Herunterladen Inhalt Inhalt
Teilen
Diese Seite drucken
  1. Anleitungen
  2. Marken
  3. altona DIAGNOSTICS Anleitungen
  4. Laborzubehör & Laborgeräte
  5. AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit...
  6. Gebrauchsanweisung

altona DIAGNOSTICS AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 Gebrauchsanweisung

Vorschau ausblenden
Inhaltsverzeichnis

Werbung

Quicklinks

Diese Anleitung herunterladen
altona
DIAGNOSTICS
Gebrauchsanweisung
AltoStar
®
Influenza Screen & Type RT-PCR
Kit 1.5
04/2022 DE

Werbung

Inhaltsverzeichnis
loading

Verwandte Anleitungen für altona DIAGNOSTICS AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5

Inhaltszusammenfassung für altona DIAGNOSTICS AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5

  • Seite 1 altona DIAGNOSTICS Gebrauchsanweisung AltoStar ® Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 04/2022 DE...
  • Seite 3 CFX96™ Deep Well Dx System (Bio-Rad) CFX96™ Dx System (Bio-Rad) LightCycler 480 Instrument II (Roche) ® QuantStudio™ 5 Real-Time PCR System (Applied Biosystems) Rotor-Gene Q5/6 plex Platform (QIAGEN) ® AS0161543 04 2022 altona Diagnostics GmbH • Mörkenstr. 12 • D-22767 Hamburg...

  • Seite 4: Inhaltsverzeichnis

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Inhaltsverzeichnis Über diese Gebrauchsanweisung ............8 Zweckbestimmung ..................9 Inhalt des Kits ................... 10 Lagerung und Handhabung ..............11 Lagerung ....................11 Handhabung ..................12 4.2.1 Master A und Master B ................. 12 4.2.2 Positive Control (Positivkontrolle) und No Template Control (Negativkontrolle) .................
  • Seite 5 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Verwendung des AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® in Verbindung mit dem AltoStar Workflow ........... 23 ® Probenvolumen ..................23 Probenröhrchen ..................23 Proben-Barcodes.................. 24 Benötigtes, nicht mitgeliefertes Zubehör für den AltoStar ®...
  • Seite 6 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.8.3 Gültigkeit der Ergebnisse für eine Probe........62 7.6.9 Export von PCR-Ergebnissen zur automatischen Ergebnisinterpretation ................64 7.6.10 Export von PCR-Ergebnissen zur manuellen Ergebnisinterpretation ................65 7.6.10.1 Manuelle Interpretation der Ergebnisse ........67 Verwendung des AltoStar Influenza Screen &...
  • Seite 7 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 9.1.7 Klinische Leistungsdaten ..............86 Entsorgung ....................90 Qualitätskontrolle ..................90 Technischer Support ................91 Literatur ..................... 91 Handelsmarken und Haftungsausschlüsse ........... 92 Symbole ....................93 Assay-Protokoll für die AltoStar Connect Software und ®...

  • Seite 8: Über Diese Gebrauchsanweisung

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 1. Über diese Gebrauchsanweisung Diese Gebrauchsanweisung dient zur Anleitung des Benutzers bei der Verwendung des AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5. Kapitel 1–6 und 9–14 ® enthalten allgemeine Informationen und Anweisungen, die für alle in Verbindung mit dem AltoStar Influenza Screen &...

  • Seite 9: Zweckbestimmung

    Hebt Anweisungen und Verfahren hervor, deren Nichtbefolgung oder fehlerhafte Umsetzung zu Verletzungen führen und/oder die Funktion des Produkts beeinträchtigen kann. Wenden Sie sich an den technischen Support von altona Diagnostics, falls Sie Hilfe benötigen. HINWEIS Dieses Symbol steht neben Informationen, die für den Benutzer nützlich, für die Ausübung der Funktion jedoch nicht essenziell sind.

  • Seite 10: Inhalt Des Kits

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 3. Inhalt des Kits Das AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 enthält die folgenden ® Komponenten: Tabelle 1: Kitkomponenten Nominalvolumen Deckelfarbe Komponente Anzahl Röhrchen [µl/Röhrchen] Blau Master A Violett Master B Weiß...

  • Seite 11: Lagerung Und Handhabung

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Das Produkt wird auf Trockeneis verschickt. Überprüfen Sie das Produkt und seine Komponenten sofort nach Erhalt und vor der ersten Verwendung auf folgende Punkte: • Intaktheit • Vollständigkeit in Bezug auf Anzahl, Typ und Abfüllvolumina •...

  • Seite 12: Handhabung

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 4.2 Handhabung VORSICHT Überschreiten Sie weder die Anzahl der in dieser Gebrauchsanweisung angegebenen Auftau-/Einfrierzyklen noch angegebene Handhabungsdauer, da dies die Leistungsfähigkeit des Produkts beeinträchtigen kann. VORSICHT Die unsachgemäße Handhabung von Produktkomponenten und Proben kann zu Kontaminationen führen und die Leistungsfähigkeit des Produkts beeinträchtigen: - Vertauschen Sie nicht die Deckel von Reaktionsgefäßen und...

  • Seite 13: Positive Control (Positivkontrolle) Und No Template Control (Negativkontrolle)

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® HINWEIS Wurden Master A und Master B aufgetaut aber nicht benutzt, können sie erneut eingefroren und für spätere Läufe noch ein weiteres Mal aufgetaut werden. Entsorgen Sie die Röhrchendeckel nach dem Öffnen und nutzen Sie zum Verschließen neue Deckel, um Kontaminationen der Reagenzien zu vermeiden.

  • Seite 14: Hintergrundinformationen

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Zusätzlich zu dem Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und Influenza-A(H1N1) pdm09-Virus-RNA spezifischen Amplifikations- und Nachweissystem enthält der Assay Oligonukleotide für die Amplifikation und den Nachweis der internen Kontrolle (internal control, AltoStar Internal Control 1.5; im Folgenden als IC abgekürzt). ®...

  • Seite 15: Beschreibung Der Komponenten

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5.2 Beschreibung der Komponenten 5.2.1 Master A und Master B Master A und Master B enthalten alle Komponenten (PCR-Puffer, Reverse Transkriptase, DNA-Polymerase, Magnesiumsalz, Primer und Sonden), die für die reverse Transkription sowie für die PCR-vermittelte Amplifikation, Zieldetektion und Differenzierung von Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und Influenza-A(H1N1) pdm09-Virus-spezifischer RNA sowie der IC in einem Reaktionsansatz erforderlich sind.

  • Seite 16: Workflows

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5.3 Workflows 5.3.1 AltoStar Workflow ® Der AltoStar Workflow umfasst die folgenden IVD-Produkte: ® • AltoStar Automation System AM16 (Hamilton) ® • AltoStar Connect Software Version 1.7.4 oder höher (Hamilton) ® •...

  • Seite 17: Andere Workflows

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5.3.2 Andere Workflows Das AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 kann in Verbindung ® mit kompatiblen Workflows (manuell oder automatisiert) verwendet werden. Real-Time-PCR-Geräte, die zur Verwendung mit dem AltoStar Influenza Screen ®...

  • Seite 18: Proben

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5.4 Proben 5.4.1 Probenarten Die folgende Probenart ist für die Verwendung in Verbindung mit dem AltoStar ® Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 validiert: • Proben aus humanen Atemwegsabstrichen VORSICHT Verwenden Sie keine anderen Probenarten! Die Verwendung anderer Probenarten kann die Leistungsfähigkeit des Produkts beeinträchtigen.
  • Seite 19 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® HINWEIS gefrorene Lagerung Proben beeinträchtigt nicht Produktleistung. Vergewissern Sie sich bei Verwendung von gefrorenen Proben als Ausgangsmaterial, dass diese vor Gebrauch vollständig aufgetaut und ausreichend durchmischt sind. HINWEIS Die Proben müssen frei von Feststoffen und hochviskosen Anteilen sein. Feststoffe und hochviskose Anteile beeinträchtigen den Probentransfer auf dem AltoStar AM16 und die Proben können nicht verarbeitet...

  • Seite 20: Warnungen, Vorsichtsmaßnahmen Und Einschränkungen

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 6. Warnungen, Vorsichtsmaßnahmen und Einschränkungen • Überprüfen Sie das Produkt und seine Komponenten vor der ersten Verwendung auf Vollständigkeit in Bezug auf Anzahl, Typ und Abfüllvolumina. Benutzen Sie kein beschädigtes oder unvollständiges Produkt, da dies die Leistungsfähigkeit des Produkts beeinträchtigen kann.
  • Seite 21 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® • Die Lagerung der Eluate unter falschen Bedingungen kann zum Abbau der Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und/oder Influenza-A(H1N1) pdm09-Virus-Zielsequenzen führen und die Leistungsfähigkeit des Produkts beeinträchtigen. • Verwenden Sie keine andere Version des Assay-Protokolls als jene, die auf dem 2D-Barcode in dieser Gebrauchsanweisung angegeben ist.
  • Seite 22 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® • Entsorgung gefährlicher biologischer Abfälle muss Übereinstimmung mit den lokalen und nationalen Vorschriften erfolgen, um eine Kontamination der Umwelt zu vermeiden. • Möglicherweise auftretende Mutationen in den Zielregionen des Influenza-A- Virus-, Influenza-B-Virus- und/oder Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus-Genoms, die durch in diesem Kit verwendete Primer und/oder Sonden abgedeckt werden, können dazu führen, dass die Erreger trotz Vorhandenseins nicht detektiert werden.

  • Seite 23: Verwendung Des Altostar Influenza Screen & Type Rt-Pcr Kit 1.5 In Verbindung Mit Dem Altostar Workflow

    Geeignete Probenröhrchen zur Verwendung mit dem AltoStar AM16 sind bei ® altona Diagnostics erhältlich (7-ml-Röhrchen mit Deckel, 82 x 13 mm, VK000010). Andere Probenröhrchen können durch den Benutzer auf ihre Eignung geprüft werden. Genauere Informationen hierzu finden Sie in der Gebrauchsanweisung des AltoStar Purification Kit 1.5.

  • Seite 24: Proben-Barcodes

    Informationen hierzu finden Sie in der Gebrauchsanweisung des AltoStar ® Purification Kit 1.5. 7.4 Benötigtes, nicht mitgeliefertes Zubehör für den AltoStar ® Workflow Das in Tabelle 2 angegebene Zubehör muss bei altona Diagnostics bestellt werden. Tabelle 2: Erforderliche Materialien und Geräte Material Beschreibung Bestellnr. Produktpaket aus dem AltoStar ®...

  • Seite 25: Allgemeine Materialien Und Geräte

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Material Beschreibung Bestellnr. 300-μl-Filterspitzen zur Verwendung in 300 μl CO-RE Tips Verbindung mit dem AltoStar Automation VK000008 ® System AM16 Röhrchen mit Barcode zum Mischen von Pooling Tube VK000002 PCR-Reagenzien Autoklavierbarer Sterilbeutel zur Waste Bag Verwendung in Verbindung mit dem VK000009...

  • Seite 26: Verfahren

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6 Verfahren 7.6.1 Übersicht über den AltoStar Workflow ® Alle Schritte des vollständigen AltoStar Workflows sind in Tabelle 4 ® zusammengefasst. Informationen spezifischen Einstellungen Verwendung in Kombination mit dem AltoStar Influenza Screen & Type ®...
  • Seite 27 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Tabelle 4: Übersicht über den AltoStar Workflow ® Schritt Handlung 1. Starten des AltoStar • Schalten Sie den AltoStar AM16 ein. ® ® • Schalten Sie den Computer und den Monitor ein. AM16 •...
  • Seite 28 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Schritt Handlung 4. Starten eines • Klicken Sie in der Menüleiste auf Purification → Start Purification (Aufreinigung → Aufreinigung starten). Aufreinigungslaufs Wechseln Sie alternativ zurück auf den Startbildschirm und klicken Sie auf die Schaltfläche Start Purification (Aufreinigung starten).
  • Seite 29 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Schritt Handlung 5. Beenden des • Vergewissern Sie sich, dass die Beladungsplattform leer ist, und bestätigen Sie das Dialogfenster Run Aufreinigungslaufs finished (Lauf beendet) mit OK. • Befolgen Sie die Anweisungen im Dialogfenster Maintenance (Wartung) und bestätigen Sie mit OK.
  • Seite 30 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Schritt Handlung 6. Starten eines PCR- • Klicken Sie in der Menüleiste auf PCR Setup → Start PCR Setup (PCR-Setup → PCR-Setup starten). Setup-Laufs Wechseln Sie alternativ zurück auf den Startbildschirm und klicken Sie auf die Schaltfläche Start PCR Setup (PCR-Setup starten).
  • Seite 31 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Schritt Handlung 8. Versiegeln der PCR- • Versiegeln PCR-Platte PCR- Plattenversiegelungsfolie. Platte 9. Starten des PCR-Laufs • Schalten Sie den CFX96™ DW Dx, den verbundenen Computer und den Monitor ein. • Starten Sie die CFX Manager™...

  • Seite 32: Programmierung Eines Altostar ® Laufs

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® VORSICHT Die Lagerung der Eluate unter falschen Bedingungen kann zum Abbau der Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und/oder Influenza-A(H1N1) pdm09-Virus-Zielsequenzen führen und die Leistungsfähigkeit des Produkts beeinträchtigen. 7.6.2 Programmierung eines AltoStar Laufs ® Detaillierte Anweisungen für das Starten eines AltoStar Laufs finden Sie in ®...

  • Seite 33: Starten Eines Pcr-Setup-Laufs

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.3 Starten eines PCR-Setup-Laufs 1. Wählen Sie in der Menüleiste PCR Setup → Start PCR Setup (PCR-Setup → PCR-Setup starten) aus. Rufen Sie alternativ erneut den Startbildschirm der AltoStar Connect Software auf und klicken Sie auf die Schaltfläche Start ®...

  • Seite 34: Vorbereiten Von Reagenzien Für Einen Pcr-Setup-Lauf

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.3.1 Vorbereiten von Reagenzien für einen PCR-Setup-Lauf 1. Tauen Sie die erforderlichen Kontrollen und die benötigte Anzahl an Master- Röhrchen bei Raumtemperatur (max. +30 °C) vollständig auf. 2. Durchmischen Sie die Proben durch leichtes Vortexen. 3.
  • Seite 35 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® HINWEIS Wählen Sie zur Visualisierung der Position eines Elements auf dem Träger und der Position des Trägers auf dem Deck des AltoStar AM16 ® die entsprechende Tabellenzeile im Dialogfenster Loading (Laden) aus. Die Position des Elements und seines Trägers wird wie folgt visualisiert: - Hervorhebung in Rot in der Visualisierung des Gerätedecks - Auf dem AltoStar...
  • Seite 36 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® HINWEIS Die Reihenfolge der einzelnen Röhrchen in den Trägern ist beliebig. HINWEIS Das Volumen der geladenen Komponenten wird vor der Verarbeitung nicht durch das System überprüft. Nicht ausreichende Komponenten- Volumina verhindern ein erfolgreiches PCR-Setup für den betroffenen Assay.
  • Seite 37 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® HINWEIS Wenn Sie auf Cancel (Abbrechen) klicken, wird der PCR-Setup-Lauf abgebrochen, kann aber erneut gestartet werden (siehe Kapitel 7.6.3 Starten eines PCR-Setup-Laufs). Der AltoStar AM16 zieht die Träger in das Gerät ein und führt eine Barcode- ®...

  • Seite 38: Während Des Pcr-Setup-Laufs

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7. Bestätigen Sie das Dialogfeld Loading complete (Beladung abgeschlossen), indem Sie auf OK klicken oder warten Sie 10 Sekunden auf den automatischen Start des Prozesses. HINWEIS Wenn Sie auf Cancel (Abbrechen) klicken, wird der PCR-Setup-Lauf abgebrochen, kann aber erneut gestartet werden (siehe Kapitel 7.6.3 Starten eines PCR-Setup-Laufs).

  • Seite 39: Ergebnisse Des Pcr-Setup-Laufs

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 3. Befolgen Sie die Anweisungen im Dialogfenster Maintenance (Wartung). In der Tabelle des Dialogfensters wird die Anzahl der Reaktionen in den Master- Röhrchen angezeigt, die nicht im PCR-Setup-Lauf verwendet wurden. 4. Wird nun direkt ein weiterer PCR-Setup-Lauf mit der derzeit geladenen Eluatplatte gestartet, kann die Eluatplatte unversiegelt in der Trägerposition bleiben.
  • Seite 40 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Auf dem Bildschirm Results (Ergebnis) wird eine Tabelle mit allen Proben angezeigt, die im letzten PCR-Setup-Lauf verwendet wurden sowie eine Spalte Status (Status) auf der rechten Seite, der zu entnehmen ist, ob das PCR-Setup für eine bestimmte Probe vollständig durchgeführt wurde (siehe Tabelle 5).

  • Seite 41: Versiegelung Der Pcr-Platte

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® HINWEIS Die Ergebnisdateien von PCR-Setup-Läufen können erneut generiert werden, indem Sie den entsprechenden PCR-Setup-Lauf laden und auf die Schaltfläche Create LIMS File (LIMS-Datei erstellen) klicken, um die LIMS-Datei zu erstellen, auf Create Report (Report erstellen), um den Bericht zu erstellen und auf Create Bio-Rad Cycler File (Bio-Rad Cyclerdatei erstellen), um die Cycler-Datei zu erstellen.
  • Seite 42 Wird der Plattenversiegler bedient, ohne dass sich der Plattenadapter im Schubfach befindet, kann dies dazu führen, dass der Versiegler nicht mehr funktioniert. Kontaktieren Sie in diesem Fall den technischen Support von altona Diagnostics (siehe Kapitel 12. Technischer Support). HINWEIS Wenn die PCR-Plattenversiegelungsfolie oder der Rahmen nicht ordnungsgemäß...

  • Seite 43: Stabilität Des Pcr-Mix

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.5.1 Stabilität des PCR-Mix Nach Abschluss des PCR-Setup-Laufs bleibt der RT-PCR-Mix in der versiegelten PCR-Platte bei Raumtemperatur (max. +30 °C) noch 30 Minuten stabil. VORSICHT Überschreiten Sie nicht die maximale Aufbewahrungszeit für den PCR- Mix.

  • Seite 44: Während Des Pcr-Laufs

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7. Zentrifugieren Sie die versiegelte PCR-Platte kurz ab, um sicherzustellen, dass sich die gesamte Flüssigkeit am Boden der Wells befindet. 8. Setzen Sie die versiegelte PCR-Platte in den Heizblock des CFX96™ DW Dx ein.
  • Seite 45 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 1. Klicken Sie im Fenster Data Analysis (Datenanalyse) auf die Schaltfläche Plate Setup (Platten-Setup) in der Menüleiste und wählen Sie View/Edit Plate (Platte anzeigen/bearbeiten) aus. Das Dialogfenster Plate Editor (Platten- Editor) wird angezeigt (siehe Abbildung 1). Abb.
  • Seite 46 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5. Wählen Sie alle Wells im Bereich der PCR-Platte aus, die zum ersten Assay gehören (siehe Abbildung 2). Die Wells, die zu einem bestimmten Assay gehören, lassen sich im Dialogfenster Plate Editor (Platten-Editor) anhand des Eintrags im Feld Biological Set (biologische Gruppe) ermitteln.

  • Seite 47: Pcr-Datenanalyse

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.7 PCR-Datenanalyse Die Ergebnisse aller Assays (Well-Gruppen) auf der PCR-Platte sind in der in Abbildung 3 dargestellten Reihenfolge zu analysieren. Abb. 3: PCR-Datenanalyse-Prozess...
  • Seite 48 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Achten Sie darauf, im Fenster Data Analysis (Datenanalyse) die Well Group (Well- Gruppe) des AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 auszuwählen. ® Klicken Sie dazu auf das Dropdown-Menü Well Group (Well-Gruppe) rechts neben der Schaltfläche Well Group (Well-Gruppe) (siehe Abbildung 4) in der Menüleiste.

  • Seite 49: Baseline-Korrektur

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.7.1 Baseline-Korrektur Die von der CFX Manager™ Dx Software verwendeten Baseline-Einstellungen müssen eventuell für einzelne Wells des Assays [Well Group (Well-Gruppe)], die Gegenstand der Analyse sind, korrigiert werden. 1. Achten Sie darauf, im Fenster Data Analysis (Datenanalyse) die Well Group (Well-Gruppe) des AltoStar Influenza Screen &...
  • Seite 50 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5. Wählen Sie alle Zeilen mit einem Baseline End (Baseline-Ende) Wert zwischen 1 und 9 aus (siehe Abbildung 5). Abb. 5: Dialogfenster Baseline Threshold (Baseline-Schwellenwert) 6. Setzen Sie den Wert im Feld End: (Ende:) für die ausgewählten Zeilen auf 45 (siehe Abbildung 5).

  • Seite 51: Ausschluss Irregulärer Pcr-Signale

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.7.2 Ausschluss irregulärer PCR-Signale Gültige Ergebnisse können nur aus PCR-Signalen abgeleitet werden, die frei von Signalartefakten sind. Solche Artefakte können beispielsweise durch Kontamination oder Bläschen im RT-PCR-Mix verursacht werden. PCR-Signale, die Signalartefakte enthalten, müssen vom Nutzer ausgeschlossen werden.
  • Seite 52 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 2. Identifizieren Sie Wells mit irregulären PCR-Signalen (lineare Signalzunahme, Signalspitzen usw.) in den Detektionskanälen FAM™ (Influenza-A-Virus- Ziel), VIC™ (IC), Cy5 (Influenza-B-Virus-Ziel) und ROX™ [Influenza-A(H1N1) pdm09-Virus-Ziel] (siehe Abbildung 6). Abb. 6: Fenster Data Analysis (Datenanalyse): irreguläres PCR-Signal...
  • Seite 53 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 3. Klicken Sie mit der rechten Maustaste auf jedes der betroffenen Wells und wählen Sie Well... → Exclude from Analysis (Well... → Von der Analyse ausschließen) (siehe Abbildung 7). Abb. 7: Fenster Data Analysis (Datenanalyse): Well von der Analyse ausschließen...
  • Seite 54 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 4. Das ausgewählte Well wird von der Analyse ausgeschlossen. Für dieses Well werden keine Ergebnisse generiert (siehe Abbildung 8). Abb. 8: Fenster Data Analysis (Datenanalyse): ausgeschlossenes Well...

  • Seite 55: Festlegen Von Schwellenwerten

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.7.3 Festlegen von Schwellenwerten Die Schwellenwerte für die Detektionskanäle FAM™ (Influenza-A-Virus-Ziel), VIC™ (IC), Cy5 (Influenza-B-Virus-Ziel) und ROX™ [Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus-Ziel] müssen durch den Benutzer entsprechend den Signalen der Kontrollen manuell eingegeben werden. 1. Achten Sie darauf, im Fenster Data Analysis (Datenanalyse) die Well Group (Well-Gruppe) des AltoStar Influenza Screen &...
  • Seite 56 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 2. Setzen Sie links im Fenster Data Analysis (Datenanalyse) nur im Kontrollkästchen neben VIC für den Detektionskanal der IC ein Häkchen (siehe Abbildung 9). Abb. 9: Fenster Data Analysis (Datenanalyse): Festlegen des VIC™ Schwellenwerts...
  • Seite 57 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 3. Wählen Sie in der Platten-Ansicht des Fensters Data Analysis (Datenanalyse) nur das Well für die NTC aus (siehe Abbildung 9). 4. Ziehen Sie den Schwellenwert in den Exponentialbereich des NTC-Signals (siehe Abbildung 9).
  • Seite 58 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Abb. 10: Fenster Data Analysis (Datenanalyse): Festlegen des FAM™ Schwellenwerts 6. Wählen Sie nur die Wells mit der NTC und der PC in der Platten-Ansicht des Fensters Data Analysis (Datenanalyse) aus (siehe Abbildung 10). 7.

  • Seite 59: Gültigkeit Von Pcr-Ergebnissen

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 8. Entfernen Sie zur Auswahl des Detektionskanals für die Influenza-B-Virus- und die Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus-Zielsequenz das Häkchen aus dem Kontrollkästchen für FAM links im Fenster Data Analysis (Datenanalyse), setzen Sie das Häkchen bei Cy5 bzw. ROX und wiederholen Sie die Schritte 6 und 7.
  • Seite 60 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 3. Klicken Sie mit der rechten Maustaste auf jedes Well, das ungültige Daten gemäß den Kapiteln 7.6.8.2 Gültigkeit diagnostischer PCR-Läufe bis 7.6.8.3 Gültigkeit der Ergebnisse für eine Probe enthält und wählen Sie Well... → Exclude from Analysis (Well...
  • Seite 61 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Abb. 12: Fenster Data Analysis (Datenanalyse): ungültiges Well von der Analyse ausschließen Das ausgewählte Well wird von der Analyse ausgeschlossen. Für dieses Well werden keine Ergebnisse generiert.

  • Seite 62: Gültigkeit Diagnostischer Pcr-Läufe

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.8.2 Gültigkeit diagnostischer PCR-Läufe Ein diagnostischer PCR-Lauf ist gültig, wenn die folgenden Kontrollbedingungen erfüllt sind: Tabelle 7: Kontrollbedingungen für einen gültigen PCR-Lauf Kontrolle Detektionskanal ROX™ FAM™ [Influenza- (Influenza-A- (Influenza-B- VIC™ (IC) A(H1N1)pdm09- Virus-Ziel) Virus-Ziel)
  • Seite 63 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Tabelle 8: Gültigkeit des Ergebnisses Detektionskanal ROX™ Gültigkeit des FAM™ Cy5™ [Influenza-A Ergebnisses (Influenza-A- (Influenza-B- VIC™ (IC) (H1N1)pdm09- Virus-Ziel) Virus-Ziel) Virus-Ziel] Gültiges +/-* Ergebnis Gültiges +/-* Ergebnis Gültiges +/-* Ergebnis Gültiges +/-* Ergebnis Gültiges...

  • Seite 64: Export Von Pcr-Ergebnissen Zur Automatischen Ergebnisinterpretation

    Die LIMS-Integration muss gemäß den Spezifikationen von altona Diagnostics umgesetzt werden. Informationen zur LIMS-Integration finden Sie in Kapitel 16. Assay-Protokoll für die AltoStar Connect ® Software und Informationen zur LIMS-Integration und/oder kontaktieren Sie den technischen Support von altona Diagnostics (siehe Kapitel 12. Technischer Support).

  • Seite 65: Export Von Pcr-Ergebnissen Zur Manuellen Ergebnisinterpretation

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® HINWEIS Werden die Ergebnisse von mehr als einem Assay (Well-Gruppe) aus einem PCR-Lauf in demselben Ordner gespeichert, so werden die LIMS- Ergebnisdateien des ersten Assays (der ersten Well-Gruppe) mit den LIMS-Ergebnisdateien des zweiten Assays (der zweiten Well-Gruppe) überschrieben.
  • Seite 66 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5. Achten Sie darauf, dass oben links im Dialogfenster Report (Bericht) mindestens die folgenden Inhalte ausgewählt sind (siehe Abbildung 13): Abb. 13: Dialogfenster Report (Bericht) 6. Wählen Sie weitere Inhalte für den Bericht aus oder ab, indem Sie die entsprechenden Kontrollkästchen aktivieren oder deaktivieren.

  • Seite 67: Manuelle Interpretation Der Ergebnisse

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 7.6.10.1 Manuelle Interpretation der Ergebnisse 1. Öffnen Sie die Berichtsdatei, die für die Well-Gruppe des AltoStar Influenza ® Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 generiert wurde (siehe Kapitel 7.6.10 Export von PCR-Ergebnissen zur manuellen Ergebnisinterpretation). 2.
  • Seite 68 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 5. Entnehmen Sie der Tabelle 9, wie die Ergebnisse zu interpretieren sind. Tabelle 9: Ergebnisinterpretation Schwellenwertzyklus (C ) für die Ziele Influenza-A-Virus, Influenza-B-Virus und Ergebnisinterpretation Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus. Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- oder 1–45 Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus-spezifische RNA erkannt.

  • Seite 69: Cfx96™ Deep Well Dx System

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 8. Verwendung des AltoStar Influenza Screen & Type ® RT-PCR Kit 1.5 in Verbindung mit anderen Real-Time- PCR-Geräten als dem CFX96™ Deep Well Dx System Neben dem CFX96™ DW Dx wurde das AltoStar Influenza Screen &...

  • Seite 70: Verfahren

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® • LightCycler 480 Instrument II (Roche) ® ◦ 96-Well-PCR-Platten und Versiegelungsfolie [LightCycler 480 Multiwell ® Plate 96, white und LightCycler 480 Sealing Foil (Roche) oder ® vergleichbares Material] HINWEIS Es wird nicht empfohlen, andere Materialien oder Geräte zu verwenden, als in dieser Gebrauchsanweisung angegeben.

  • Seite 71: Master Mix Ansatz

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® VORSICHT Die Lagerung der Eluate unter falschen Bedingungen kann zum Abbau der Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und/oder Influenza-A(H1N1) pdm09-Virus-Zielsequenzen führen und die Leistungsfähigkeit des Produkts beeinträchtigen. 8.2.2 Master Mix Ansatz Alle Komponenten des AltoStar Influenza Screen &...

  • Seite 72: Reaktionsansatz

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 8.2.3 Reaktionsansatz 1. Pipettieren Sie 20 µl des Master Mix in jedes erforderliche Well einer geeigneten optisch klaren 96-Well-PCR-Platte oder eines geeigneten optisch klaren Reaktionsröhrchens. 2. Fügen Sie jeweils 10 µl der Probe (Eluat aus der Nukleinsäure-Extraktion) oder 10 µl der Kontrollen (PC oder NTC) hinzu.

  • Seite 73: Pcr-Lauf

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® VORSICHT Vertauschen Sie während des PCR-Setups oder des Transfers in das PCR-Instrument keine Proben oder Proben-IDs. Dies kann zu falschpositiven oder falschnegativen Ergebnissen durch inkorrekte Zuordnung der Proben führen. 8.2.4 PCR-Lauf 8.2.4.1 Programmierung des Real-Time-PCR-Gerätes Grundlegende Informationen...
  • Seite 74 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Geben Sie die folgenden Fluoreszenz-Detektionskanäle (Farbstoffe) ein: Tabelle 13: Fluoreszenz-Detektionskanäle Ziel Detektorname Reporter Quencher Influenza A Influenza A FAM™ (Ohne) Influenza B Influenza B (Ohne) Influenza A Influenza A (H1N1)pdm09 ROX™ (Ohne) (H1N1)pdm09 Interne Kontrolle...

  • Seite 75: Datenanalyse

    Influenza Screen & ® Type RT-PCR Kit 1.5 an den einzelnen Real-Time-PCR-Geräten generierten Daten erhalten Sie auf Anfrage beim technischen Support von altona Diagnostics (siehe Kapitel 12. Technischer Support). Die Kriterien für die Gültigkeit diagnostischer PCR-Läufe sowie für die Ergebnisinterpretation, unabhängig von dem verwendeten Real-Time-PCR-Gerät, sind in den Kapiteln 7.6.8.2 Gültigkeit diagnostischer PCR-Läufe bis 7.6.8.3...

  • Seite 76: Leistungsdaten

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 9. Leistungsdaten Die Leistung des AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 wurde unter ® Verwendung von handelsüblichem Influenza-A-Virus-Material (Influenza A H3N2, Stamm Wisconsin/67/05), Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus-Material (Stamm A/NY/02/2009) und Influenza-B-Virus-Material (Stamm Florida/04/06) bewertet. 9.1 Atemwegsabstriche 9.1.1 Analytische Sensitivität Zur Bestimmung der Nachweisgrenze (limit of detection, LoD) wurde eine...
  • Seite 77 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Tabelle 15: PCR-Ergebnisse zur Berechnung der analytischen Sensitivität des AltoStar ® Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 für Influenza-A-Virus Konzentration N [gesamt] N [positiv] Trefferquote [%] [Kopien/ml] 2,00E+03 1,00E+03 7,50E+02 5,00E+02 2,50E+02 1,00E+02...
  • Seite 78 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Tabelle 16: PCR-Ergebnisse zur Berechnung der analytischen Sensitivität des AltoStar ® Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 für Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus Konzentration N [gesamt] N [positiv] Trefferquote [%] [Kopien/ml] 2,00E+03 1,00E+03 7,50E+02 5,00E+02 2,50E+02 1,00E+02...

  • Seite 79: Analytische Spezifität

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Tabelle 17: PCR-Ergebnisse zur Berechnung der analytischen Sensitivität des AltoStar ® Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 für Influenza-B-Virus Konzentration N [gesamt] N [positiv] Trefferquote [%] [Kopien/ml] 2,00E+03 1,00E+03 7,50E+02 5,00E+02 2,50E+02 1,00E+02...

  • Seite 80: Negativproben

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 9.1.2.1 Negativproben 40 Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus- negative Atemwegsabstrich-Proben von Einzelspendern wurden mit dem AltoStar ® Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 getestet. Alle (40 von 40) Proben waren negativ für Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und Influenza-A(H1N1)pdm09- Virus-spezifische RNA und positiv für die IC.

  • Seite 81: Kreuzreaktionen

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® VORSICHT Das Vorhandensein von PCR-Inhibitoren kann zu falschnegativen oder ungültigen Ergebnissen führen. 9.1.2.3 Kreuzreaktionen Die analytische Spezifität des AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 in ® Bezug auf Kreuzreaktionen mit anderen Erregern als Influenza-Virus wurde durch Tests mit folgenden Erregern ermittelt: •...

  • Seite 82: Reaktivität

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® • Schweres akutes respiratorisches • Schweres akutes respiratorisches Syndrom-Coronavirus-1 Syndrom-Coronavirus-2 (SARS-CoV-1) (SARS-CoV-2) • Streptococcus pneumoniae VORSICHT Sollten die Proben andere Erreger als Influenza-A-Virus, Influenza- B-Virus und/oder Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus enthalten, kann es zu Kreuzreaktionen oder zu einer Konkurrenzreaktion zu Ungunsten der Amplifikation der Zielsequenz kommen, was zu fehlerhaften IVD- Ergebnissen führt.
  • Seite 83 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Tabelle 18: Getestete Stämme von Influenza-A-Virus und Influenza-B-Virus Detektions- Detektions- Detektions- Detektions- kanal ROX™ kanal FAM™ kanal Cy5 kanal VIC™ Subtyp/Stamm (Influenza-A (Influenza-A- (Influenza-B- (Interne (H1N1)pdm09- Virus-Ziel) Virus-Ziel) Kontrolle) Virus-Ziel) Influenza-A-Virus, Subtyp H1N1 (New Caledonia/20/98) Influenza-A-Virus,...

  • Seite 84: Präzision

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® VORSICHT Möglicherweise auftretende Mutationen in den Zielregionen des Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und/oder Influenza-A(H1N1) pdm09-Virus-Genoms, die durch in diesem Kit verwendete Primer und/ oder Sonden abgedeckt werden, können dazu führen, dass die Erreger trotz Vorhandenseins nicht detektiert werden.
  • Seite 85 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® • Werte des Schwellenwertzyklus (C *) für die hochpositiven Influenza-A- Virus-, Influenza-B-Virus- und Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus-Proben (siehe Tabelle 19) • Werte des Schwellenwertzyklus (C *) für die IC in den Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus-negativen Proben (siehe Tabelle 20) * Bitte beachten Sie, dass der gewählte Term C mit der Bezeichnung C...

  • Seite 86: Gesamtausfallrate

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 9.1.5 Gesamtausfallrate Die Robustheit des AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 wurde durch ® Testen von 40 Influenza-A-Virus-, Influenza-B-Virus- und Influenza-A(H1N1)pdm09- Virus-negativen Atemwegsabstrich-Proben von Einzelspendern, angereichert mit Influenza-A-Virus, Influenza-B-Virus und Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus bis zu einer Endkonzentration von 3 x LoD (1,11E+03 Kopien/ml, 1,43E+03 Kopien/ml bzw.
  • Seite 87 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Das AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 wurde in Kombination mit ® dem AltoStar Purification Kit 1.5 und der AltoStar Internal Control 1.5 auf dem ® ® AltoStar AM16 und auf dem CFX96™ DW Dx eingesetzt. ®...
  • Seite 88 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Tabelle 22: Testergebnisse zur Bewertung der diagnostischen Sensitivität und Spezifität für Influenza-A-Virus in Proben aus Atemwegsabstrichen RIDA GENE Flu real-time RT-PCR (R-Biopharm AG) ® POSITIV NEGATIV Die diagnostische Sensitivität und Spezifität des AltoStar Influenza Screen &...
  • Seite 89 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Die diagnostische Sensitivität und Spezifität des AltoStar Influenza Screen & Type ® RT-PCR Kit 1.5 für Influenza-A(H1N1)pdm09-Virus betrugen im Vergleich mit dem RIDA GENE Flu real-time RT-PCR (R-Biopharm AG) betrugen 100 % bzw. 98 %. ®...

  • Seite 90: Entsorgung

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 10. Entsorgung Entsorgen Sie gefährliche und biologische Abfälle in Übereinstimmung mit den lokalen und nationalen Vorschriften. Überschüssige Produktkomponenten und Abfälle dürfen nicht ins Abwasser, in Wasserläufe oder ins Erdreich gelangen. VORSICHT Behandeln Sie Proben immer als infektiöse und (bio-)gefährdende Materialien gemäß...

  • Seite 91: Technischer Support

    Telefon: +49-(0)40-5480676-0 HINWEIS Alle gravierenden Zwischenfälle im Zusammenhang mit dem Produkt müssen altona Diagnostics und den zuständigen Behörden Ihres Landes gemeldet werden. 13. Literatur International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV). Index of Viruses — Orthomyxovirus (2019) Virus Taxonomy: Ausgabe 2018b. https://talk.ictvonline.org/ taxonomy/, letzter Zugriff am 24.

  • Seite 92: Handelsmarken Und Haftungsausschlüsse

    Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ist ein gemäß der In-vitro- ® Diagnostikrichtlinie 98/79/EG des Europäischen Parlamentes und des Rates CE- geprüftes diagnostisches Kit. Produkt bei der FDA weder registriert noch zugelassen. Nicht in allen Ländern verfügbar. © 2022 altona Diagnostics GmbH; alle Rechte vorbehalten.

  • Seite 93: Symbole

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 15. Symbole Symbol Erklärung In-vitro-Diagnostikum Global Trade Item Number Chargennummer Inhalt Deckelfarbe Produktnummer Nummer Komponente Gebrauchsanweisung beachten Enthält ausreichend Reagenzien für „n“ Tests/Reaktionen (rxns) Lagertemperatur Verwendbar bis Hersteller Vorsicht Materialnummer &...
  • Seite 94 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Symbol Erklärung Version Hinweis Enthält biologisches Material tierischen Ursprungs...

  • Seite 95: Assay-Protokoll Für Die Altostar Connect Software Und Informationen Zur Lims-Integration

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 16. Assay-Protokoll für die AltoStar Connect Software ® und Informationen zur LIMS-Integration Der 2D-Barcode in Abbildung 15 ist für die Installation des aktuellsten Assay-Protokolls für die Verwendung des AltoStar Influenza Screen & Type ®...
  • Seite 96 Influenza B Kanal 4 Informationen und Support zu LOINC (Logical Observation Identifiers Names and ® Codes) finden Sie auf der Website der altona Diagnostics GmbH (www.altona- diagnostics.com), oder kontaktieren Sie den technischen Support von altona Diagnostics (siehe Kapitel 12. Technischer Support).

  • Seite 97: Änderungshistorie

    AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® 17. Änderungshistorie Tabelle 27: Änderungshistorie Datum der Kennung Ausgabe Änderungen [Monat/Jahr] MAN-AS0161540- 10/2021 Erste Veröffentlichung DE-S01 • Kapitel 9: Anpassung der Formulierung • Kapitel 14: Der Satz: „Das Produkt ist weder MAN-AS0161540- bei Health Canada noch bei der FDA registriert 04/2022...
  • Seite 98 AltoStar Influenza Screen & Type RT-PCR Kit 1.5 ® Seite absichtlich frei gelassen...
  • Seite 100 Diagnostics GmbH Mörkenstr. 12 22767 Hamburg, Germany phone +49 40 548 0676 0 +49 40 548 0676 10 e-mail info@altona - diagnostics.com www.altona - diagnostics.com...

Inhaltsverzeichnis