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Single Spectrum Scan (Erfassung Von Einzelspektren) - ThermoFisher Scientific Vanquish VC-D50 Betriebsanleitung

Fluoreszenz-detektoren
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6.7.4

Single Spectrum Scan (Erfassung von Einzelspektren)

Fluoreszenz-Detektoren (VC-D50, VC-D51, VF-D50, VF-D51)
Betriebsanleitung
TIPP
Mit Hilfe der Filterrad-Einstellung (nur VF-Detektoren) können Sie
unerwünschte Wellenlängen ausblenden. Stellen Sie die Filterrad-
Einstellung zum Beispiel auf eine Wellenlänge von 370 nm, um den
Emissionswellenlängenbereich auf Wellenlängen oberhalb der
Filterwellenlänge zu beschränken.
Der Zero-Order-Modus eignet sich außerdem für Proben, die Licht mit
einer ungewöhnlich großen Bandbreite emittieren. In diesem Fall ist die
gemessene Intensität im Zero-Order-Modus höher als im Normalbetrieb,
wo der Großteil des emittierten Lichts vom Emissions-Monochromator
verworfen wird. Hiermit können Sie gegebenenfalls eine bessere
Detektionsgrenze erreichen.
Ein Beispiel zur Methodenentwicklung mit dem Zero-Order-Modus
finden Sie im Fluorescence Method Development Handbook.
TIPP
Setzen Sie zum Aktivieren des Zero-Order-Modus in der Software
Chromeleon den Wert für EmWavelength auf ZeroOrder.
Sehen Sie dazu auch
2
Filterrad (Nur VF-Detektoren) (} Seite 115)
Bei einem Single Spectrum Scan werden der Anregungs-Monochromator
oder der Emissions-Monochromator (oder auch beide simultan) über
einen einstellbaren Wellenlängenbereich durchgefahren, während die
Intensität des Fluoreszenz-Signals in Abhängigkeit von der Wellenlänge
kontinuierlich gemessen und aufgezeichnet wird. Nehmen Sie zum
Beispiel Spektren auf, um die optimalen Emissions- und Anregungs-
wellenlängen zu bestimmen. Es stehen drei Arten von Scanmodi zur
Verfügung: Excitation Scan, Emission Scan und Synchronous Scan.
Um einen stabilen Zustand in der Messzelle des Fluoreszenz-Detektors
zu erreichen sollte während der Scans der Pumpenfluss angehalten oder
auf eine sehr geringe Flussrate eingestellt werden. Wenn der Scan
während der Elution eines Peaks abgeschlossen werden kann und der
Scan wesentlich schneller als die zeitliche Halbwertsbreite des Peaks ist,
kann der Pumpenfluss konstant gehalten werden. Weitere
Informationen finden Sie in der Chromeleon-Hilfe.
6
Betrieb
Seite 103

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