oben so Anschluss gedreht (Abb. 7). • Der miniPERM ®...
  • Seite 8 Vorraus- Kultur. (Abb. 12). 350 bis 400 ml Medium Die Umdrehungsge- (Abb. 13). • murine Hybridomzellen • Der miniPERM ® • humane Hybridom- und Umdrehungsgeschwindigkeit zwischen 0.1 und 40.0 UpM eingestellt. 2 - 10 UpM. ® Der miniPERM...
  • Seite 9 ® Bedienungsanleitung miniPERM 4. Probennahme bran nach außen am Produktionsmodul ® • Der miniPERM Bioreaktor wird in die sterile kappen an den Luer-Lock- Werkbank gebracht. gungsmodul herrschenden herausspritzen und den des Versorgungsmoduls gelockert (nicht Bioreaktor kontaminieren. Druckausgleich gesorgt werden. moduls am höchsten Punkt (A) liegt. Die Bei der Verwen- (Abb.

  • Seite 10: Probennahme Über Einen Septumverschluss

    4.2 Probennahme über einen Septumverschluss ’’) mit ersetzt werden, wodurch das Kontaminationsrisiko geringem Durchmesser reduziert wird. ® • Der miniPERM Bioreaktor wird wie unter 4.1 Einstichloch so klein wie möglich zu halten. Nach mit einem alkoholgetränkten (70% pharma- schluss gegen einen sterilen Verschluss ausgetauscht werden.
  • Seite 11 ® Bedienungsanleitung miniPERM Sauberes Arbeiten beim 6. Wechsel des Versorgungsmediums größter Wichtigkeit. • Der Bioreaktor wird unter die sterile Werkbank gebracht. destilliertem Wasser Versorgungsmodul wird abgeschraubt. Lösungsmittel mit alkoholhaltigen Filtermembran, deren Funktion durch Alkohol beeinträchtigt wird. Druckausgleich gesorgt. Der Ausgießrand der 7.

  • Seite 12: Handling Des Miniperm ® Bioreaktors

    10 Zellen pro Stunde. die Volumenzunahme 1/273 des Volumens bei 0°C. Bei kaltem Medium, also bei einem Temperaturunterschied total) wie sie in dem miniPERM ® Bioreaktor leicht erreicht 24 ml zunehmen und zu einem beträchtlichen Druck- ®...

  • Seite 13: Troubleshooting

    Zellen durch regelmäßigen Mediumwechsel im Versorgungsmodul in • Verwendung eines Anti-Schaummittels • Herabsetzen des Serumanteils im Medium des Versorgungsmoduls Produktionsmodul bildet sich sehr Druckausgleich nicht ohne reduzieren ® Dauer der Kultur im miniPERM Bioreaktor miniPERM ® Bioreaktor bei regelmäßigem Mediumwechsel, Kontrolle...
  • Seite 14 ® Bedienungsanleitung miniPERM Problem Lösung kontrollieren, ob die Schnapphaken des Produktionsmoduls 1. An der Grenze zwischen Produktions- und Versorgungsmodul sie hörbar einrasten. Produktions- und Schnapphaken des Produktionsmoduls in die Aussparungen des Versorgungs- moduls hörbar eingerastet werden. ® miniPERM Versorgungsmoduls Die Silikonmembran des ®...
  • Seite 15 Umdrehungsgeschwindigkeit eingestellt werden, mit steigender Zelldichte wird die Umdrehungsgeschwindigkeit erhöht. (Display 4 - 20) Auf dem Display der Steuereinheit wird der doppelte Wert eingestellt, da der Durchmesser des miniPERM ® Bioreaktors doppelt so groß ist wie der Durchmesser der Antriebsrolle der Universaldrehvorrichtung.
  • Seite 16 ® Bedienungsanleitung miniPERM Problem Lösung Medium • Unter den Bedingungen jeder Hochzelldichte-Kulturmethode sind NaHCO -Gehalt angewiesen. Die Zellen können in den gleichen NaHCO Mediumwechsel nach lachsrot-gelblich zu sehen ist, ist die Kapazität, Metabolite Serum • Unter den Bedingungen der Hochzelldichte-Kulturmethode ist eine ®...

  • Seite 17: Problemstellung Und Lösung Literatur

    ® miniPERM Bioreaktor hybridoma culture methods Tutas, M. Kultivierung von Maus-Hybridomzelln im miniPERM ® M.; Nagels, H.-O.; Fiebig, H. Bioreaktor mit proFree mab In vitro production of monoclonal antibodies in high Cell Diagnostica GmbH, Deutschland concentration in a new and easy to handle modular Lingnau, A.

  • Seite 18: Zubehör

    ® Bedienungsanleitung miniPERM miniPERM ® Zubehör ➄ ➃ ➀ ➁ ➂ des miniPERM ® gegen einen neuen Verschluss ausgetauscht werden. ➀ Sterile 2 ml und 50 ml Einmalspritzen mit Luer- ➄ und Luer-Lock-Anschluss miniPERM ® Ständer Der miniPERM ® und der Ernte.
  • Seite 19 ® Bedienungsanleitung miniPERM Verpackung Bestell-Nr. Beschreibung Stück/Karton miniPERM ® classic Bioreaktor, steril miniPERM ® classic Produktionsmodul, steril 94.6077.121 miniPERM ® Bioreaktor, steril ® 94.6077.017 miniPERM Produktionsmodul, steril Verpackung Bestell-Nr. Beschreibung Stück/Karton ® ® 94.6001.036 94.6077.037 94.6077.136 Einmalspritze, 2 ml Luer, steril 94.6077.137...

  • Seite 20: Kurzanleitung

    ® Bedienungsanleitung miniPERM Kurzbedienungsanleitung ® Am Beispiel des miniPERM miniPERM ® Vorbereitung der Zellen 35 ml frisches 35 ml Medium (1-5 x 10 Zellen/ml) Vorbereitung des miniPERM ® Bioreaktors (Der Bioreaktor steril kann ohne Vorbereitung eingesetzt werden) 1,2 bar 121°C/250°F 20 min Befüllen des miniPERM...
  • Seite 21 ® Bedienungsanleitung miniPERM Mediumwechsel 350-400 ml Medium Probenentnahme Ernte 600 x g 10 min 4°C...
  • Seite 22 Bedienungsanleitung miniPERM ® SARSTEDT AG & Co. KG Sarstedtstr. 1 D-51588 Nümbrecht www.sarstedt.com...
  • Seite 23 User Manual ® miniPERM...
  • Seite 24 ® User Manual - miniPERM...
  • Seite 25 ® User Manual - miniPERM Contents ..............................26 ® bioreactor Operating instructions ............................28 ® High density cell culture in the miniPERM bioreactor ..................34 High density cell culture Production rate Changing the medium ® bioreactor Troubleshooting ..............................Problems and solutions Literature ................................39 Publications and application notes Accessories ..............................40...
  • Seite 26 ® User Manual - miniPERM Introduction Function of the miniPERM ® bioreactor ® Design of the miniPERM bioreactor 1. Dialysis membrane ® miniPERM Neither the cells nor high molecular weight products released by the cells, e.g. secreted monoclonal anti- and other cells in high densities (“high density culture”).
  • Seite 27 ® User Manual - miniPERM 2. Silicone membrane 4. Universal Turning Device the incubator atmosphere into the production module metabolic waste products through the membranes, through the silicone membrane. The CO produced cells and the medium must be circulated continuously.

  • Seite 28: Operating Instructions

    ® For using the miniPERM module the cell suspension contains Ensure the production module are completely ® 2. Preparation of the miniPERM bioreactor ® 2.1 Pre-assembled miniPERM sterile ® has been assembled 2.2 Multiple-use miniPERM ®...
  • Seite 29 ® User Manual - miniPERM ® 3. Filling the miniPERM bioreactor 3.1 Introducing the cell suspension into the production module The cell suspension is introduced into the production • Mount the miniPERM ® bioreactor on the stand the three Luer Lock connectors is positioned at...
  • Seite 30 ® User Manual - miniPERM 3.2 Introducing the medium into the nutrient module than 400 ml into the nutrient module. An air space 350 to 400 ml medium ® bioreactor, The rolling speed must be selected according to the • Close the neck opening with the screw cap.
  • Seite 31 ® User Manual - miniPERM Under no 4. Taking samples circumstances 4.1 Taking samples through a port of the should the screw production module ® • Place the miniPERM bioreactor in a sterile hood. • Ensure that pressure is released. Hold the production module be ®...
  • Seite 32 ® User Manual - miniPERM Small diameter 4.2 Taking samples through a septum ”) should be used in order to retain the sterile barrier. The septum caps • Prepare the miniPERM ® bioreactor as described in 4.1. 6 times. soaked in 70% pharmaceutical ethanol.
  • Seite 33 ® User Manual - miniPERM 6. Changing the medium in the nutrient module utmost importance when changing the medium. • Place the miniPERM ® in a sterile hood. the nutrient module. Care must be taken port or run down the sides ®...

  • Seite 34: High Density Cell Culture In The Miniperm Bioreactor

    24-hour period. Changing medium . The the medium should be supplemented with additional content (DMEM Due to the optimal gas exchange in the miniPERM ® bioreactor and the high cell density the initial glucose...
  • Seite 35 ® User Manual - miniPERM Troubleshooting Problem Solution The cells are not growing ® culture with bioreactor. The cells do not reach high cells/ml) can be obtained. ® Cells aggregate and die occurrence, all necessary manipulations must be carried out as •...
  • Seite 36 • The humidity inside the CO incubator may be too low. production module is always Make sure that the humidity is at least 90%. expanded outwards, due to a build- with cold medium (4°C) and the miniPERM ® bioreactor has been production module. pressure only.
  • Seite 37 • Use a septum port to take samples. Replace one screw cap on page 41). has been opened. the medium. ® them to another sterile miniPERM bioreactor. Rotation speed The turning speed must be selected according to the robustness • Generally, the bioreactor has to be rotated at low speed at the speed can be increased concomitantly.

  • Seite 38: Changing The Medium

    ® User Manual - miniPERM Problem Solution Medium ® bioreactor, the cells can -dependent media normally Changing the medium than 4 g/l, otherwise the medium should be additionally supplemented accordingly. • The medium in the nutrient module should be replaced as soon as Serum •...

  • Seite 39: Problems And Solutions Literature

    Hermelink, H.K. Wuppermann, F. Apoptotic in vitro and in vivo activity of the human ® Cultivation of a murine hybridoma cell line in miniPERM monoclonal antibody SC-1 on stomach cancer cells classic and miniPERM ® HDC 50 bioreactors 04/1997...

  • Seite 40: Accessories

    ® User Manual - miniPERM miniPERM ® Accessories ➄ ➃ ➀ ➁ ➂ ➄ ® miniPERM stand ® For mounting the miniPERM bioreactor during ➀ Sterile single-use 50 ml Luer Lock and 2 ml Luer syringes Start-up Support Kit ➁...
  • Seite 41 ® User Manual - miniPERM Packaging Order no Description unit/case miniPERM ® classic Bioreactor, sterile miniPERM ® classic Production module, sterile 94.6077.121 miniPERM ® Bioreactor, sterile ® 94.6077.017 miniPERM Production module, sterile Packaging Order no Description unit/case ® ® 94.6001.036 94.6077.037...
  • Seite 42 ® User Manual - miniPERM Brief instructions for use ® ® For using the miniPERM Preparation of cells 35 ml 35 ml fresh (1-5 x 10 cells/ml) medium miniPERM ® preparation 1,2 bar 121°C/250°F 20 min Filling 350 - 400 ml medium...
  • Seite 43 ® User Manual - miniPERM Medium change 350-400 ml medium Sampling Harvesting 600 x g 10 min 4°C...
  • Seite 44 User manual - miniPERM ® SARSTEDT AG & Co. KG Sarstedtstr. 1 D-51588 Nümbrecht www.sarstedt.com...

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