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Leica TCS SP2 Benutzerhandbuch
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Verwandte Anleitungen für Leica TCS SP2

Inhaltszusammenfassung für Leica TCS SP2

  • Seite 1 True Confocal Scanner Leica TCS SP2 Benutzerhandbuch...

  • Seite 2: Inhaltsverzeichnis

    Bildaufnahmen von Auswertungsbereichen (ROI-Scan) ...............119 Einzelbilder oder Bildserien verknüpfen ..................124 Einzelbilder oder Bildserien trennen .....................131 Allgemeines .............................135 Einführung in die Hilfe der Leica Confocal Software ..............135 Kontextsensitive Hilfe öffnen......................136 Datenaufnahmefunktionen .......................137 Strahlengang einstellen ........................137 Akusto-optischen Strahlteiler (AOBS) einstellen (optional) ............139 Objektiv auswählen ........................141...
  • Seite 3 Definition eines Bleichexperiments ....................166 Unidirektionalen oder Bidirektionalen Scan auswählen..............168 Phase einstellen ...........................169 Scanfeld drehen ...........................169 Aufnahmeparameter eines Experiments übernehmen ..............171 Bildaufnahme einer Linie im Mittelungsverfahren................171 Bildaufnahme im Burstbetrieb.......................172 Bildaufnahme im Mittelungsverfahren...................172 Bildaufnahme im Akkumulationsverfahren ..................173 Bildaufnahme mit einer digitalen Auflösung von 8 Bit oder 12 Bit..........173 UV-Linsenrad einstellen (option)....................174 Laserlinie für Bildhintergrund auswählen (ROI Scan)..............174 Laserlinien für einzelne Auswertungsbereiche auswählen (ROI Scan)..........175...
  • Seite 4 Multicolor (optional) ........................270 3D (optional)..........................281 Anhang ............................300 Anpassungsfunktion zur Korrektur von Trendverläufen..............300 Funktionsweise der Booleschen Verknüpfungen ................302 Optionales Trigger-Bedienpult ......................303 Glossar ............................305 Spezifikationen..........................309 Maße und Dimensionen Leica TCS SP2..................309 Technische Spezifikationen und Anschlussbedingungen für TCS SP2 .........310 Konformitätserklärung ........................313 Index..............................314...

  • Seite 5: Allgemeines

    Schritte aus, um die gewünschte(n) Aktion(en) auszulösen. Wir empfehlen Ihnen, dieses Handbuch noch einmal durchzulesen, nachdem Sie bereits eine Weile mit dem Leica TCS SP2 gearbeitet haben. Sie werden beim zweiten Lesen auf nützliche Funktionen stoßen, die Sie beim ersten Mal übersehen haben.

  • Seite 6: Begriffe Und Schreibweisen

    Bedienoberfläche eingeblendet. Legende Es gibt zwei Legenden in der Leica Confocal Software, in denen die Parameter und Einstellungen einer Bildaufnahme angezeigt werden. Die Legende Experiment kann am rechten Rand des Ansichtsfensters Viewer eingeblendet werden. Die Legende Hardware wird im Menü View aufgerufen und als separates Fenster am rechten Rand der Bedienoberfläche eingeblendet.

  • Seite 7: Neu In Dieser Handbuchversion

    Graphische Darstellung von Messwerten einer Online-Messung (Kapitel Datendarstellungsfunktionen, Seite 187) • Aktualisierte Beschreibungen von Arbeitsprozessen und Übungen (Kapitel Vorgehensweisen und Übungen zu ausgewählten Prozessen, Seite 65) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 7 von 323...

  • Seite 8: Konfokale Bildgebung

    Hilfe von kleinen, schnellen, mit Galvanometern betriebenen Spiegeln, wie sie von LEICA verwendet werden, Punkt für Punkt ab. Das LEICA TCS SP2-System ermöglicht es, eine einzelne Fokalebene wie auch eine ganze Reihe von Ebenen – horizontal oder vertikal – abzubilden. Ein einziger vertikaler Schnitt, oder xz-Scan, ermöglicht eine Seitenansicht der Probe.
  • Seite 9 Auflösung entlang der z-Achse beträgt damit etwa die Hälfte der Auflösung innerhalb der Fokalebene. Bei dem LEICA TCS SP2-Mikroskop handelt es sich um ein echtes Punkt-Scanning-System mit extrem hoher Empfindlichkeit und theoretischer x-, y- und z-Auflösung, das keine Kompromisse eingeht.

  • Seite 10: Hilfe Über Das Internet

    Leica Microsystems Heidelberg GmbH Allgemeines Integration Das Leica TCS SP2 wurde als ganzheitliches System konzipiert. Alle optischen und mechanischen Elemente arbeiten nahtlos mit der Computer-Hardware und -Software zusammen. Die dazugehörige Leica Confocal Software unterstützt den gesamten Prozeß der Bilderstellung, angefangen beim optischen Schneiden über die Bildverarbeitung und -analyse (die Hauptanwendung in der Software)

  • Seite 11: Rechtliche Hinweise

    System sowie die Übersetzung in eine andere Sprache ein. EIGENTÜMERRECHTE Die in diesem Dokument enthaltenen Daten sind Eigentum der Leica Microsystems Heidelberg GmbH und stehen ausschließlich den Kunden dieses Unternehmens zu ihrer Sicherheit sowie für einen effizienten Betrieb und die korrekte Wartung des hierin beschriebenen Produktes zur Verfügung. Die...
  • Seite 12 Die in diesem Dokument beschriebene Software unterliegt einer Lizenzvereinbarung, die im Produkt eingeschlossen ist. Diese Vereinbarung erläutert die Bedingungen, unter denen die Verwendung des Produktes erlaubt bzw. verboten ist. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 12 von 323...

  • Seite 13: Sicherheitshinweise

    Allgemeine Sicherheitsanweisungen Ihre Sicherheit steht an erster Stelle. Lesen und beachten Sie daher alle in diesem Handbuch sowie die auf dem Gerät angebrachten Warnungen und Sicherheitshinweise, bevor Sie Leica-Geräte in Betrieb nehmen. Wenn Sie die Sicherheitswarnungen und Sicherheitshinweise nicht beachten, kann dies zu schwerer Körperverletzung sowie zu erheblichem Sachschaden am Gerät und an den Daten...
  • Seite 14 Herstellung gültig waren. Da nicht alle möglichen Gefahrensituationen vom Hersteller vorhersehbar sind, obliegt es dem Anwender, bei Installation, Betrieb und Wartung des Produktes sorgfältig und mit gesundem Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 14 von 323...
  • Seite 15 Klasse 3B sowie für elektrische Hochspannungsgeräte gelten. Abweichen von den vorgegebenen Betriebs- und Wartungsvorgängen geschieht ausschließlich auf Risiko des Benutzers. Das Leica TCS SP2 ist harmlos sofern es gemäß den Anweisungen verwendet wird Für die Einhaltung der geltenden Sicherheitsbestimmungen ist der Betreiber verantwortlich.
  • Seite 16 Leica Confocal Software beschriebenen Zwecke. Das System wurde für das Erstellen von konfokalen Laser Scan-Bildern und quantitativen Messungen im Bereich der Werkstoffkunde ausgelegt. Jeglicher Einsatz des Leica TCS SP2 zu anderen Zwecken oder in anderen Anwendungen gilt als unsachgemäßer und unzulässiger Gebrauch. Der Benutzer übernimmt das volle Risiko für alle Experimente, die mit diesem System durchgeführt werden, sowie...
  • Seite 17 Sicherheitsverordnungen alles nur mögliche unternommen, um die Sicherheit des Benutzers zu maximieren und Gesundheitsrisiken zu minimieren. Der Benutzer hat das TCS SP2 gemäß den Anweisungen zu betreiben, um seine eigene Sicherheit zu gewährleisten. Im folgenden werden verschiedene wichtige Punkte aufgeführt: Objektive niemals während eines Scan-Vorgangs austauschen...
  • Seite 18 Laser, die beim Hineinschauen in den direkten Strahl, den spiegelnd reflektierten Strahl oder in die diffuse Reflexion (Streuung) Augenverletzungen oder Hautverbrennungen verursachen können. Es kann Brandgefahr entstehen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 18 von 323...
  • Seite 19 1. an allen Öffnungen, aus denen Licht austreten kann Für Laser, die im sichtaren Spektralbereich Für Laser, die im ultravioletten Spektralbereich emittieren emittieren (Ar/ ArKr/ Kr/ HeNe/ HeCd/ Diode) (Ar-UV) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 19 von 323...

  • Seite 20: Laser Radiation

    < 400 mW ArKr 457-675 nm CLASS IIIb LASER PRODUCT LASER RADIATION AVOID DIRECT EXPOSURE TO BEAM < 400 mW ARGON 457-514 nm CLASS IIIb LASER PRODUCT Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 20 von 323...
  • Seite 21 TH E APPLIC APLE STAND AR D S OF 21CFR1040 PLEASE READ INSTRUCTIONS BEFORE USING Anbringung am Laser selbst: Obwohl die Strahlung des 405nm Lasers gerade noch im sichtbaren Spektralbereich Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 21 von 323...
  • Seite 22 Konfokalsysteme die mit einem UV-Laser betrieben werden, verfügen über eine spezielle Mikroskopoptik. Aus diesem Grunde ist die Nachrüstung eines Konfokalsystems, das für den sichtbaren Spektralbereich konzipiert wurde, mit einem UV-Laser nicht ohne weiteres möglich. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 22 von 323...
  • Seite 23 Systeme OHNE UV-Laser LASER RADIATION AVOID EXPOSURE IS EMITTED FROM THIS APERTURE für Systeme MIT UV-Laser VISIBLE AND INVISIBLE LASER RADIATION AVOID EXPOSURE IS EMITTED FROM THIS APERTURE Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 23 von 323...
  • Seite 24 Systeme OHNE UV-Laser LASER RADIATION AVOID EXPOSURE IS EMITTED FROM THIS APERTURE für Systeme MIT UV-Laser VISIBLE AND INVISIBLE LASER RADIATION AVOID EXPOSURE IS EMITTED FROM THIS APERTURE Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 24 von 323...
  • Seite 25 LASER RADIATION WHEN OPEN AVOID EXPOSURE TO BEAM Für Systeme mit ArKr-Laser LASER RADIATION AVOID DIRECT EXPOSURE TO BEAM < 15 mW HeNe 633 nm CLASS IIIb LASER PRODUCT Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 25 von 323...
  • Seite 26 < 500 mW Ar-Kr-HeNe 457-633 nm CLASS IIIb LASER PRODUCT LASER RADIATION AVOID DIRECT EXPOSURE TO BEAM < 500 mW Ar-Kr-HeNe-HeCd 442-633 nm CLASS IIIb LASER PRODUCT Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 26 von 323...

  • Seite 27: Systemüberblick

    Durchlichtdetektor (non-descanned), 6: UV-Modulator (nur für UV-Systeme), 7: Lasersicherheits- Shutter, 9: gekapselte Lichtleitfasern (alle Lichtleitfasern, die zum Scankopf führen), 10: Strahlvereinigung, VIS Modulator, 11: Scankopf, 12: Versorgungseinheit (Supply Unit), 13: Okulare Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 27 von 323...
  • Seite 28 1: Inverses Mikroskopstativ, 2: Objektive, 3: Mikroskop-Probentisch, 4: Kondensor, 5: Aluminiumscheibe als Strahlfänger, Schutzhülse zwischen Kondensor und Durchlichtdetektor, 6: Anschluß für Scankopf (Scankopf derselbe wie beim aufrechten Mikroskopstativ) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 28 von 323...

  • Seite 29: Starten Des Betriebssystems

    Geben Sie hier Ihr Kennwort ein, mit dem Sie sich als gültiger Benutzer dieses Computers identifizieren. Der Standardbenutzername für das Leica TCS SP2 System lautet "TCS_User". Ein Standardkennwort ist nicht eingestellt. Es empfiehlt sich, für jeden Benutzer eine eigene Benutzer-ID einzurichten (Systemadministrator). Es werden dabei persönliche Verzeichnisse angelegt, die nur vom jeweiligen Benutzer gelesen werden können.
  • Seite 30 Microsoft Exchange basiert. Falls sich in dem Netzwerk, an das Ihr System angeschlossen ist, bereits ein MS Mail Postoffice befindet, kann der Mail-Client des Betriebssystems direkt eine Verbindung Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 30 von 323...
  • Seite 31 3. Klicken Sie auf die Gruppe, die das Programm enthält, das Sie starten möchten (z.B. LCS). 4. Klicken Sie auf das Program, das Sie starten möchten (z.B. Leica LCS). Außerdem können Sie ein Programm starten, indem Sie ein Dokument, das Sie mit dem betreffenden Programm erstellt haben, öffnen.
  • Seite 32 Monat und das Jahr zu ändern. Die Uhrzeit kann außerdem auch verändert werden, indem Sie zunächst die digitale Anzeige auswählen und die Zeit dann mit Hilfe des nach oben und Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...
  • Seite 33 Klicken Sie grundsätzlich immer erst auf den Befehl Shut Down , bevor Sie Ihren PC ausschalten. Über den Befehl Shut Down wird das Betriebssystem korrekt beendet (heruntergefahren). Gleichzeitig stellen Sie damit sicher, dass auch alle übrigen noch laufenden Prozesse ordnungsgemäß Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 33 von 323...

  • Seite 34: Einrichten Von Benutzern

    ("username" ist ein Platzhalter. An seiner Stelle muss der tatsächlich definiertes Benutzername angegeben werden.] Werksseitig eingebaute Festplatten werden mit 2 Partitionen (C:\ und D:\) geliefert. Das Benutzerverzeichnis soll auf der Partition D:\ angelegt werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 34 von 323...

  • Seite 35: Inbetriebnahme Des Konfokalsystems

    Ohne den Kopierschutzstecker können Sie die LCS Software NICHT starten. 2. Schalten Sie das oder die Mikroskop(e) und die Lichtquellen ein. Alle manuellen Leica Mikroskopstative (DM-LM, DM-IRB, DM-R, DM-LFSE) lassen sich an den seitlich am Stativ angebrachten Schaltern ein- und ausschalten.
  • Seite 36 Schaltstange auf "VIS" stellen und Fluoreszenzfilterrad auf entsprechenden Filterwürfel drehen Pos.: 1 DAPI (optional), Pos2: TRITC, Pos3: FITC, Pos4: Leerposition (Scan) b.) Einstellen auf konventionelle Beobachtung bei den inversen Mikroskopen der Baureihe DM-IRxx Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 36 von 323...
  • Seite 37 8. Wechseln Sie nun in den Konfokalbetrieb a.) Umstellen auf Konfokalbeobachtung bei den aufrechten Mikroskopen der Baureihe DM-Rxxx, DM- LFxx DM_Rxx Mikroskopreihe: DM-LFSx Mikroskopreihe: Schaltstange und Fluoreszenzfilterrad auf "Scan" stellen Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 37 von 323...
  • Seite 38 Methoden können selbstverständlich auch eigene Methoden definiert und abgespeichert werden. Siehe hierzu das Kapitel "Benutzeranpassungen Software". 10. Auswahl des Mikroskopobjektivs Drücken Sie die Taste "Obj." im Arbeitsschritt "Acquisition" Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 38 von 323...
  • Seite 39 Sie können wählen zwischen a.) räumlichen Scanverfahren (xyz, xzy) b.) zeitlichen Scanverfahren (xt, xyt, xzt, xyzt) c.) spektralen Scanverfahren (xy λ , xz λ ) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 39 von 323...
  • Seite 40 Aufnahmeparametern die Bildqualität optimieren. Zu den Optimierungsparametern gehören: a.) die genaue Z-Position innerhalb der Probe b.) der Verstärkungsfaktor des ausgewählten Detektors c.) den Durchmesser der Detektionslochblende d.) den Zoomfaktor Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 40 von 323...
  • Seite 41 Weitere Details zu dieser Funktion können Sie der Onlinehilfe entnehmen 14.7. Drücken Sie die Taste "Aver." zur Definition der Anzahl von Mittelungsvorgängen (Frame- Average) Gemittelt werden bei diesem Verfahren immer Aufnahmen eines einzelnen optischen Schnittes Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 41 von 323...

  • Seite 42: Drücken Sie Nun Die Taste "Series" Zur Aufnahme Der 3D-Serie

    Wählen Sie aus der Menüzeile File->Save as zum Abspeichern des Datensatzes Weitere Details zum Thema Abspeichern von Datensätzen und zu Speicherformaten, siehe Kapitel „Öffnen und Speichern von Datensätzen“, Seite 49. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 42 von 323...

  • Seite 43: Einstellen Der Köhlerbeleuchtung

    2. Öffnen der Aperturblende Öffnen Sie die Aperturblende vollständig. Diese wird später wieder soweit geschlossen werden, bis der gewünschte Kontrast erreicht ist. DM-Rxx DM-Irxx DM-LSFxx A: Aperturblende, F: Feldblende Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 43 von 323...
  • Seite 44 Schließen Sie die Aperturblende so weit, bis Sie den gewünschten Bildkontrast erreicht haben (Öffnen auf ca. 70% des maximalen Durchmessers). 8. Wenn Sie das Objektiv wechseln Es kann vorkommen, dass Sie nach Objektivwechsel die Köhlerbeleuchtung nachjustieren müssen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 44 von 323...

  • Seite 45: Pflege Und Reinigung

    Standortwahl Setzen Sie das System niemals Zugluft aus. Es sollte dafür gesorgt werden, dass das TCS SP2 niemals in der Nähe von Aufzügen, Klimaanlagen oder anderen Ein- und Auslässen aufgestellt wird. Planen Sie deshalb den Aufstellungsort genau.
  • Seite 46 Leica Microsystems Heidelberg GmbH Pflege und Reinigung Alle LEICA-Komponenten und -Systeme wurden sorgfältig und mit den modernsten Produktionsmethoden hergestellt. Falls Sie trotzdem mit Ihrem Gerät Probleme haben sollten, versuchen Sie bitte nicht, die Geräte oder Zubehörteile selbst zu reparieren, sondern wenden Sie sich bitte an Ihre Leica-Vertretung.

  • Seite 47: Die Leica Confocal Software: Ein Überblick

    Zweitinstallationen auf einem weiteren Rechner und ist z.B. für Schulungen oder Offline-Analyse von bereits aufgenommenen Datensätzen geeignet. Vorgehensweise beim Start der Software Wählen Sie Start|Programs|Leica Confocal Software .. Es öffnet sich der Startbildschirm der Leica Confocal Software. In diesem Fenster können Sie nun aus drei Profilen wählen. Company Mit dieser Option wird die Leica Confocal Software mit werksseitig vorgegebenen Einstellungen gestartet.
  • Seite 48 Das Ansichtsfenster kann geöffnet werden über View → → → → Experiment Overview . Statusleiste (Statusbar) Die Statusleiste befindet sich am unteren Rand der Benutzeroberfläche der Leica Confocal Software. In ihr werden angezeigt: - Der Fortschritt beim Laden von Bilddaten (Progressbar) - Die Versionsnummer der Software - Die Bezeichnung der Maschinenkonfiguration (Systemtyp).

  • Seite 49: Öffnen Und Speichern Von Datensätzen

    Lesbare Dateiformate Folgende Dateiformate lassen sich in der Leica Confocal Software öffnen und darstellen Experimente (*.lei): Es handelt sich hierbei um ein Leica-spezifisches, binäres Datenformat. Dieses Format ist für Daten von kompletten Experimenten vorgesehen. TIFF-Dateien (*.tif): Es handelt sich dabei um Leica Bilddateien im Single- und Multi-TIFF-Format. Es können sowohl Bilddateien in früher verwendeten TCS Formaten als auch externe Dateien im RGB-TIFF-Format...

  • Seite 50: Beschleunigungstasten

    LCS Softwarefunktionen: Allgemeiner Überblick Datenorganisation durch Gruppieren von Experimenten Das Konzept der Leica Confocal Software erlaubt es, Einzelbilder, Bildserien sowie Ergebnisse von Bildverarbeitungsschritten zu einer Gruppe - einem Experiment - zusammenzufassen. Sie erhalten einen Überblick über die geladenen Experimente im Experimentenansichtsfenster (Experiment Overview).

  • Seite 51: Menüfunktionen

    Es wird nicht nachgefragt, ob das Experiment vor dem schließen gespeichert werden soll. Save: Speichert das aktuelle Experiment. Save as: Speichert das aktuelle Experiment unter einem anderen Namen. Save all: Speichert alle Experimente sowie die Präsentationsseiten. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 51 von 323...
  • Seite 52 Startet den Makrorecorder zur automatischen Aufzeichnung eines Makros. (Weitere Details entnehmen sie bitte der zur optionalen Makroentwicklungsumgebung mitgelieferten Dokumentation.) Pause Recording: Unterbricht die automatische Aufzeichnung eines Makros. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 52 von 323...
  • Seite 53 (z.B. Scanfelddimensionen), automatische Anpassung der Detektionslochblende. Microscope: Diese Option ermöglicht die Auswahl des verwendeten Leica Mikroskops. Diese Auswahl beeinflusst die Art und Weise der Ansteuerung des Mikroskops (z.B. des motorisierten Objektivrevolvers). Stains: Mit dieser Option können Werte für Farbstoffkurven manuell eingegeben werden.

  • Seite 54: Dateiformate Lcs

    In diesem Format werden Makros abgespeichert. Makros beinhalten VBA ( V isual B asic for A pplication)-Programmcode. Die einzelnen Programmobjekte zur Steuerung des Konfokalsystems werden von Leica in einem Objektmodell bereitgestellt. Weitere Einzelheiten zur Entwicklung von Makros zur Steuerung des Konfokalsystems entnehmen Sie bitte dem Kapitel "Die LCS Makrosprache".
  • Seite 55 .raw gespeichert. Die Namenskonvention lautet: Name des Experiments_Name des Datensatzes_Kanalnummer_z-Dimension_Nummer des optischen Schnittes .raw Experimente (*.lei) Es handelt sich hierbei um ein Leica-spezifisches, binäres Datenformat. Dieses Format ist für Daten von kompletten Experimenten vorgesehen. In diesem Dateiformat wird eine Dateibeschreibungen gespeichert, die auf eine Serie von Bilddateien im TIFF-Format oder im RAW-Format verweist.

  • Seite 56: Spezifikation Des Dateiformats „Lei" (Version Beta 2.000)

    Identifikation für Leica "Lei" 0x016033F0 Format 8 ... 11 Versionsnummer aktuell: =x20000000 12 ... Adresse der Verzeichnistabelle jede mögliche Adresse im Bereich der Gesamtlänge der Datei Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 56 von 323...
  • Seite 57 Datentyp Symbol Beschreibung interne Versionsnummer Anzahl von Bildserien Länge eines Dateinamens in wchar nExt Länge der Dateiendung der Bilddatei in Bytes nExt wchar Dateiendung der Bilddatei Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 57 von 323...
  • Seite 58 Physikalische Startposition mit Längeneinheit z.B. 10 µm Länge der folgenden Zeichenkette in Bytes wchar Name der Bildserie Länge der folgenden Zeichenkette in Bytes wchar Beschreibung der Bildserie Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 58 von 323...
  • Seite 59 Datentyp Symbol Beschreibung [byte] SAFEARRAY Microsoft-Typ, siehe Anhang 1 für alle Elemente, die die Struktur enthält = sa. rgsabound[0].cElements wchar Bezeichner für den Inhalt des Eintrags Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 59 von 323...
  • Seite 60 (Scan) definiert werden. Eine Koordinate einer Zeitmarke von 0_0_2_7 bedeutet, dass die Zeitmarke zu Beginn eines Datensatzes (0_0_c_#) im zweiten Kanal (0_0_2_#) für den 7. optischen Schnitt(0_0_2_7) gesetzt wurde. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 60 von 323...
  • Seite 61 Beschreibung der Farbzuordnungstabelle (LUT) Länge der folgenden Zeichenkette in Bytes wchar Dateiname der Farbzuordnungstabelle (falls vorhanden) Länge der folgenden Zeichenkette in Bytes wchar Name der Farbzuordnungstabelle selbst Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 61 von 323...

  • Seite 62: Lcs Softwarefunktionen: Allgemeiner Überblick

    // VT_BYREF|VT_I2. long FAR* plVal; // VT_BYREF|VT_I4. float FAR* pfltVal; // VT_BYREF|VT_R4. double FAR* pdblVal; // VT_BYREF|VT_R8. VARIANT_BOOL FAR* pboolVal; // VT_BYREF|VT_BOOL. SCODE FAR* pscode; // VT_BYREF|VT_ERROR. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 62 von 323...
  • Seite 63 Zeiger. Dieser Wert wird benötigt für eine 3-Zustandslogik wie z.B. in der Datenbankabfragesprache SQL. VT_ERROR Ein SCODE-Fehler wurde angegeben.Der Fehlertyp is spezifiziert in scodee . VT_BOOL Eine Boolesche Größe (wahr / falsch) wurde angegeben. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 63 von 323...
  • Seite 64 Ein Datum wird gespeichert als Zahl im double-precision Format. Alle Daten werden VT_DATE gespeichert als Differenztage zum 01.Januar 1900. Der Eintrag "25" beispielsweise entsprOnlinehilfe für TCS SP2icht dem 25.01.1900. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 64 von 323...

  • Seite 65: Vorgehensweisen Und Übungen Zu Ausgewählten Prozessen

    Aufnahmeparametersatz können optimierte Hardwareeinstellungen in einer Datei abgespeichert und mit einem einfachen Doppelklick wieder geladen werden. Mit einem « » gekennzeichnete Aufnahmeparametersätze sind von Leica vordefiniert und können nicht verändert werden. Benutzerdefinierte, editierbare Aufnahmeparametersätze werden im Verzeichnisbaum unter «...
  • Seite 66 » und wählen Sie in der Liste ein Mikroskopobjektiv Objective aus. Falls keine Einträge in der Liste erscheinen, müssen die Mikroskopobjektive den Steckplätzen des Objektivrevolvers zugeordnet werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 66 von 323...
  • Seite 67 Raumbildserien «xyz, xzy», den Zeitbildserien «xt, xyt, xzt, xyzt» und den λ λ Spektralbildserien «xy , xz » wählen. 7. Schritt Klicken Sie auf die Taste « Format » und wählen Sie ein Scanformat aus. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 67 von 323...
  • Seite 68 Bei 8 Bit können 256, bei 12 Bit 4096 verschiedene Intensitätswerte aufgenommen werden. 10. Schritt Starten Sie nun mit der Taste « » die Bildaufnahme im Endlosscan, um die Continuous Bildqualität während der Bildaufnahme zu optimieren. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 68 von 323...
  • Seite 69 Detektionskanäle auf die maximale Voltzahl. Viele Aufnahmeparameter sind schneller und bequemer über die Bedienkonsole als über die Tasten einzustellen. & siehe Kapitel „Wie man mit der Bedienkonsole Aufnahmeparameter einstellt“ (Seite Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 69 von 323...
  • Seite 70 Kapitel „Wie man mit der Bedienkonsole Aufnahmeparameter einstellt“ (Seite 13. Schritt Klicken Sie auf die Taste « Pinhole » und stellen Sie die Detektionslochblende auf eine Airy-Einheit. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 70 von 323...
  • Seite 71 Abtastpunkten und verbessert sich die Auflösung. Viele Aufnahmeparameter sind schneller und bequemer über die Bedienkonsole als über die Tasten einzustellen. & siehe Kapitel „Wie man mit der Bedienkonsole Aufnahmeparameter einstellt“ (Seite Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 71 von 323...
  • Seite 72 », um die Bildaufnahme im Endlosscan zu beenden. l l l l Sie haben jetzt alle wichtigen Aufnahmeparameter eingestellt und können mit der Aufnahme von Einzelbildern oder Bildserien fortfahren. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 72 von 323...

  • Seite 73: Benutzerdefinierte Aufnahmeparametersätze (Ips) Erzeugen

    Aufnahmeparametersatz können optimierte Hardwareeinstellungen in einer Datei abgespeichert und mit einem Doppelklick wieder automatisch geladen werden. Mit einem « » gekennzeichnete Aufnahmeparametersätze sind von Leica vordefiniert und können nicht verändert werden. Benutzerdefinierte, editierbare Aufnahmeparametersätze werden im Verzeichnisbaum unter «...
  • Seite 74 Der neu definierte Aufnahmeparametersatz erscheint im Listenfeld unter « ». Immer wenn Sie auf «My Gorgeous IPS» doppelklicken, werden alle unter diesem Aufnahme- parametersatz abgespeicherten Hardwareeinstellungen geladen. Wo werden Aufnahmeparametersätze gespeichert? Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 74 von 323...
  • Seite 75 Klicken Sie in diesem Dialogfenster auf das Register «Security» und dann auf «Permissions». Klicken Sie im Dialogfenster «File Permissions» auf die Schaltfläche «Add..», um die Benutzer auszuwählen, die eine Zugriffsberechtigung erhalten sollen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 75 von 323...
  • Seite 76 «Full Access» und schließen Sie das Dialogfenster mit «OK». Kopieren Sie im Windows Explorer die Datei des Aufnahmeparametersatzes in das Verzeichnis C:\Program files\ Leica\ Lcs\ Instrument Parameter Settings\... Wichtig: Verwenden Sie dazu den Befehl «Kopieren» und nichtden Befehl «Ausschneiden» ! Wenn Sie das Dialogfenster «Beam Path Setting»...
  • Seite 77 Execution» anklicken. Hinweis Wenn Sie Aufnahmeparametersätze öffnen, die nicht mit der aktuell verwendeten Version der Leica Confocal Software erstellt wurden, kann der Schnellmodus unter Umständen nicht verwendet werden. Sie erhalten dann eine Fehlermeldung und müssen das System neu starten. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...
  • Seite 78 K K K K Im Listenfeld sind bereits einige Standardparameter ausgewählt, die Sie nur bewußt ändern sollten. Wählen Sie die Option «IPS-Apply» und markieren Sie die gewünschten zusätzlichen Aufnahmeparameter. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 78 von 323...

  • Seite 79: Aufnahmeparameter Mit Der Bedienkonsole Einstellen

    Klicken Sie in der Statuszeile der Bedienkonsole auf das Feld (Drehknopf), dem Sie einen anderen Aufnahmeparameter zuordnen wollen. Wählen Sie im Listenfeld den neuen Aufnahmeparameter aus, der dem Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 79 von 323...
  • Seite 80 Entspricht dieser Taste in der Software: Wählen Sie «Z Position» und «Z Wide Position», wenn Sie die Fokusebene (Z- Position) einstellen wollen. Entspricht diesen Tasten in der Software: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 80 von 323...
  • Seite 81 Bei Objektiven mit einer Vergrößerung 20 < m < 30 wird die Einstellung S2 = 7 m pro Umdrehung verwendet. µ Bei Objektiven mit einer Vergrößerung 30 < m < 60 wird die Einstellung S1 = 1 m pro Umdrehung verwendet. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 81 von 323...
  • Seite 82 Wählen Sie «Load», um die Belegung zu laden. Wählen Sie «Rename», um der Belegung einen neuen Namen zu geben. Wählen Sie «Delete», um die Belegung zu löschen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 82 von 323...

  • Seite 83: Raumbildserien Aufnehmen

    Öffnen Sie mit der Taste « Beam » das Dialogfenster «Beam Path Setting» und wählen Sie die Anregungswellenlänge aus und stellen Sie die Intensität der Laserlinie ein. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 83 von 323...
  • Seite 84 Wählen Sie den Neutralteiler RT 30/70 bei Reflektions- aufnahmen. 4. Schritt Wählen Sie einen oder mehrere Detektionskanäle «PMT» und stellen Sie den verwendeten Fluoreszenzfarbstoff und die Detektionsbandbreite ein. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 84 von 323...
  • Seite 85 Probe und des Mediums zwischen Deckglas und Objektiv optimal ist. Doppelklicken Sie auf den Schieberegler des ausgewählten Detektionskanals. Im Dialogfenster «Range Properties» geben Sie je eine Wellenlänge für Anfang und Ende des Detektionsbandes ein. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 85 von 323...
  • Seite 86 Kapitel „Aufnahmeparameter für die erste Bildaufnahme einstellen“ (Seite 65) 5. Schritt Öffnen Sie mit der Taste « Series » das Dialogfenster «Series Scan Overview» und definieren Sie den Anfangspunkt und den Endpunkt der Raumbildserie. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 86 von 323...
  • Seite 87 Doppelklicken Sie auf «Absolute Position», geben Sie einen Wert ein und klicken Sie dann auf das Kontrollkästchen «End». Viele Aufnahmeparameter sind schneller und bequemer über die Bedienkonsole als über die Tasten einzustellen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 87 von 323...
  • Seite 88 Möglichkeit, die Anzahl der Aufnahmen «#» oder die Schrittweite «Step size» in Abhängigkeit der Höhe des Bildstapels «Image dim.z» zu berechnen. Wenn Sie die Anzahl der Aufnahmen verändern und auf «Calculate» neben «#» Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 88 von 323...
  • Seite 89 Bei der Aufnahme von großen Datensätzen kann die Verwendung der «Gallery» Funktion die Aufnahmeleistung verschlechtern. 9. Schritt Für eine statistische Auswertung der Raumbildserie klicken Sie auf das Pfeilsymbol Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 89 von 323...
  • Seite 90 Detektionskanälen getrennt als neuen Datensatz im aktiven Experiment anlegen. Klicken Sie auf das Bild des gewünschten Detektionskanals bzw. auf das Überlagerungsbild. Halten Sie den Mauszeiger über das Ansichtsfenster Viewer und öffnen Sie das Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 90 von 323...
  • Seite 91 Sie können Dateien von einem Experiment in das andere ziehen und verschieben (drag and drop), indem Sie die Datei mit gedrückter linker Maustaste auf den Ordner des gewünschten Experiments ziehen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 91 von 323...

  • Seite 92: Zeitbildserien Aufnehmen

    Welche Scanmodi werden angezeigt? Die Zahl der zur Verfügung stehenden Scanmodi hängt von der Art des verwendeten Z- Stellantriebs ab. Der Z-Stellantrieb wird mit der Taste «z-Scan» eingestellt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 92 von 323...
  • Seite 93 Wählen Sie den Doppeldichroiten DD 488 / 543 bei Aufnahmen von FITC und TRITC oder GFP und DsRED mit einer Anregungswellenlänge von 488 und 543 nm und einer Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 93 von 323...
  • Seite 94 Probe und des Mediums zwischen Deckglas und Objektiv optimal ist. Doppelklicken Sie auf den Schieberegler des ausgewählten Detektionskanals. Im Dialogfenster «Range Properties» geben Sie je eine Wellenlänge für Anfang und Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 94 von 323...
  • Seite 95 Eingabefeld erscheint grau. Geben Sie nun die Werte für die anderen Parameter ein. Klicken Sie auf «Apply», um den Parameter zu berechnen. Klicken Sie auf «Reset», um die zuletzt gespeicherten Werte anzuzeigen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 95 von 323...
  • Seite 96 Pausenintervalls für die Positionierung des Scanspiegels. Im Feld «Complete Time» geben Sie die Gesamtzeit für die Bildaufnahme ein. Ist der Scanmodus «xyzt» ausgewählt, sind folgende Parameter einzustellen: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 96 von 323...
  • Seite 97 Mittelwert angezeigt. 8. Schritt Für eine statistische Auswertung der Zeitbildserie klicken Sie auf das Pfeilsymbol « Quantify » und dann zum Beispiel auf die Taste «Histogram». Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 97 von 323...
  • Seite 98 Größe ändern, mit der Taste «Clear» können Sie alle Auswertungsbereiche löschen 10. Schritt Folgende Befehle stehen im Dialogfenster «Histogram» zur Verfügung, wo der zusammen mit verschiedenen statistischen Werten angezeigt wird. Auswertungsgraph Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 98 von 323...
  • Seite 99 Wählen Sie «All (snapshot)», um eine Bildschirmkopie des Gesamtbildes als neue Datei anzulegen. Die gespeicherten Dateien befinden sich im Ansichtsfenster «Experiment Overview», wo Ihnen im Kontextmenü folgende Befehle zur Verfügung stehen: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 99 von 323...
  • Seite 100 Sie können Dateien von einem Experiment in das andere ziehen und verschieben (drag and drop), indem Sie die Datei mit gedrückter linker Maustaste auf den Ordner des gewünschten Experiments ziehen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 100 von 323...

  • Seite 101: Lambdaserien (Spektralbildserien) Aufnehmen

    Welche Scanmodi werden angezeigt? Die Zahl der zur Verfügung stehenden Scanmodi hängt von der Art des verwendeten Z- Stellantriebs ab. Der Z-Stellantrieb wird mit der Taste «z-Scan» eingestellt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 101 von 323...
  • Seite 102 Andernfalls doppelklicken Sie auf die grüne Linie und wählen Sie den Neutralfilter «RT 30/70» aus, der sich für eine Lambdaserie besonders eignet. 4. Schritt Wählen Sie einen Detektionskanal «PMT» und ordnen Sie diesem eine Farbzuordnungstabelle zu. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 102 von 323...
  • Seite 103 Definieren Sie die Detektionsbandbreite für den verwendeten Detektionskanal. Doppelklicken Sie auf den Schieberegler des ausgewählten Detektionskanals. Im Dialogfenster «Range Properties» geben Sie je eine Wellenlänge für Anfang und Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 103 von 323...
  • Seite 104 Anzahl von Aufnahmen in gleichmäßigen Schrittweiten aufgenommen. 8. Schritt Um die Bildqualität während der Bildaufnahme zu optimieren, starten Sie mit der Taste « » die Bildaufnahme im Endlosscan. Continuous Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 104 von 323...
  • Seite 105 Für eine statistische Auswertung der Lambdaserie klicken Sie auf das Pfeilsymbol « Quantify » und dann zum Beispiel auf die Taste «Pr.(z)». Das Betätigen dieser Taste öffnet das Dialogfenster «Profile through Stack» und aktiviert Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 105 von 323...
  • Seite 106 Auswertungsgraph zusammen mit verschiedenen statistischen Werten angezeigt wird. Halten Sie den Mauszeiger über das Diagramm und öffnen Sie das Kontextmenü, indem Sie die rechte Maustaste betätigen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 106 von 323...
  • Seite 107 Wählen Sie «New Window», um die aktuelle Aufnahme in einem zweiten Ansichtsfenster zu öffnen. Sie können so dasselbe Bild zum Beispiel mit einer anderen Farbzuordnungs- tabelle anzeigen lassen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 107 von 323...
  • Seite 108 Sie können Dateien von einem Experiment in das andere ziehen und verschieben (drag and drop), indem Sie die Datei mit gedrückter linker Maustaste auf den Ordner des gewünschten Experiments ziehen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 108 von 323...

  • Seite 109: Sequentielle Bildserien Aufnehmen

    CY5 mit einer Anregungswellenlänge von 488, 543 und 633 nm und einer Detektionsbandbreite von 500 bis 535 nm, 555 bis 620 nm bzw. 650 bis 750 nm. Wählen Sie den Neutralteiler RT 30/70 bei Reflektions- aufnahmen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 109 von 323...
  • Seite 110 Probe und des Mediums zwischen Deckglas und Objektiv optimal ist. Doppelklicken Sie auf den Schieberegler des ausgewählten Detektionskanals. Im Dialogfenster «Range Properties» geben Sie je eine Wellenlänge für Anfang und Ende des Detektionsbandes ein. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 110 von 323...
  • Seite 111 Kapitel „Aufnahmeparameter für die erste Bildaufnahme einstellen“ (Seite 65) 6. Schritt Klicken Sie im Dialogfenster «Beam Path Setting» auf die Schaltfläche « » um die Save Einstellungen der ersten Aufnahmemethode als Aufnahmeparametersatz Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 111 von 323...
  • Seite 112 Die detaillierte Beschreibung der zur Verfügung stehenden Strahlteiler finden Sie in Schritt 3. 9. Schritt Wählen Sie einen Detektionskanal «PMT» und stellen Sie den verwendeten Fluoreszenzfarbstoff und die Detektionsbandbreite ein. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 112 von 323...
  • Seite 113 Im Dialogfenster «Range Properties» geben Sie je einen Wert für Anfang und Ende des Detektionsbandes ein. K K K K Klicken Sie jeweils auf das Symbol der Farbzuordnungstabelle. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 113 von 323...
  • Seite 114 Save » um die Einstellungen der zweiten Aufnahmemethode als Aufnahmeparametersatz abzuspeichern. K K K K Geben Sie dem Aufnahmeparametersatz einen Namen und klicken Sie auf OK. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 114 von 323...
  • Seite 115 Markieren Sie den Aufnahmeparametersatz im Listenfeld oben rechts.im Dialogfenster. Klicken Sie dann auf die Schaltfläche «Add» unten links im Dialogfenster. oder Ziehen und verschieben Sie den Aufnahmeparametersatz (drag and drop), indem Sie Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 115 von 323...
  • Seite 116 15. Schritt Überprüfen Sie im die Parameter, die für die Aufnahme aller Listenfeld «Parameter» sequentiellen Aufnahmemethoden verwendet werden sollen. Klicken Sie das Kontrollkästchen des gewünschten Parameters an. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 116 von 323...
  • Seite 117 Wählen Sie «All (snapshot)», um eine Bildschirmkopie des Gesamtbildes als neue Datei anzulegen. Die gespeicherten Dateien befinden sich im Ansichtsfenster «Experiment Overview», wo Ihnen im Kontextmenü folgende Befehle zur Verfügung stehen: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 117 von 323...
  • Seite 118 Sie können Dateien von einem Experiment in das andere ziehen und verschieben (drag and drop), indem Sie die Datei mit gedrückter linker Maustaste auf den Ordner des gewünschten Experiments ziehen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 118 von 323...

  • Seite 119: Bildaufnahmen Von Auswertungsbereichen (Roi-Scan)

    Klicken Sie auf die Taste « » um die Lasereinstellung für den Bildhintergrund zu speichern. Das Betätigen dieser Taste aktiviert automatisch die Tasten, die Sie in den nächsten Schritten benötigen werden: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 119 von 323...
  • Seite 120 Um den ersten Auswertungsbereich in das Gesamtbild zu zeichnen, klicken Sie auf das Pfeilsymbol « Quantify » und dann zum Beispiel auf die Taste «Wizard» und die Taste «Polygon». Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 120 von 323...
  • Seite 121 » um eine Übersicht über die definierten Configuration Auswertungsbereiche und zugeordneten Laserlinien zu erhalten. Hier können Sie gegebenenfalls noch einmal die Zuordnung von Laserlinie und Auswertungsbereichen ändern. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 121 von 323...
  • Seite 122 Wählen Sie «All (snapshot)», um eine Bildschirmkopie des Gesamtbildes als neue Datei anzulegen. Die gespeicherten Dateien befinden sich im Ansichtsfenster «Experiment Overview», wo Ihnen im Kontextmenü folgende Befehle zur Verfügung stehen: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 122 von 323...
  • Seite 123 Sie können Dateien von einem Experiment in das andere ziehen und verschieben (drag and drop), indem Sie die Datei mit gedrückter linker Maustaste auf den Ordner des gewünschten Experiments ziehen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 123 von 323...

  • Seite 124: Einzelbilder Oder Bildserien Verknüpfen

    Wählen Sie im Listenfeld « Second Source Image » den zweiten Bilddatensatz aus. K K K K Wenn Sie auf die Schaltfäche «Use Selected Image» klicken, wird der im Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 124 von 323...

  • Seite 125: Detektionskanäle Zweier Bilddatensätze Verknüpfen

    Detektionskanäle zweier Bilddatensätze verknüpfen 1. Schritt Wenn Sie die Detektionskanäle zweier Bilddatensätze in einem neuen Bilddatensatz aneinander fügen wollen, wählen Sie im Register «ch» lediglich das Kontrollkästchen «Append» aus. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 125 von 323...
  • Seite 126 überlagern wollen, definieren Sie im Register «ch» im Eingabefeld «Start» die Position, die der jeweilige Bilddatensatz im Ergebnisbild haben soll. Die Detektionskanäle des ersten Bilddatensatzes («Image 1») werden im neuen Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 126 von 323...

  • Seite 127: Zwei Einzelbilder Oder Bildserien Verknüpfen

    Kontrollkästchen «Append» aus. 2. Schritt Wenn Sie zwei Einzelbilder oder Bildserien vertikal aneinander fügen wollen, wählen Sie lediglich im das Kontrollkästchen «Append» aus. Register «y» Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 127 von 323...
  • Seite 128 Bilder verkleinern und in eine zweite Bildserie integrieren 1. Schritt Korrigieren Sie im Register «x» und Register «y» die Dimensionen des Bilddatensatzes, den Sie verkleinern wollen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 128 von 323...
  • Seite 129 Register «x» und Register «y» die Position, die das verkleinerte Bild im Ergebnisbild haben soll. = = = = Referenzpunkt ist die linke obere Ecke des Bildes. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 129 von 323...
  • Seite 130 Geben Sie im Feld Shift die neue x-Koordinate des Referenzpunktes ein. K K K K Geben Sie im Feld Shift die neue y-Koordinate des Referenzpunktes ein. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 130 von 323...

  • Seite 131: Einzelbilder Oder Bildserien Trennen

    Wenn Sie alle Bilder eines aus einem Bilddatensatz ausschneiden Detektionskanals wollen, aktivieren Sie im Feld «ch» das Kontrollkästchen des gewünschten Kanals und deaktivieren Sie die anderen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 131 von 323...

  • Seite 132: Einzelne Bilder

    Bildserie ausschneiden wollen, wählen Sie in den Eingabefeldern «Start z» und «End z» die entsprechenden Bilder aus. K K K K Bild 2 bis Bild 4 werden in allen Detektionskanälen ausgeschnitten Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 132 von 323...
  • Seite 133 6. Schritt Wenn Sie das Format eines Bildes verkleinern wollen, geben Sie in den Eingabefeldern «Step x» und «Step y» zum Beispiel den Wert «2» ein. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 133 von 323...
  • Seite 134 Ausschnitt eines Bildes ausschneiden wollen, definieren Sie in den Eingabefeldern «Start x» und «End x» sowie «Start y» und «End y» Länge und Breite des Ausschnitts. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 134 von 323...

  • Seite 135: Allgemeines

    Es stehen Ihnen folgende Hilfeinstanzen zur Verfügung: Kurzhilfe Wenn sie den Mauszeiger eine gewisse Zeit über einer Taste der Leica Confocal Software stehen lassen, wird eine Kurzerklärung der Funktion dieser Schaltfläche angezeigt. Die Kurzerklärung (help banner) verschwindet wieder automatisch, wenn der Mauszeiger bewegt wird.

  • Seite 136: Kontextsensitive Hilfe Öffnen

    Kontextsensitive Hilfe öffnen Funktion Mit der Taste Help aktivieren Sie die kontextsensitive Hilfefunktion der Onlinehilfe, mit der Sie kurze Erläuterungen zu den verschiedenen Tasten und Funktionen der Leica Confocal Software aufrufen können. Klicken Sie auf die Taste Help. Neben dem Mauszeiger wird ein Fragezeichen eingeblendet. Alle Tasten sind jetzt vorübergehend ohne Funktion.

  • Seite 137: Datenaufnahmefunktionen

    Befehle zur Verfügung: Befehl Funktion Set as default Die Parametereinstellung wird als Standardeinstellung beim Start der setting Software geladen. Remove default Die Markierung als Standardeinstellung wird rückgängig gemacht. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 137 von 323...
  • Seite 138 Fluoreszenzfarbstoffen angelegt. Wählen Sie den gewünschten Fluoreszenzfarbstoff aus, um seine Emissionskurve im Spektrum einzublenden. Wählen Sie eine Farbzuordnungstabelle aus, indem Sie auf das entsprechende Symbol klicken. & siehe Farbzuordnungstabellen auswählen (Seite 194) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 138 von 323...

  • Seite 139: Akusto-Optischen Strahlteiler (Aobs) Einstellen (Optional)

    Der akusto-optische Strahlteiler (englisch: AOBS: Acousto-Optical Beam Splitter) lenkt das Anregungslicht des Lasers auf das Präparat und trennt vom Präparat zurückkommendes Fluoreszenzlicht und reflektiertes Anregungslicht. In Leica Konfokalmikroskopen ersetzt und optimiert der AOBS konventionelle Anregungsfilter wie zum Beispiel Doppeldichroite oder Tripeldichroite.
  • Seite 140 Dynamik (Kontrollkästchen Enhanced Dynamics) ausgeschaltet. Bei reinen Reflexionslichtaufnahmen kann durch zusätzliches Deaktivieren des Kontrollkästchens Ultra-High Dynamics der Anteil des Reflexionslichts für alle Laserlinien auf ein Maximum erhöht werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 140 von 323...

  • Seite 141: Objektiv Auswählen

    N PLAN 20x 0.40 2630 3566 4093 N PLAN 50x 0.75 1108 PL APO 100x 1.40 Werte in nm bei Wellenlänge λ 488 nm Werte in µm Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 141 von 323...

  • Seite 142: Module Des Mikroskopstativs Von Der Software Aus Bedienen

    Mit dieser Funktion haben Sie die Möglichkeit, mehrere Module der Mikroskopstative DM RXA2 oder DM IRE2 von der Leica Confocal Software aus mit einem Klick auf den visuellen Modus oder auf den Scanmodus einzustellen. Im visuellen Modus wird das Präparat durch die Okulare betrachtet, im Scanmodus wird das Präparat im Laserscanverfahren aufgenommen.
  • Seite 143 Sie auf die Taste Microscope Control und wählen Sie die Option Visual. Um das Mikroskopstativ für die Bildaufnahme im Laserscanverfahren einzustellen, klicken Sie auf die Taste Microscope Control und wählen Sie die Option Scan. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 143 von 323...
  • Seite 144 Die Tubusoptik 1x wird ausgewählt. Die Diode MAG 1x Die Tubusoptik 1x wird ausgewählt. Die Diode MAG leuchtet. 1x leuchtet. Bei UV-Mikroskopsystemen wird die UV Optik ausgewählt. Die Diode MAG UV leuchtet. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 144 von 323...

  • Seite 145: Detektoren Einstellen

    & siehe Funktionen über die Bedienkonsole steuern (Seite 254) Ein Detektor ist erst aktiv, wenn das entsprechende Kontrollkästchen Active im Dialogfenster Signal oder im Dialogfenster Beam Path Setting angeklickt ist. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 145 von 323...

  • Seite 146: Elektronischer Zoom

    Präparat einer stärkeren Lichteinwirkung ausgesetzt. Dies kann zur photochemischen Zerstörung des Präparates führen (optisches Bleichen). Optimale Zoomfaktoren Die folgende Tabelle zeigt, bei welchen Zoomfaktoren (rot markiert) - in Abhängigkeit einer durch das Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 146 von 323...
  • Seite 147 Die angegebenen Scanfeldgrößen gelten nur für die Mikroskopstative DM Rxx und DM IRxx. Für die Mikroskopserie DM LFxx sind die Angaben der Scanfeldgrößen mit dem Faktor 0,8 zu multiplizieren. Die Leica Confocal Software verfügt über drei zu unterscheidende Zoom Funktionen: den elektronischen Zoom, den 3D Zoom und den graphischen Zoom.

  • Seite 148: Vergrößerte Aufnahme Eines Bildausschnitts

    Der entsprechende Wert wird in der Mitte des Dialogfensters angezeigt. Doppelklicken Sie auf den fett dargestellten Zahlenwert in der Mitte des Dialogfensters. Es wird Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 148 von 323...

  • Seite 149: Scanformat Auswählen

    Scheibe übereinstimmt. Als Airy Scheibe bezeichnet man den inneren, hellen Kreis des Beugungsbildes einer punktförmigen Lichtquelle. Der Durchmesser dieser Airy Scheibe ist wiederum von mehreren optischen Parametern abhängig und lässt sich für Leica Konfokalsysteme wie folgt beschreiben: Zur Errechnung des Durchmessers der Airy Scheibe benötigt man also die Anregungswellenlänge λ...

  • Seite 150: Scanmodus Auswählen

    Raumrichtung fortgeführt und so ein Stapel aus Einzelbildern aufgenommen. Hinzu kommt die Möglichkeit, die Bildaufnahme in Abhängigkeit von der Zeit oder der Wellenlänge Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 150 von 323...

  • Seite 151: Scangeschwindigkeit Auswählen

    Je höher das Scanformat bei gleichbleibender Geschwindigkeit, desto geringer ist die Verweilzeit des Laserpunktes über einem Abtastpunkt. Je länger der Lichtpunkt des Laserstrahls über den einzelnen Abtastpunkten im Präparat verweilt, Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 151 von 323...

  • Seite 152: Einmal-Scan Starten

    Drücken Sie erneut auf diese Taste, um den Endlos-Scan zu beenden. Zusätzliche Information Das Gerät arbeitet automatisch mit den zuletzt eingestellten Scanparametern. Einige dieser Parameter können Sie während der Bildaufnahme verändern. Andere sollten Sie Beginn der Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 152 von 323...

  • Seite 153: Dialogfenster Series Scan Overview

    Die Gesamthöhe des Bildstapels zwischen Anfangs- und Endpunkt wird errechnet und angezeigt (Total). Klicken Sie nun auf die Taste Series Scan. Das Dialogfenster bleibt geöffnet und Sie können die Aufnahme der Bildserie mitverfolgen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 153 von 323...

  • Seite 154: Anfangspunkt Einer Räumlichen Serie Definieren

    Bei einer Lambdaserie wird von einer einzigen optischen Ebene ein Stapel aus Einzelbildern aufgenommen, die jeweils bei einer bestimmten Wellenlänge detektiert werden. Mit der Taste Lambda Scan Begin definieren Sie die Wellenlänge, bei der die Bildaufnahme beginnen soll. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 154 von 323...

  • Seite 155: Endpunkt Einer Räumlichen Serie Definieren

    Endpunkt wird gespeichert. Auf die gleiche Weise wird auch der Anfangspunkt eingestellt. & siehe Dialogfenster Series Scan Overview (Seite 139) & siehe Funktionen über die Bedienkonsole steuern (Seite 254) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 155 von 323...

  • Seite 156: Endpunkt Einer Lambdaserie Definieren

    Auswahlpunkt Others. Es erscheint dann das Dialogfenster Z/Y-Configuration mit folgenden Angaben: Parameter Beschreibung Image Dim. z/y Höhe des gesamten Bildstapels zwischen Anfangs- und Endpunkt der ( µ m) Bildserie Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 156 von 323...

  • Seite 157: Anzahl Der Wellenlängenschritte Bestimmen

    über einen Wellenlängenbereich hinweg, der vom Anfangspunkt und Endpunkt der Serie begrenzt wird. Mit der Taste Lambda Steps definieren Sie die Anzahl der Aufnahmen, die innerhalb dieses Bereichs aufgenommen werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 157 von 323...

  • Seite 158: Farbstoffspektren Importieren

    $ Farbstoffspektren aus einer Textdatei importieren $ Farbstoffspektren mit LCS ermitteln und mit Excel importieren Die Emissionsspektren der gebräuchlichsten Fluoreszenzfarbstoffe sind in der Leica Confocal Software (LCS) verfügbar. Diese sind jedoch nur lesbar und nicht vom Benutzer editierbar. Mit dem Farbstoffeditor können Sie die Daten eines beliebigen Fluoreszenzfarbstoffspektrums aus einer...
  • Seite 159 Markieren Sie die beiden Spalten und kopieren Sie diese mit den Tasten Strg und C der Tastatur in die Zwischenablage. Öffnen Sie in der Leica Confocal Software das Dialogfenster Stain Editor, indem Sie Tools/ Stains wählen. Klicken Sie auf die Schaltfläche Add, geben Sie den Namen des Fluoreszenzfarbstoffs ein und klicken Sie auf OK.
  • Seite 160 Windows/ Systemsteuerung/ Ländereinstellungen vornehmen. Farbstoffspektren mit LCS ermitteln und mit Excel importieren In der Leica Confocal Software haben Sie die Möglichkeit, das Emissionsspektrum eines Fluoreszenzfarbstoffs selbst zu ermitteln, indem Sie eine Lambdaserie eines Präparats aufnehmen, das mit dem entsprechenden Fluoreszenzfarbstoff eingefärbt wurde. In der Online Hilfe (Help/ Tutorials/ Lambdaserien aufnehmen) finden Sie eine detaillierte Beschreibung, wie man eine Lambdaserie erzeugt.

  • Seite 161: Serien-Scan Starten

    Abhängigkeit von der Zeit oder von der Wellenlänge durchführen. Bevor Sie eine Bildserie aufnehmen, stellen Sie mit der Endlos-Scan Funktion (Taste Continuous Scan) alle erforderlichen Scanparameter so ein, dass Sie eine optimale Bildqualität erhalten. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 161 von 323...
  • Seite 162 Die gewünschte Anzahl der Aufnahmen zwischen Anfangs- und Endpunkt der Lambdaserie auswählen. & siehe Anzahl der Wellenlängenschritte bestimmen (Seite 157) Nachdem Sie diese Einstellungen vorgenommen haben, klicken Sie auf die Taste Series Scan. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 162 von 323...

  • Seite 163: Aufnahmesequenzen Konfigurieren

    , um das Dialogfenster Bleach zu öffnen und das Bleichmuster neu zu definieren. & siehe Definition eines Bleichexperiments (Seite 166) Stellen Sie im ersten Listenfeld unter Continue eine Pausenzeit zwischen der Abarbeitung Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 163 von 323...
  • Seite 164 Aufnahmesequenz mit dem aktuellen Intervall. Klicken Sie auf die Schaltfläche Start , um die Aufnahmesequenz zu starten. Mit Stop kann die Aufnahmesequenz abgebrochen werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 164 von 323...
  • Seite 165 Output – : Es wird kein Triggersignal ausgegeben. Zur Nutzung des Triggerausgangs muss eine Spannung von +5V DC an Pin 11 sowie Masse (0V) an Pin 8 des Steckers der Triggerelektronik angelegt werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 165 von 323...

  • Seite 166: Definition Eines Bleichexperiments

    Die Bleichpunkte werden im Listenfeld Bleach Points mit der Bezeichnung POS 1..n eingetragen. Mit der Schaltfläche Remove können die Bleichpunkte wieder entfernt werden. Um die Bleichdauer für einen einzelnen Bleichpunkt einzustellen, markieren Sie den Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 166 von 323...
  • Seite 167 Dieses Signal steht auch außerhalb der Verwendung der Time Lapse Funktion zu Verfügung. Output Pin 14 des Steckers der Triggerelektronik. Hier handelt es sich um ein Framesignal (frame-clock). Das Signal hat eine ansteigende Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 167 von 323...

  • Seite 168: Unidirektionalen Oder Bidirektionalen Scan Auswählen

    Rücklauf eingestellt werden. Verwenden Sie zu diesem Zweck die Taste Phase. & siehe Phase einstellen (Seite 169) Sind die Geschwindigkeitsstufen 800 oder 1000 eingestellt, kann aus Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 168 von 323...

  • Seite 169: Phase Einstellen

    Mit der Funktion Scan Field Rotation können Sie das Scanfeld drehen. Dabei wird weder das Präparat noch die Richtung der Abtastung gedreht, sondern das mikroskopische Zwischenbild. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 169 von 323...
  • Seite 170 & siehe Dialogfenster Series Scan Overview (Seite 153) Typische Anwendungen Mit dieser Funktion können Texturen auf Oberflächen oder langgestreckte biologische Strukturen relativ zum Beobachter ausgerichtet werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 170 von 323...

  • Seite 171: Aufnahmeparameter Eines Experiments Übernehmen

    Bei bleichempfindlichen Präparaten ist die Bildaufnahme im Mittelungsverfahren nicht zu empfehlen. Die wiederholten Aufnahmen und die damit verbundene lange Lichteinwirkung kann zur Zerstörung des Präparates führen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 171 von 323...

  • Seite 172: Bildaufnahme Im Burstbetrieb

    Ergebnisbild dargestellt. Das hier verwendete Verfahren ermittelt einen fortlaufenden Mittelwert. Das bedeutet, dass nach der Aufnahme des ersten Bildes jedes neu aufgenommene Bild mit dem Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 172 von 323...

  • Seite 173: Bildaufnahme Im Akkumulationsverfahren

    Digitalisierung mit 8 Bit für eine Bildaufnahme ohne Informationsverlust in den meisten Fällen völlig ausreichend. Für Proben mit einer größeren Intensitätsdynamik (z.B. bei Proben, bei denen es sehr intensitätsschwache und sehr intensitätsstarke Bereiche gibt) empfiehlt sich die Bildaufnahme mit Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 173 von 323...

  • Seite 174: Uv-Linsenrad Einstellen (Option)

    Auswertungsbereiche (Regions of Interest). Mit der Taste ROI speichern Sie die Lasereinstellungen für den Bildhintergrund, bevor Sie die Anregungswerllenlänge getrennt für jeden Auswertungsbereich mit der Taste Configuration festlegen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 174 von 323...

  • Seite 175: Laserlinien Für Einzelne Auswertungsbereiche Auswählen (Roi Scan)

    Weitere Informationen zu diesem Thema finden Sie im Kapitel „Vorgehensweisen und Übungen zu ausgewählten Prozessen „ ,Seite 65 XY-Objekttisch steuern Funktion der Dialogelemente Im Dialogfenster XY-Stage Control finden Sie folgende Dialogelemente zur Steuerung des «Märzhäuser» XY-Objekttisches: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 175 von 323...
  • Seite 176 Wenn Sie den Objekttisch mit den Pfeiltasten der Tastatur positionieren, wird das Scanfeld exakt um die Seitenlänge des Scanfelds verschoben, so dass ein Präparat, das größer ist als Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 176 von 323...
  • Seite 177 Die Position des XY-Objekttisches kann auch mit einem Aufnahmeparametersatz abgespeichert werden. Damit kann der XY-Objektisch auch bei Aufnahmesequenzen eingesetzt werden.  & siehe Aufnahmesequenzen konfigurieren (Seite 163) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 177 von 323...

  • Seite 178: Z-Stellantrieb Auswählen

    Für eine Zeitserie im Scanmodus xt werden folgende Parameter im Dialogfenster angezeigt. ∆ ∆ ∆ ∆ T Aufnahmezeit für eine Linie (kann nicht vom Benutzer eingestellt werden) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 178 von 323...
  • Seite 179 Klicken Sie auf Apply, um den Parameter zu berechnen. Mit einem Klick auf Reset werden die zuletzt gespeicherten Werte angezeigt. Nachdem Sie diese Einstellungen vorgenommen haben, klicken Sie auf die Taste Series Scan. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 179 von 323...

  • Seite 180: Datendarstellungsfunktionen

    Das gesamte aktuelle Bildfenster wird gedruckt. Left Das Tastenfeld links vom Bildfenster wird ein- oder ausgeblendet. buttons Bottom Das Tastenfeld unterhalb des Bildfensters wird ein- oder ausgeblendet. buttons Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 180 von 323...
  • Seite 181 Mit den Schaltflächen Edit grid color und Edit background color können Sie die Farbe des Rahmens und des Hintergrunds der Legende verändern. Die Legende Hardware wird automatisch am rechten Rand der Bedienoberfläche angeordnet. Größe Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 181 von 323...

  • Seite 182: Aufnahmen Als Miniaturansicht Im Experiment Browser Anzeigen

    Zugriff auf einzelne Aufnahmen. Wählen Sie ein Experiment im Ansichtsfenster Experiment Overview aus. Klicken Sie auf die Taste Browse, um den Experiment Browser zu öffnen. Alle Aufnahmen des Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 182 von 323...

  • Seite 183: Dialogfenster Viewer Options

    Sie durch Ändern der Koordinatenwerte eine 3D Ansicht nach rechts Feld Translation oder links, nach oben oder unten verschieben sowie vergrößern oder verkleinern. Wenn Sie Dezimalzahlen eingeben, verwenden Sie den Punkt als Dezimalzeichen. Translation Funktion Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 183 von 323...
  • Seite 184 Das Bild wird verkleinert, indem n Pixel als 1 Pixel im Ergebnisbild dargestellt werden. Automatic Das Bild wird im ursprünglichen Bildformat angezeigt. Das Bild wird vergrössert, indem 1 Pixel als n Pixel im Ergebnisbild dargestellt wird. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 184 von 323...
  • Seite 185 Leica Microsystems Heidelberg GmbH LCS Softwarefunktionen: Beschreibung der Einzelfunktionen Die Leica Confocal Software verfügt über drei zu unterscheidende Zoom Funktionen: den graphischen Zoom, den 3D Zoom und den elektronischen Zoom. & siehe 3D Ansicht zoomen (Seite 211) & siehe Elektronischer Zoom (Seite 146)
  • Seite 186 Sie können jetzt getrennt für jede Messkurve (jeden Detektionskanal) den oberen und unteren Grenzwert des Wertebereichs neu definieren. Überprüfen Sie das Resultat der geänderten Skalierung direkt im Ansichtsfenster. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 186 von 323...
  • Seite 187 Register angezeigt. Wenn Sie das Dialogfenster öffnen, erscheinen die Bildsymbole der Funktionen, mit denen Sie gerade arbeiten. Klicken Sie auf den Befehl Show all, um alle Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 187 von 323...
  • Seite 188 Koeffizient niedrig eingestellt, erreichen viele Pixel im Projektionsbild den Maximalwert, so dass die Strukturen immer schwieriger zu unterscheiden sind. Threshold Definieren Sie mit dem Schieber einen Schwellenwert. Die Intensitätswerte unterhalb Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 188 von 323...
  • Seite 189 Farbzuordnungstabellen der Ursprungsbilder. Dialogfenster Viewer Options, Bildsymbol Scan Progress Funktion Um das Dialogfenster Viewer Options zu öffnen, wählen Sie im Menü View die Option Experiment Overview. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 189 von 323...
  • Seite 190 Die Zwischenräume zwischen den Bildpunkten werden mit Flächen gefüllt. Wireframe Alle Bildpunkte werden mit Linien verbunden, die Zwischenräume bleiben frei. Isolines Bildpunkte, die Werten mit gleicher Intensität entsprechen, werden von einer Kurve umschlossen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 190 von 323...
  • Seite 191 Strecke zwischen den beiden Messpunkten in der Horizontalen liegt. Freeze Die neu positionierte Messkurve wird verriegelt, so dass die Position der Messpunkte wieder verändert werden kann, ohne dass die Messkurve interaktiv anpepasst wird. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 191 von 323...
  • Seite 192 Höheninformation umgekehrt. Ein Negativ des Topographiebildes wird dargestellt. Level Die horizontale Lage einer Aufnahme wird mittels einer linearen Interpolationsfunktion (Polynom) korrigiert. & siehe Arbeitsschritt Process / Ordner Materials (Seite 264) Threshold Funktion Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 192 von 323...

  • Seite 193: Anzeigen Der Detektionskanäle

    Diese Methode der Zuordnung von Farbzuordnungstabellen beeinflusst nur die aktuelle Bilddarstellung. Sobald Sie einen neuen Scanvorgang starten, werden wieder die im Dialogfenster Beam Path Setting eingestellten Farbzuordnungstabellen verwendet. & siehe Strahlengang einstellen (Seite 137) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 193 von 323...

  • Seite 194: Bild(Er) Im Ansichtsfenster Viewer Zoomen

    Das Bild wird im ursprünglichen Bildformat angezeigt. Das Bild wird vergrössert, indem 1 Pixel als n Pixel im Ergebnisbild dargestellt wird. Die Leica Confocal Software verfügt über drei zu unterscheidende Zoom Funktionen: den graphischen Zoom, den 3D Zoom und den elektronischen Zoom.
  • Seite 195 Farbsysteme handelt, können sich die Farben in der CMY(K) Darstellung stark von der Darstellung auf dem Monitor unterscheiden. Alle Farbzuordnungstabellen sind auch mit inversem Farbverlauf verfügbar, das heißt hohe Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 195 von 323...

  • Seite 196: Einzelbild Anzeigen

    Alle Einzelbilder einer Bildserie werden getrennt für alle Channel 1 / 2 / 3 / 4 / 5 ausgewählten Detektionskanäle und zusätzlich zusammen in Überlagerungsbildern dargestellt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 196 von 323...

  • Seite 197: Serienbild Anzeigen

    Alle Einzelbilder einer Bildserie werden getrennt für alle Channel 1 / 2 / 3 / 4 / 5 ausgewählten Detektionskanäle und zusätzlich zusammen in Überlagerungsbildern dargestellt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 197 von 323...

  • Seite 198: Überlagerungsbild In Rgb Anzeigen

    Erzeugung eines Überlagerungsbildes wählen: Wählen Sie im Menü View die Option Viewer Options. Klicken Sie auf das Bildsymbol Óverlay. & siehe Dialogfenster Viewer Options, Bildsymbol Overlay (Seite 189) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 198 von 323...

  • Seite 199: Darstellung Von Bildserien

    Ist die Taste Gallery angeklickt, sind die Tasten Next und Previous, First und Last und Play/Stop grau unterlegt und können nicht betätigt werden. Mit der Taste Gallery Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 199 von 323...

  • Seite 200: Letztes Bild Einer Serie Anzeigen

    Wählen Sie im Menü View die Option Viewer Options. klicken Sie auf das Bildsymbol Display und dann auf das Register Movie. & siehe Dialogfenster Viewer Options, Bildsymbol Display (Seite 184) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 200 von 323...
  • Seite 201 Alle Einzelbilder einer Bildserie werden getrennt für alle Channel 1 / 2 / 3 / 4 / 5 ausgewählten Detektionskanäle und zusätzlich zusammen in Überlagerungsbildern dargestellt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 201 von 323...

  • Seite 202: Projektionen

    (2b) Projektion bei variabler Projektionsachse Projektionen bei invariabler oder variabler Projektionsachse Die Art der Projektionsachse unterteilt die in der Leica Confocal Software zur Verfügung stehenden Projektionsarten in zwei Hauptgruppen. Es gibt Projektionen bei einer invariablen und Projektionen bei einer variablen Projektionsachse. Beim ersten Typ handelt es sich um orthogonale Projektionen.
  • Seite 203 Transparentprojektion in jeder Säule aus Abtastpunkten ein gewichtetes Mittel aus allen Intensitätswerten berechnet und im zweidimensionalen Projektionsbild als Repräsentant für die gesamte Säule dargestellt: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 203 von 323...
  • Seite 204 Tabelle temporär gespeichert (In = Intensität des einfallenden Lichtes im Voxel n, Vn = Intensität des Voxels n). Die Berechnung wird für den gesamten Bildstapel, d.h. für alle Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...

  • Seite 205: Maximumprojektion Eines Bildstapels Bei Invariabler Projektionsachse

    über die Taste ausgelöst, ist das Projektionsbild nur eine temporäre Monitordarstellung. & siehe Arbeitsschritt Process / Ordner Extended Focus (Seite 226) & siehe Experiment anlegen (Seite 253) Beachten Sie den Unterschied zwischen einer Maximumprojektion und einem Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 205 von 323...

  • Seite 206: Maximumprojektion Eines Bildstapels Bei Variabler Projektionsachse

    Im Dialogfenster Viewer Options kann zusätzlich noch ein Schwellenwert (threshold) eingestellt und der im Bild vorliegende Intensitätswertebereich skaliert werden (scaling). & siehe Dialogfenster Viewer Options, Bildsymbol Projections (Seite 187) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 206 von 323...

  • Seite 207: Mittelwertprojektion Eines Bildstapels Bei Variabler Projektionsachse

    Eine Transparentprojektion kann zum einen mit der Taste Fix. Trans. und zum anderen im Arbeitsschritt Process / Ordner Extended Focus aktiviert werden. Wird die Funktion über die Taste ausgelöst, ist das Projektionsbild nur eine temporäre Monitordarstellung. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 207 von 323...

  • Seite 208: Transparentprojektion Eines Bildstapels Bei Variabler Projektionsachse

    & siehe 3D Ansicht erzeugen (Seite 209) Typische Anwendungen Die Darstellung der Bilddaten in einem Topographiebild ist vor allem bei materialwissenschaftlichen Untersuchungen aufschlussreich. Für die Anwendung von Quantifizierungsfunktionen ist die Topographiefunktion unerlässlich. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 208 von 323...

  • Seite 209: Schnittansichten Eines Bildstapels Erzeugen

    Ansicht darstellen. Je nachdem, welche Grösse im Ausgangsbild dargestellt oder berechnet wurde, werden bei der Erzeugung der 3D Ansicht entweder Intensitätswerte oder Höhenwerte auf der z- Achse der 3D Ansicht abgebildet. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 209 von 323...

  • Seite 210: Ansicht Drehen

    Klicken Sie auf das Bildsymbol 3D und dann auf das Register Navigation. Im Feld Rotation können Sie Drehwinkel für alle drei Achsen eingeben. & siehe Dialogfenster Viewer Options, Bildsymbol 3D (Seite 183) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 210 von 323...

  • Seite 211: Ansicht Verschieben

    Während Sie die 3D Ansicht zoomen, wird die Auflösung des Bildes leicht herabgesetzt, um das Arbeiten mit dieser Funktion zu beschleunigen. Nach Loslassen der linken Maustaste wird das Bild in der zuvor eingestellten Auflösung neu angezeigt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 211 von 323...

  • Seite 212: Korrelation Von Detektionskanälen Visualisieren

    Im Register Navigation können Sie den Zoom variieren, indem Sie im Feld Translation den y- Wert ändern. & siehe Dialogfenster Viewer Options, Bildsymbol 3D (Seite 183) Die Leica Confocal Software verfügt über drei zu unterscheidende Zoom Funktionen: den 3D Zoom, den elektronischen Zoom und den graphischen Zoom. & siehe Elektronischer Zoom (Seite 146) &...

  • Seite 213: Datenverarbeitung

    Ebene die gewünschte Funktion mit dem entsprechenden Dialog erreicht haben. Im Navigationsfenster können Sie direkt eine Funktion anwählen, indem Sie den entsprechenden Ordner anklicken. In der Menüzeile oben rechts stehen Ihnen folgende Tasten zur Verfügung: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 213 von 323...
  • Seite 214 Bilder dasselbe Format in x und y haben müssen, zwei Bildstapel ausserdem noch dieselbe Anzahl von Einzelbildern (z). Die 1/n-Beziehung ist dann gegeben, wenn zum Beispiel 1 Einzelbild mit jedem (n-ten) Einzelbild eines Bildstapels verrechnet wird. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 214 von 323...
  • Seite 215 Wählen Sie Division, um die Intensitätswerte der beiden ausgewählten Bilder nach der Formel: Pixel (Ergebnisbild) = Pixel (First Source Image) / Pixel (Second Source Image) zu dividieren. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 215 von 323...
  • Seite 216 Wert 1, wenn in mindestens einem der beiden Pixel der Wert 1 vorliegt, ansonsten wird die 0 eingetragen. K K K K Wählen Sie den Operator XOR, um die binären Darstellungen der Pixel der Konstante und des Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 216 von 323...
  • Seite 217 Minimalwert wird der 0 zugeordnet. Der Maximalwert wird im Falle von 8-Bit Bildern dem Wert 255, im Falle von 12 Bit-Bildern dem Wert 4095 zugeordnet. Dies gewährleistet, dass die errechneten Pixelwerte des Ergebnisbildes innerhalb des jeweiligen Wertebereichs bleiben. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 217 von 323...

  • Seite 218: Konvertierung Der Bitauflösung Von Bildern

    Klicken Sie auf die Taste Back, um zur zuletzt angezeigten Navigationsebene zu gelangen. Klicken Sie auf die Taste Forward, um die Ebene anzuzeigen, die Sie ausgewählt hatten, bevor Sie auf die Taste Back geklickt haben. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 218 von 323...

  • Seite 219: Verbinden Oder Trennen Von Bildauschnitten, Bildern Und Bildserien

    In diesem Kapitel finden Sie folgende Themen $ Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process $ Navigation: Editing\ Merging $ Navigation: Editing\ Separation Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 219 von 323...
  • Seite 220 Klicken Sie auf die Schalfläche Preview, um die ausgewählte Funktion auszuführen und das Ergebnisbild rechts im Vorschaufenster anzuzeigen. Klicken Sie auf die Taste Apply, um die ausgewählte Funktion auf den aktiven Bilddatensatz Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 220 von 323...
  • Seite 221 Position des anderen Ausgangsbildes gezeigt werden soll. Diese Funktion ist auch bei lateralen Bildserien sinnvoll, wie sie beispielsweise beim Biomapping vorkommen. & siehe Beispiel für das Verschieben eines Bildes (Seite Error! Bookmark not defined. ) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 221 von 323...
  • Seite 222 Sie im Feld Image 2, ab welcher Kanalnummer im Vereinigungsbild die Kanäle des Ausgangsbildes 2 eingefügt werden sollen. Wenn Sie das Auswahlkästchen auswählen, werden die beiden Ausgangsbilder auf unterschiedliche Kanäle des Vereinigungsbildes verteilt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 222 von 323...

  • Seite 223: Einstellen Von Helligkeit, Kontrast Und Gammakorrektur

    In diesem Kapitel finden Sie folgende Themen $ Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process $ Navigation: Enhancement\ Contrast and Brightness $ Navigation: Enhancement\ Gamma Correction Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 223 von 323...
  • Seite 224 Klicken Sie auf die Schalfläche Preview, um die ausgewählte Funktion auszuführen und das Ergebnisbild rechts im Vorschaufenster anzuzeigen. Klicken Sie auf die Taste Apply, um die ausgewählte Funktion auf den aktiven Bilddatensatz Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 224 von 323...
  • Seite 225 Ergebnisbild genau gleich hell. Wird der Schieberegler aus der Mitte nach rechts geschoben, so werden die mittleren Helligkeitswerte aufgehellt. Wird der Schieberegler aus der Mitte nach links geschoben, so werden die mittleren Helligkeitswerte dunkler. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 225 von 323...

  • Seite 226: Erweiterter Fokus Durch Projektionen Von Bildstapeln Auf Ein Einzelbild

    Ordner anklicken. In der Menüzeile oben rechts stehen Ihnen folgende Tasten zur Verfügung: Klicken Sie auf die Taste Back, um zur zuletzt angezeigten Navigationsebene zu gelangen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 226 von 323...
  • Seite 227 & siehe Prinzip und Arten von Projektionen (Seite 202) Das Register Factor wird nur bei ausgewählter Transparentprojektion angezeigt. Mit dem Schieber variieren Sie den Transparentfaktor α. Je höher er eingestellt ist, desto stärker fliessen Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 227 von 323...

  • Seite 228: Lineare Filter Und Morphologische Filter

    $ Das Prinzip der spektralen Farbstofftrennung (Spectral Dye Separation) $ Navigation: Dye Finder\ Spectral Dye Separation $ Navigation: Dye Finder\ Dimensionality Reduction Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 228 von 323...
  • Seite 229 Viele der in der Fluoreszenzmikroskopie verwendeten Fluoreszenzfarbstoffe emittieren Fluoreszenzlicht in Wellenlängenbereichen, die sehr nahe beieinander liegen, so dass die Emissionsspektren der Fluoreszenzsignale überlappen. Werden Präparate mit solchen Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 229 von 323...
  • Seite 230 Korrelationsdiagramms, da im Detektionskanal 2 auch ein bestimmter Anteil des grünen Fluoreszenzfarbstoffes erfasst wurde. Ein solches Korrelationsdiagramm steht Ihnen für eine erste Interpretation eines Bilddatensatzes in der Leica Confocal Software mit dem sogenannten Zytofluorogramm zur Verfügung. Mit dem Zytofluorogramm können Sie die gemeinsame Verteilung von Bilddatensätzen mit bis zu drei Detektionskanälen (Fluoreszenzfarbstoffen) visualisieren.
  • Seite 231 Rauschen, das keine Information über das Präparat beisteuert und deshalb entfernt werden kann. Der zweite Schritt besteht darin, die im Merkmalsraum gestreuten Punkte auf die Einheitskugel, eine Kugel mit dem Radius 1, zu projizieren Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 231 von 323...
  • Seite 232 . Erneut werden alle Punkte dem Mittelpunkt zugeordnet, dem sie am nächsten sind (11) und die Mittelpunkte der neuen Cluster berechnet . Dieses Verfahren wird so lange wiederholt bis (12) die Gruppen sich nicht mehr verändern. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 232 von 323...
  • Seite 233 Geraden/ Punktwolken wieder «aufgerichtet» werden oder anders gesagt auseinandergezogen werden. Dies können Sie mit dem Zytofluorogramm visualisieren. Navigation: Dye Finder\ Adaptive Dye Separation (Strong) Navigation: Dye Finder\ Adaptive Dye Separation (Weak) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 233 von 323...
  • Seite 234 Mit dem Algorithmus der spektralen Farbstofftrennung können Fluoreszenzsignale mit Hilfe von Referenzdaten der Emissionsspektren der verwendeten Fluoreszenzfarbstoffe in einem Bilddatensatz identifiziert und getrennt werden. Dies ist mit einer sogenannten Singulärwertzerlegung möglich. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 234 von 323...
  • Seite 235 Merkmalsraum zu finden. Bei der Betrachtung von Lambdaserien im Merkmalsraum repräsentiert jeder Wellenlängenbereich, bei dem ein Bild aufgenommen wurde, eine Dimension. siehe Das Prinzip der adaptiven Farbstofftrennung (Seite 231) & Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 235 von 323...

  • Seite 236: Segmentierung Von Bildstrukturen

    Zeitserien, Wellenlänge (λ) für Lambdaserien - berechnet. Klicken Sie auf die Taste Histogram. Es wird ein Ansichtsfenster geöffnet, in dem die Messkurve für jeden Detektionskanal und die statistischen Werte angezeigt werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 236 von 323...

  • Seite 237: Messen Eines Profils Innerhalb Eines Auswertungsbereichs (Roi)

    Die Tasten, mit denen Sie einen Auswertungsbereich definieren, werden zusammen mit der Profile (z) Taste aktiviert. & siehe Auswertungsbereich (ROI) als Ellipse definieren (Seite 242 ff.) & siehe Auswertungsbereich (ROI) als Polygon definieren Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 237 von 323...
  • Seite 238 Diese wiederum ermöglichen die optimierte Einstellung der Detektoren. Desweiteren kann mit dieser Funktion das Emissionsmaximum einer Lambdaserie ermittelt werden. Durch Anpassung der Breite und Position der Blenden vor den Detektoren, kann mehr Emissionslicht Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 238 von 323...

  • Seite 239: Messen Eines Profils Entlang Einer Strecke

    Standardabweichung der Werte der Deviation Messgröße Variance Varianz der Messgröße Die folgenden 4 Messwerte erscheinen nur, wenn im Dialogfenster Viewer Options die Funktion Zweipunktmessung ausgewählt ist Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 239 von 323...

  • Seite 240: Messen Von Oberflächen Und Volumen

    Messpunkten 1 und 2 Diese Quantifizierungsfunktion ist nur offline, d.h. nur für bereits aufgenommene Datensätze verfügbar. Messen von Oberflächen und Volumen (optional, siehe Kapitel optionale Softwarepakete, Materials, Seite 256ff.) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 240 von 323...

  • Seite 241: Quantifizierungsgraphen In Die Präsentationsseite Kopieren

    & siehe Messen von Oberflächen und Volumen (Seite 268) & siehe Rauhigkeitsmessungen entlang einer Strecke (Seite 256) Diese Funktion steht auch im Kontextmenü innerhalb der Ansichtsfenster von Quantifizierungsfunktionen zur Verfügung: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 241 von 323...

  • Seite 242: Quantifizierungsdaten Exportieren

    Ziehen sie bei gedrückter linker Maustaste den Cursor diametral in die gegenüberliegende Ecke, um den zweiten Eckpunkt des Auswertungsbereichs zu definieren. & siehe Auswertungsbereich (ROI) markieren und verschieben (Seite 245) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 242 von 323...

  • Seite 243: Auswertungsbereich (Roi) Als Polygon Definieren

    Taste Polygon ist deshalb erst aktiv, wenn Sie zuvor mit einer der folgenden Tasten eine Quantifizierungsfunktion aktiviert haben: & siehe Messen eines Profils innerhalb eines Auswertungsbereichs (ROI) (Seite 237) & siehe Histogramm berechnen (Seite 236) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 243 von 323...

  • Seite 244: Auswertungsbereich (Roi) Als Rechteck Definieren

    Klicken Sie auf die Taste Ellipse, Rectangle oder Polygon und dann auf die Taste Wizard. Doppelklicken Sie mit der linken Maustaste auf die Struktur im Bild, die Sie als Auswertungsbereich markieren wollen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 244 von 323...

  • Seite 245: Auswertungsbereich (Roi) Markieren Und Verschieben

    Die Definition eines Auswertungsbereichs im Bild ist für Quantifizierungsfunktionen erforderlich. Die Taste Select ROI ist deshalb erst aktiv, wenn Sie zuvor mit einer der folgenden Tasten eine Quantifizierungsfunktion aktiviert haben: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 245 von 323...

  • Seite 246: Auswertungsbereich (Roi) Verschieben Und Drehen

    & siehe Messen eines Profils innerhalb eines Auswertungsbereichs (ROI) (Seite 237) & siehe Histogramm berechnen (Seite 236) & siehe Rauhigkeitsmessungen innerhalb eines Auswertungsbereichs (ROI) (Seite 257) Auswertungsbereiche (ROI's) löschen Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 246 von 323...
  • Seite 247 & siehe Messen eines Profils innerhalb eines Auswertungsbereichs (ROI) (Seite 237) & siehe Histogramm berechnen (Seite 236) & siehe Rauhigkeitsmessungen innerhalb eines Auswertungsbereichs (ROI) (Seite 257) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 247 von 323...

  • Seite 248: Datendokumentation

    Anfasspunkt des Bildes ziehen. Um das Bild zu verschieben, ohne seine Größe zu verändern, markieren Sie das Bild und verschieben Sie es, während Sie die linke Maustaste gedrückt halten. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 248 von 323...

  • Seite 249: Linie In Die Präsentationsseite Zeichnen

    In einem Dialogfenster können Typ und Stärke der Linie sowie weitere Optionen eingestellt werden. Color In einem Dialogfenster kann eine beliebige Farbe für das Rechteck ausgewählt Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 249 von 323...

  • Seite 250: Textfeld In Die Präsentationsseite Einfügen

    Sie in die Mitte des Textfelds und verschieben Sie es, während Sie die linke Maustaste gedrückt halten. Die Taste Text kann nur betätigt werden, wenn zuvor eine Präsentationsseite mit der Taste Annotation geöffnet wurde. Drucken Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 250 von 323...
  • Seite 251 Wenn Sie das Dialogfenster Printer Selection mit OK verlassen, werden alle Einstellungen im aktiven Ansichtsfenster Viewer gespeichert. Somit können Sie für verschiedene Bilder eine unterschiedliche Druckereinstellung und Seitendarstellung speichern. Diese Einstellungen gehen jedoch mit dem Verlassen der Leica Confocal Software verloren. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...

  • Seite 252: Datenhandling

    LCS Softwarefunktionen: Beschreibung der Einzelfunktionen Datenhandling Datei öffnen Funktion In der Leica Confocal Software können Sie mit der Taste Open verschiedene Dateiformate öffnen. Dateiformat Beschreibung Experiment (*.lei) Ein Leica-spezifisches, binäres Datenformat. Beim Lesen der Experimente werden nicht nur die Bilddaten sondern auch die experimentellen Einstellungen geladen.

  • Seite 253: Alle Dateien Speichern

    Experiments angelegt. Im Unterverzeichnis dieses Ordners befindet sich die Beschreibungsdatei (*.lei) des Experiments zusammen mit den einzelnen Bilddateien. Bei der Beschreibungsdatei handelt es sich um ein Leica-spezifisches binäres Datenformat. In dieser Datei werden die Parametereinstellungen und die in Form einer Farbzuordnungstabelle gespeicherte Farbinformation jedes zu diesem Experiment gehörenden Bildes registriert.

  • Seite 254: Benutzerspezifische Anpassungen

    Wählen Sie im Menü View die Option Status Bars und dann Control Panel Status Bar. Die Statusleiste für die Bedienkonsole wird am unteren Ende der Benutzeroberfläche der Leica Confocal Software angezeigt. Von links nach rechts gesehen besteht die Statusleiste aus dem Symbol für die Bedienkonsole, den sieben Feldern, die die Drehknöpfe der Bedienkonsole...

  • Seite 255: Ansichtsfenster Viewer Als Vorlage Abspeichern

    Klicken Sie im Menü Tools auf Options, um im Register Workspace festzulegen, ob, und wenn ja, wieviele Ansichtsfenster Viewer beim Start der Leica Confocal Software geöffnet werden sollen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...

  • Seite 256: Optionale Softwarepakete

    Beschreibung der Einzelfunktionen Optionale Softwarepakete Materials (optional) Dieses optionale Softwarepaket ist nicht Bestandteil des Basis-Programmpaketes. Sie können es aber bei Ihrer Leica Niederlassung oder einem autorisierten Händler erhalten. Rauhigkeitsmessungen entlang einer Strecke Funktion Mit der Funktion Roughness Profile werden Höhen-, Abstands- und Winkelwerte einer Oberfläche entlang einer Strecke gemessen und in einer Kurve dargestellt.

  • Seite 257: Rauhigkeitsmessungen Innerhalb Eines Auswertungsbereichs (Roi)

    Voraussetzung für die Erzeugung des Höhenprofils ist ein Topographiebild. Die Taste Roughness Area ist deshalb erst aktiv, wenn zuvor mit der Taste Topography ein Topographiebild des Datensatzes erzeugt wurde. & siehe Topographiebild erzeugen (Seite 208) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 257 von 323...

  • Seite 258: Lineare Filter Und Morphologische Filter (Optional)

    In diesem Kapitel finden Sie folgende Themen $ Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process $ Was sind lineare Filter? $ Navigation: Image Filters\ Linear Filters $ Was sind morphologische Filter? Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 258 von 323...
  • Seite 259 Um den Arbeitsschritt Process zu verlassen, klicken Sie auf das Pfeilsymbol eines anderen Arbeitsschritts (z.B. Acquire). Am unteren Ende jedes Dialogs finden Sie folgende beiden Schaltflächen: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 259 von 323...
  • Seite 260 Filtermaske über das Bild hinaus. Für diese Pixel wird der Wert 0 gesetzt. Wirkung der linearen Filter Intensitätsprofil des Bildes nach der Anwendung Intensitätsprofil eines ungefilterten Bildes des Filters Blur Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 260 von 323...
  • Seite 261 Strukturen im Bild zu verändern und vom Hintergrund zu trennen. Morphologische Operatoren werden üblicherweise auf binäre Bilder angewandt. Binärbilder haben Pixel, die nur den Wert 1 oder 0 haben. In der Leica Confocal Software können Sie mit den Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...
  • Seite 262 Das zu untersuchende Pixel ist immer das zentrale Pixel in der Maske. Die Maske kann in der Leica Confocal Software die Form eines Quadrats, eines Kreuzes oder eines Kreises haben. Form und Grösse der Maske bestimmen, welche und wieviele Nachbarpixel zum Filtern herangezogen werden.
  • Seite 263 Intensitätswerte steigt). während die Zahl der niedrigen Intensitätswerte ungefähr gleich bleibt). Nach der Anwendung des Operators Top Hat Nach der Anwendung des Operators Bottom Hat Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 263 von 323...
  • Seite 264 $ Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process $ Navigation: Materials\ Leveling $ Was sind lineare Filter? $ Navigation: Materials\ Roughness Filter $ Navigation: Materials\ Waviness Filter Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 264 von 323...
  • Seite 265 Originaldatensatz dazu addiert. Damit wird der Trendverlauf kompensiert. & siehe Anpassungsfunktion zur Korrektur von Trendverläufen (Seite 300) Die zu optimierende Zielfunktion bei der Ermittlung der Koeffizienten der Anpassungsfunktion lautet: Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 265 von 323...
  • Seite 266 Alle Intensitätswerte, die betragsmäßig kleiner sind als der Schwellenwert, werden nicht zur Berechnung herangezogen. Damit vermeidet man, dass die Rauschsignale fälschlicherweise als Stützstellen für die Anpassungsfunktion verwendet werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 266 von 323...
  • Seite 267 Wenn Sie den Filter Waviness auswählen, wird der oben beschriebene Tiefpassfilter auf das Bild angewendet. Dieser Filtertyp filtert die hohen Frequenzen aus dem Bild. Das heißt, die stark ausgeprägten Übergange von niedrigen zu hohen Intensitätswerten werden abgeschwächt. Mit Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 267 von 323...
  • Seite 268 Voraussetzung für die Berechnung der Oberflächen und Volumina ist ein Topographiebild. Die Taste Materials ist deshalb erst aktiv, wenn zuvor mit der Taste Topography ein Topographiebild des Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 268 von 323...
  • Seite 269 Volumen zwischen den beiden Positionswerten des Schiebers Abstand zwischen den beiden Positionswerten des Schiebers Diese Quantifizierungsfunktion ist nur offline, d.h. nur für bereits aufgenommene Datensätze verfügbar. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 269 von 323...

  • Seite 270: Multicolor (Optional)

    LCS Softwarefunktionen: Beschreibung der Einzelfunktionen Multicolor (optional) Dieses optionale Softwarepaket ist nicht Bestandteil des Basis-Programmpaketes. Sie können es aber bei Ihrer Leica Niederlassung oder einem autorisierten Händler erhalten. Multicolor / 2D Zytofluorogramm erzeugen Auf dieser Seite finden Sie folgende Themen $ 2D Zytofluorogramm eines Bilddatensatzes erzeugen $ Ausprägungen und Interpretation des Zytofluorogramms...
  • Seite 271 Bilddaten im grünen und im roten Bilddaten im grünen und im roten Positiv korrelierende Bilddaten und Detektionskanal korrelieren positiv. Detektionskanal korrelieren Rauschen im grünen und roten negativ. Detektionskanal. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 271 von 323...
  • Seite 272 Zusätzlich können verschiedene geometrische und densitometrische Daten für das Originalbild und für die im Zytofluorogramm selektierten Bilddaten berechnet und angezeigt werden. & siehe Multicolor / Statistik anzeigen (siehe Seite 276) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 272 von 323...

  • Seite 273: Multicolor / Überlagerungsbild Anzeigen

    Verfügung. Unter anderem können Sie den Intensitätswertebereich einschränken, die Farbkodierung variieren und Anzeigeelemente des Zytofluorogramms ein- oder ausblenden. & siehe Dialogfenster Viewer Options, Bildsymbol Multicolor (siehe Seite 277) Multicolor / Überlagerungsbild anzeigen Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 273 von 323...

  • Seite 274: Multicolor / Wertepaare Des Zytofluorogramms Im Originalbild Lokalisieren

    Klicken Sie auf die Taste Mask, um eine binäre Maske des Zytofluorogramms zu erzeugen. Gleichzeitig werden die Tasten aktiv, mit denen Sie einen Auswertungsbereich (ROI) zeichnen Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 274 von 323...
  • Seite 275 Kanäle (2a) (2b) Im Zytofluorogramm selektierte 2D Zytofluorogramm mit Im Zytofluorogramm selektierte Bilddaten werden im Originalbild selektierten Bilddaten werden im Originalbild weiß hervorgehoben Intensitätswertpaaren weiß hervorgehoben Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 275 von 323...
  • Seite 276 Anzahl der Pixel im Bild oder innerhalb eines Auswertungsbereichs (ROI) # Pixels, mask Anzahl der Pixel in den maskierten Bereichen Fläche des Scanfeldes Area [µm Fläche der maskierten Bereiche Area, mask [µm Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 276 von 323...
  • Seite 277 Bildsymbole anzuzeigen. In den Registern des Bildsymbols Multicolor können optionale Einstellungen für folgende Funktionen vorgenommen werden: & siehe Multicolor / 2D Zytofluorogramm erzeugen (siehe Seite 270) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 277 von 323...
  • Seite 278 Häufigkeit der Intensitätswertpaare. Die Helligkeit des Punktes im Zytofluorogramm steht für die Häufigkeit. Je heller ein Punkt im Zytofluorogramm ist, desto häufiger ist die Intensitätswertkombination, die er repräsentiert. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 278 von 323...
  • Seite 279 Wenn Sie das Kontrollkästchen Auto scale deaktivieren, können Sie einen Wert für die maximale Häufigkeit angeben, die mit einer häufigkeitskodierten Farbzuordnungstabelle im Zytofluorogramm visualisiert wird. Optionen für die binäre Maske des Zytofluorogramms Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 279 von 323...
  • Seite 280 Bilddaten angezeigt, die im Zytofluorogramm maskiert wurden. Die maskierten Bilddaten werden blau dargestellt. Wenn Sie Invert mask wählen, wird die Farbkodierung von maskierten Bilddaten und Originalbild invertiert. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 280 von 323...

  • Seite 281: Optional)

    Gallery angeklickt ist und so alle Einzelbilder einer Bildserie in das Zytofluorogramm miteinfließen. 3D (optional) Dieses optionale Softwarepaket ist nicht Bestandteil des Basis-Programmpaketes. Sie können es aber bei Ihrer Leica Niederlassung oder einem autorisierten Händler erhalten. 3D Projektionen und Animationen von Bildserien Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...
  • Seite 282 Klicken Sie auf die Taste Up, um zur hierarchisch höheren Ebene zu gelangen. Klicken Sie auf die Taste Reset, um geänderte Variablen auf die letzte Einstellung zurückzusetzen. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 282 von 323...
  • Seite 283 Die Projektionsachse ist dabei die Blickrichtung des Betrachters auf den gedrehten Bildstapel. Das untenstehende Schema veranschaulicht die Rotationsrichtung der jeweiligen Bildebene, bei positiven Werten für Z, Y und X. Bei negativen Werten ist die Rotationsrichtung genau umgekehrt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 283 von 323...
  • Seite 284 Bildanzahl von beispielsweise 10 wird in Schritten von jeweils 20° (nicht 18°) ein Bild erzeugt, da es bei 10 Aufnahmen nur 9 Schritte gibt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 284 von 323...
  • Seite 285 Augen erzeugten ähnlichen Bildern wird vom Gehirn zu einem Bild mit räumlichem Tiefeneindruck verarbeitet. Diese Bildunterschiede lassen sich auch simulieren, indem man vor jedes Auge ein leicht unterschiedliches Bild hält. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 285 von 323...
  • Seite 286 Mauszeiger über die jeweilige Kachel halten. Wählen Sie in den nachfolgenden Navigationsebenen jeweils eine Kachel, bis Sie auf der untersten Ebene die gewünschte Funktion mit dem entsprechenden Dialog erreicht haben. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 286 von 323...
  • Seite 287 Endwert addiert. In der folgenden schematischen Darstellung, bedeutet dies für die Berechnung des Pixels C, dass die Grauwerte der Pixel A, B und D, E in die Berechung des Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...
  • Seite 288 Filter eingesetzt, das heißt der Filter wird auf einmal immer nur über eine Achse berechnet. Der Wert, der im Feld Filter Directions als Cut-off Wavelength angegeben wird, ist die Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...
  • Seite 289 Strukturen im Bild zu verändern und vom Hintergrund zu trennen. Morphologische Operatoren werden üblicherweise auf binäre Bilder angewandt. Binärbilder haben Pixel, die nur den Wert 1 oder 0 haben. In der Leica Confocal Software können Sie mit den Segmentierungsfunktionen binäre Bilder erzeugen. Es können aber auch Grauwertbilder, also Bilder mit einem Wertebereich von zum Beispiel 256 (8 Bit) verschiedenen Grauwerten/ Intensitätswerten,...
  • Seite 290 Intensitätswerte steigt, während die niedrigen Intensitätswerte steigt). Zahl der niedrigen Intensitätswerte sinkt). Nach der Anwendung des Operators Open Nach der Anwendung des Operators Close Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 290 von 323...
  • Seite 291 Einzelbilder, die entlang der Projektionsachse übereinanderliegen, durch alle optischen Schnitte hindurch untersucht. Aus jeder dieser Säulen von Abtastpunkten wird dann der maximale Intensitätswert als Repräsentant aller Intensitätswerte innerhalb der Säule im zweidimensionalen Projektionsbild dargestellt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 291 von 323...
  • Seite 292 Topographiebild aus Intensitätsmaxima werden die Intensitätsmaxima zuerst der realen z-Position des jeweiligen Abtastpunktes zugeordnet und dann farbkodiert. & siehe Topographiebild erzeugen (Seite 208) Mittelwertprojektion eines Bildstapels bei variabler Projektionsachse Funktion Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 292 von 323...
  • Seite 293 Einzelbilder, die entlang der Projektionsachse übereinanderliegen, durch alle optischen Schnitte hindurch untersucht. Aus jeder dieser Säulen aus Abtastpunkten wird dann ein gewichteter Mittelwert aus allen Intensitätswerten berechnet und im zweidimensionalen Projektionsbild als Repräsentant für Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 293 von 323...
  • Seite 294 & siehe Prinzip und Arten von Projektionen (Seite 202) Klicken Sie auf die Taste SFP. Es wird eine SFP-Projektion des aktuellen Bildstapels erzeugt und im Ansichtsfenster Viewer dargestellt. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 294 von 323...
  • Seite 295 $ Navigation: Segmentation\ Thresholding $ Navigation: Segmentation\ Seeding (Threshold) $ Navigation: Segmentation\ Seeding (Single Channel) $ Navigation: Segmentation\ Seeding (Cross-Channel) Aufbau und Bedienung des Arbeitsschritts Process Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 295 von 323...
  • Seite 296 Punktorientierte Verfahren betrachten den Intensitätwert eines isolierten Pixels. Bei diesem Verfahren erfaßt man die Intensitätswertverteilung eines Bildes in einem Histogramm und versucht, in diesem einen Schwellenwert zu finden. Dieses Verfahren ist in der Leica Confocal Software mit der «Thresholding» Funktion (Schwellenwertfunktion) realisiert. Es kann ein unterer und ein oberer Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003...
  • Seite 297 Entscheidend für die Identifikation eines Pixels als Struktur oder Hintergrund ist dann nicht mehr die isolierte Betrachtung des Intensitätswertes eines Pixels, sondern der Intensitätswert eines Pixels im Kontext der Intensitätswerte seiner Nachbarpixel. Dieses Verfahren ist in der Leica Confocal Software mit den «Seeding» Funktionen (Bereichswachstumsfunktionen) realisiert.
  • Seite 298 Ist die Option All ausgewählt, wird die Segmentierung getrennt für jeden Detektionskanal ausgeführt. Ist der Bilddatensatz eine Zeitserie oder eine Lambdaserie, wählen Sie im Listenfeld rechts Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 298 von 323...
  • Seite 299 Sie im Feld Position je einen Wert für die x-, y- und z-Koordinate ein. Oder ziehen Sie das Fadenkreuz im Bild mit gedrückter linker Maustaste an die gewünschte Position. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 299 von 323...

  • Seite 300: Anhang

    2. Auswahl des Charakters der anzupassenden Interpolationsfunktion 3. Berechnung der Interpolationsfunktion f(x) = a + bx + cy 4. Addition der Intensitätsdifferenzen zum Ausgleich des Trendverlaufs Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 300 von 323...
  • Seite 301 Ausgleich nach dem Ausgleich Beispiel für die Vereinigung von Bildern unterschiedlicher Kanalzahl (Merging) a.) Erstes Ausgangsbild (Einstellung: Start=2) b.) Zweites Ausgangsbild (Einstellung: Start=1) c.) Vereinigungsbild Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 301 von 323...

  • Seite 302: Funktionsweise Der Booleschen Verknüpfungen

    0 XOR stellt die Vereinigungsmenge ohne die Schnittmenge von zwei Bildern a.) Binäre Darstellung dar. Pixel 1 b.) Binäre Darstellung Pixel 2 c.) Binäre Darstellung Ergebnispixel Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 302 von 323...

  • Seite 303: Optionales Trigger-Bedienpult

    Funktionsbeschreibung Das optionale Trigger-Bedienpult dient der Kontrolle ein- und ausgehender Triggersignale. Desweiteren können Triggersignale zur Steuerung von Aufnahmesequenzen manuell ausgelöst werden. Das Bedienpult kann unter der Artikelnummer 156108330 bei der zuständigen Leica- Niederlassung bestellt werden. Frontseite des Trigger Bedienpults Element Funktion Signalleuchte;...
  • Seite 304 Bedienpult an das Konfokalsystem übergeben werden. Ausgehende Triggersignale können über die Anschlussbuchse "Out4" an externe Geräte weitergegeben werden. Zum Testen können die Taster "TM1" - "TM4" benutzt werden. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 304 von 323...

  • Seite 305: Glossar

    Die gewölbte Fläche, auf der ein mikroskopisches Bild scharf abgebildet wird nennt man Bildfeldwölbung. Sie ist durch die konvexe Linsenform bedingt und macht sich aufgrund der geringen Brennweiten Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 305 von 323...
  • Seite 306 Schnitt 4 Frames erzeugt. Immersionsobjektiv Mikroskopisches Objektiv, das unter der Voraussetzung der Verwendung von Immersionsmedien entwickelt wurde. Wird bei einem Immersionsobjektiv kein oder ein falsches Immersionsmedium Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 306 von 323...
  • Seite 307 30/70 zum Beispiel, werden 30% des Anregungslichtes reflektiert und 70% transmittiert. Phasenvisualisierung Das Prinzip der Phasenvisualisierung, wie sie von Leica verwendet wird, ist eine optimierte Alternativmethode zu ratiometrischen Darstellungen. Das Hauptanwendungsgebiet liegt in der Messung von Ionenkonzentrationen in der Physiologie. Die Phasenvisualisierung erhält im Gegensatz zu ratiometrischen Verfahren mehr Informationen...
  • Seite 308 Volumenelement in einem dreidimensionalen System. In dieser Dokumentation wird sowohl ein Volumenelement im Präparat als auch ein 3D Bildpunkt als Voxel bezeichnet. Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 308 von 323...

  • Seite 309: Spezifikationen

    230 VAC / 12A Line 2 (in) 230 VAC / max. 8A (out) 1350 Maße und Dimensionen des Konfokalsystems Leica TCS SP2 (alle Maße in mm) Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 309 von 323...

  • Seite 313: Konformitätserklärung

    Leica Microsystems Heidelberg GmbH Konformitätserklärung Konformitätserklärung Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 313 von 323...

  • Seite 314: Index

    Arithmetischer Mittelwert, 237, 257, 258 Amplitude, 220 Arithmetisches Mittel, 238, 240 AND, 214, 303 ASCII-Daten, 243 Anfangspunkt, 154 Auflösung, 150, 219 Anfangspunkt einer Lambdaserie, 155 Auflösungsvermögen, 142 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 314 von 323...
  • Seite 315 Bottom Hat, 259, 287 Bildauflösung, 174, 219 Brechungsindex, 306 Bildaufnahme, 174 Browse, 183 Bildaufnahme im Mittelungsverfahren, 173 Burst mode, 173 Bildausschnitt, 149, 220 Center of mass, 209 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 315 von 323...
  • Seite 316 Dialogfenster Objective, 142 Drahtgitterbild, 210 Dialogfenster Options, 256 Drehen, 211 Dialogfenster Printer Selection, 252 Drehwinkel, 170 Dialogfenster Select LUT, 195 Dreidimensionale Darstellung, 210 Dialogfenster Series Scan Overview, 154 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 316 von 323...
  • Seite 317 Hilfe, 137 Feinfokussiertisch, 179 Hilfe aus dem Internet, 10 Film, 200 Hintergrund, 175, 259, 287, 296 Film starten und beenden, 201 Histogramm, 237 Filmsequenz, 200, 201 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 317 von 323...
  • Seite 318 Merging, 220, 302 Länge der Meßstrecke, 240 Messen, 240 Langpassfilter, 306 Messen eines Profils entlang einer Strecke, 240, 257 Leervergrößerung, 306 Messpunkte speichern, 257 Legal notes, 11 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 318 von 323...
  • Seite 319 Planobjektive, 142, 306 Oberflächenstruktur, 209 Polygon, 244 Objective, 142 Position Maximalwert, 238 Objektiv, 142 Position Minimalwert, 238 Objektiv auswählen, 142 Präsentation, 249, 250, 251 Objektivrevolver, 142 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 319 von 323...
  • Seite 320 Schrittweite, 157 Schwellenwert, 296 Rechteck zeichnen, 250 Schwellenwertbild, 296 Rectangle, 245, 250 Sections, 157 Reflexionsaufnahmen, 140 Seeding, 296 Region of Interest, 243, 244, 245, 306 Segmentation, 296 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 320 von 323...
  • Seite 321 Taste Line, 250 Spektrum, 159 Taste Look-up Table, 195 Stain, 159 Taste Materials, 269 Standardabweichung, 237, 238, 240 Taste Mode, 151 Stapelverarbeitung von Daten, 173 Taste Move, 212 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 321 von 323...
  • Seite 322 Taste Topography, 209 Unidirektionalen oder Bidirektionalen Scan auswählen, 169 Taste Unidirectional/ Bidirectional Scan, 169 Unidirektionaler Scan, 169 Taste Up, 214, 219, 220, 224, 227, 259, 265, Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 322 von 323...
  • Seite 323 Vorheriges Bild in einer Serie anzeigen, 200 Z-Stellantrieb, 179 Vorlage, 256 zweidimensional, 271 Voxel, 203, 306 Zweipunktmessung, 186, 238, 257, 269 Waviness, 265 Z-Wide, 179 Wellenlänge, 158 Zytofluorogramm, 271, 274, 275, 277 Benutzerhandbuch Leica TCS SP2 deutsch Art.Nr.: 15-9330-052 / Vers.: 14012003 Seite 323 von 323...

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