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Betrieb
6.9.3
Optimale Anregungs- und Emissionswellenlänge bestimmen
Wellenlängenschaltung in der Software Chromeleon
Seite 110
Die wichtigsten zu optimierenden Parameter sind die Anregungs- und
Emissionswellenlängen. Die folgenden Kriterien sind bei der Festlegung
einer Wellenlänge für die Analyse grundsätzlich von Bedeutung:
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Wählen Sie, wenn möglich, eine Anregungswellenlänge auf dem
Absorptionsmaximum der Probenbestandteile.
•
Vermeiden Sie den Wellenlängenbereich, in dem Lösungsmittel
absorbieren (zum Beispiel, unterhalb von 220 nm für Methanol und
unterhalb von 210 nm für Acetonitril). Die Anregungswellenlänge
sollte daher immer über dem UV-Cutoff des Lösungsmittels
ausgewählt werden. Informationen zu den UV-Cutoff-Wellenlängen
von Lösungsmitteln finden Sie unter
Lösungsmitteln
(} Seite 190).
•
Die Emissionswellenlänge muss mindestens 20 nm größer als die
Anregungswellenlänge gewählt werden.
TIPP In Chromeleon 7 steht Ihnen das Aufzeichnen eines FL-Feldes (FL
Field Acquisiton) zur Verfügung, welches die Bestimmung der
Retentionszeiten und Absorptionsmaxima deutlich vereinfacht.
Weitere Informationen zur Wahl der geeigneten Wellenlängen finden
Sie im mitgelieferten Fluorescence Method Development Handbook.
Thermo Fisher Scientific empfiehlt, auf einem Kanal zu messen und die
Wellenlängen zeitgesteuert für die nacheinander detektierten Peaks der
unterschiedlichen Probenbestandteile einzustellen, anstatt im Multi-
Channel-Modus alle interessanten Wellenlängen simultan zu messen.
Verwenden Sie den Instrument Method Wizard, um die Startwellenlänge
für einen Kanal festzulegen. Öffnen Sie nach Beendigung des Assistenten
die Methode im Instrument Method Editor. In der Modulansicht
(Module View) für den Detektor können Sie auf der Registerkarte
Timetable definieren, zu welchen Zeiten die Wellenlängen und andere
Parameter geschaltet werden sollen.
Einzelheiten hierzu finden Sie auch in der Chromeleon-Hilfe.
Fluoreszenz-Detektoren (VC-D50, VC-D51, VF-D50, VF-D51)
UV-Cutoff-Wellenlängen von
Betriebsanleitung
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