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Muster-Standardarbeitsanweisung
SYSMEX Urinanalyse-System UF-500i
1. Dokumentenname / Version:
1.1 Durchflusszytometrie
Der vollautomatische Urinzellanalysator UF-500i misst mit Hilfe der Technik der
Durchflusszytometrie die Parameter Vorwärtsstreulicht und Vorwärtsfluoreszenzlicht
bei Zellen im Urin.
Nachdem bestimmte Substanzen in den Zellen einer Fluoreszenzfärbung unterzogen
und diese in Suspension gebracht wurden, werden sie dann mit Mantelflüssigkeit
bedeckt und durch eine Düse in eine Einzelschicht eingespritzt. Hier wird jede Zelle
im Urin von einem eng fokussierten Laserstrahl erleuchtet. Die einzelnen Zellen
fluoreszieren und streuen Licht in unterschiedlichem Maße. Mit Hilfe der Analyse der
hierdurch erzeugten elektrischen Signale können die einzelnen Zellen im Urin
unterschieden werden. Hierzu wird ein eindimensionales Histogramm erzeugt, das
auf der Fluoreszenzintensität beruht, sowie ein zweidimensionales Scattergramm,
das auf Fluoreszenzintensität und Streulichtintensität beruht. (Siehe Schema unten)
Das Licht, das von der Laserlichtquelle in Vorwärtsrichtung und seitlicher Richtung
gestreut wird, nennt man Streulicht. Es gibt die Größe und den Oberflächenzustand
der Zellen im Verhältnis zur Leuchtkraft wieder. Das Fluoreszenzlicht, das von den
gefärbten Zellen im Urin emittiert wird, zeigt die quantitativen Eigenschaften der
Zelloberfläche und des Zytoplasmas sowie die Eigenschaften des Zellkerns (Mengen
an RNA und DNA) infolge der Eigenschaften des mit einem fluoreszierenden
Farbstoff markierten Antikörpers.
Der UF-500i ist ein Analysator, der auf Basis der Prinzipien der Durchflusszytometrie
die fünf partikulären Bestandteile in einer Urinprobe als RBC (Erythrozyten), WBC
(Leukozyten), EC (Epithelzellen), CAST (Zylinder) und BACT (Bakterien) klassifiziert
und diese quantitativ anzeigt.
Abbildung 1: Schematische Darstellung der Fluoreszenzdurchflusszytometrie
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Sysmex Deutschland GmbH
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