Inhaltsverzeichnis
Werbung
und der Zeitraum
werden zu den Zeitpunkten
Die Festzeit-Reaktion stellt höhere technische Anforderungen als die Gleichgewicht
-Methode. Das die Reaktionsgeschwindigkeit an zwei verschiedenen Zeitpunkten
gemessen wird, müssen alle Faktoren, die die Reaktionsgeschwindigkeit
beeinflussen, wie besipielsweise der pH, die Temperatur und die Enzym-Menge, bei
den verschiedenen Assays konstant gehalten werden, ebenso wie der Zeitpunkt der
beiden Messungen. Zur Kalibrierung muss eine Referenzlösung des Substrats
verwendet werden.
7.1.3 Kinetik
Bei der Kinetik -Methode (vor allem bei einer Kinetik nullter Ordnung oder einer
Methode
unabhängig
Reaktionsprozesses konstant. Daher ändert sich die Absorption der Analyte bei
einer bestimmten Wellenlänge gleichmäßig, und die Änderungsrate (ΔA/min) ist
direkt proportional zur Aktivität oder Konzentration des Substrats. Im Regelfall wird
die kinetische Methode zur Messung von Enzymaktivität verwendet.
Tatsächlich kann die Substrat -konzentration nicht hoch genug sein. Die Reaktion ist
nicht länger eine Reaktion nullter Ordnung , sobald das Substrat zu einem
bestimmten Grad verbraucht wurde. Die Theorie der Reaktion gilt daher
ausschließlich innerhalb eines bestimmten Zeitraums. Darüber hinaus wird die
Reaktion erst mit einer bestimmten zeitlichen Verzögerung stabil, da die Reaktion zu
Beginn kompliziert ist und aufgrund der komplexen Serumzusammensetzung
unterschiedliche Reaktionen auftreten.
Abbildung 7-5 Reaktionskurve von Einzel-Reagenz -Kinetik
A
t 1
t 2 t 3
Wie in Abbildung dargestellt 7-5, ist
hinzugefügt wird, und
Reaktion startet, sobald die Komponenten gemischt werden. Ab dem Zeitpunkt
wird die Reaktion stabil.
beendet wird. Der Zeitraum
Zeitraum
Absorptionsmessungen durchgeführt werden.
7-4
bis
die zeitliche Verzögerung. Die Absorptionsmessungen
t
t
3
4
und
t
4
kontinuierlicher
Aufzeichnung
von
der
Substrat
t n
der Zeitpunkt, an dem die Probe hinzugefügt wird. Die
t
2
ist der Zeitpunkt, an dem die Aufzeichnung der Reaktion
t
n
t
2
bis
umfasst
t
t
3
n
7 Berechnungsmethoden
durchgeführt.
t
5
)
ist
die
-konzentration
und
t
der Zeitpunkt, an dem das Reagenz
t
1
bis
ist die zeitliche Verzögerung und der
t
3
die
Aufzeichnung,
Reaktionsgeschwindigkeit
bleibt
während
während
der
der
t
3
die
Werbung
Inhaltsverzeichnis
