Inhaltsverzeichnis
Werbung
Kapitel 3 – Protokolleinstellungen
R1 bietet ein Default-Protokoll, das für die meisten normalen Zelllinien verwendbar ist. Benutzer können bis zu 300
verschiedene Protokolle erstellen und speichern lassen.
3.1 Protokoll-Parameter
R1 Protokolle haben die folgenden modifizierbaren Parameter:
Parameter
Dilution Factor
Noise Reduction
Live Cell Sensitivity
Roundness (%)
Min. Cell Size (µm)
Max. Cell Size (µm)
Declustering Level
Dilution Factor (Verdünnungsfaktor): Der Verdünnungsfaktor wird zur präzisen Rechnung der Zellkonzentration benutzt.
Der Verdünnungsfaktor ist voreingestellt auf 1 für Without Trypan Blue (ohne Trypanblau) und 2 für With Trypan Blue (mit
Trypanblau), mit dem Default-Verhältnis von 1:1 (Trypanblau zu Zellsuspension). Benutzer können diesen Wert je nach
Verdünnung der Zellproben in Schritten von 1 zwischen 2 und 10, und in Schritten von 10 zwsichen 10 und 100 ändern. Für
Benutzer, die Zellen höherer Dichte verwenden wie z.B. fermentierte CHO-Zellen, sind serielle Verdünnungen und mehrere
Zählungen mit genauen Einstellungen des Verdünnungsfaktors erforderlich.
Noise Reduction (Rauschreduzierung): Das Hintergrundrauschen in Bildern wird durch diese Option eingestellt. Bei
starker Reduzierung reagiert das Gerät weniger empfindlich auf Rauschen, wodurch schwach gefärbte Zellen nicht
detektiert werden. Bei weniger Reduzierung kann das Gerät die Teilchen mit schwachen Signalen detektieren. Einstellen
dieses Parameters hilft bei der Optimierung für verschiedene Zelltypen, weil das Färbungsgrad von Zelle zu Zelle
verschieden ist.
Live Cell Sensitivity (Sensitivität für lebende Zellen): Lebende Zellen mit intakten Zellmembranen nehmen kein
Trypanblau auf. Durch Trypanblau bilden sich ringförmige Schatten um lebende Zellen, und das Zytoplasma von toten
Zellen und Zellen mit beschädigten Zellmembranen werden angefärbt. Dieses Gerät weist eine erhöhte Live Cell Sensitivity
auf. Es erkennt kleinere Zellen, indem es kleinere, kranzförmige Schatten registriert. Für die meisten Zellen sollte die
Wahlmöglichkeit 1 eingestellt werden. Wählen Sie eine Einstellung von ≥5 für mononukleäre Zellen des peripheren Blutes
(PBMCs) oder kleinere Zellen.
Roundness (Rundheit): Weil nicht alle Zellen völlig sphärisch sind, gelingt die Detektion verschiedener Zellen durch die
Rundheitseinstellung. Bei höherem Prozentansatz werden hauptsächlich runde Zellen gezählt, während weniger runde
Teilchen ausgeschlossen werden. Niedrigere Prozentansätze sind für Zählung der Zellen von unregelmäßiger Formen
geeignet.
Minimum and Maximum Cell Size (min. und max. Zellgröße): Zellengrößen können sehr verschieden sein. Um
spezifische Zellen effizient zu detektieren, können Benutzer die Zellgrößenparameter einstellen. Benutzer können die Werte
in Schritten von 1 µm zwischen 3-60 µm einstellen.
Declustering Level: Die Declustering-Funktion ermöglicht die effiziente Dektion von verschiedenen Zellen, die verklumpt
sein oder sich in Clusters befinden. Anwendung von einem hohen Declustering Level erhöht die Zählungsdauer. Die
Declustering-Funktion ist nützlich für die Zählung klebiger Zellen bzw. stäbchenformiger Sporen.
Bereich
1 – 100
1 – 10
1 - 9
0 – 100
3 – 59
4 – 60
None, Low, Medium, High
23
DEFAULT
2
5
1
60
3
60
Medium
Werbung
Inhaltsverzeichnis
Fehlerbehebung
