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Gel Rezepte
Die Laemmli-Gel Rezepte sind für 30 ml einer einzigen Konzentration Lösung (genug für
eine 1,5-mm-18 × 16 cm Gel). Tabellarische sind Zutaten und Mengen für die relativ
großen Poren Gele (7,5 bis 10% T-Bereich) sowie kleineren Poren Gele (12,5 bis 15%
T-Bereich). Eine 4% Sammelgel ist weit verbreitet. Die linearen Gradienten Rezept ist für
100 ml Lösung. Das Gesamtvolumen ist abhängig von der Anzahl der Gele Besetzung und
Geldicke allmählich nach Bedarf. Alle Gele werden mit 2,6% C vernetzt
Tabelle 5. Laemmli-Gel Rezepte (pro 30 ml Trenngele Lösung, 5 ml Sammelgel-Lösung)
Acrylamid Lager (Lösung #1)
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Lösung #2)
0,5 M TrisCl, pH 6,8 (Lösung #3)
10% SDS (Lösung #4)
Deionisiertes H
O
2
10% APS (Lösung #5)
TEMED
Endgültiges Volumen
Für lineare Gradientengele, verwenden Sie gleiche Volumina von niedrigen und hohen%%
Acrylamid-Lösungen. Weniger APS zugegeben, um die Polymerisation zu verlängern, und
noch weniger auf den höheren%-T-Lösung hinzugefügt, um die Polymerisation von oben
nach unten auftreten. Nach unseren Erfahrungen mit den Konzentrationen in der 10-20%
Steigung Beispiel unten, können zehn Gel-Sandwiches in einer Mehrfach-Gel Zaubernden
mit einer Flussrate von 5-10 ml / min gegossen werden.
Tabelle 6. Lineare Gradienten-Gel-Rezepte (pro 100 ml Lösung)
Acrylamid Lager (Lösung #1)
Saccharose
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Lösung #2)
10% SDS (Lösung #4)
Deionisiertes H
O
2
10% APS (Lösung #5)
TEMED
•
p36
7,5%
10%
7,5 ml
10 ml
7,5 ml
7,5 ml
0,3 ml
0,3 ml
14,6 ml
12,1 ml
150 µl
150 µl
10 µl
10 µl
30,0
30,0 ml
10% T
33,30 ml
25,00 ml
1,00 ml
to 100,00 ml
0,300 ml
0,036 ml
Trenngel
12,5%
12,5 ml
15 ml
7,5 ml
7,5 ml
0,3 ml
0,3 ml
9,6 ml
7,1 ml
150 µl
150 µl
10 µl
10 µl
30,0 ml
30,0 ml
—
Sammelgel
15%
4%
0,67 ml
1,25 ml
0,05 ml
3,00 ml
25 µl
2,5 µl
5,0 ml
20% T
66,70 ml
15,00 g
25,00 ml
1,00 ml
to 100,00 ml
0,060 ml
0,036 ml
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