Applied Biosystems GlobalFiler Express PCR Amplification Kit Kurzanleitung
KURZANLEITUNG
™
GlobalFiler
PCR Setup – Swab Substrate
Pub. No. 4481758 Rev. A Translated from English Publication Number 4477601 Rev. A
Hinweis: Richtlinien zur Sicherheit und Biogefährdung finden Sie im Abschnitt „Sicherheit" im GlobalFiler
Amplification Kit User Guide (Pub. no. 4477672). Lesen Sie die Sicherheitsdatenblätter aller Chemikalien und befolgen Sie die
Anweisungen zur Handhabung. Tragen Sie eine geeignete Schutzbrille sowie Schutzkleidung und -handschuhe.
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Produktübersicht . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
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Allgemeine Vorbereitung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
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Richtlinien für die Ansetzung der Proben . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
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Ansetzen des Probenlysats (Raumtemperatur-Protokoll) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
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Ansetzen des Probenlysats (Wärmeprotokoll). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
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Ansetzen der Reaktionen. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
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Lagerung des Probenlysats . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
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Durchführung von PCR und Kapillarelektrophorese . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
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Eingeschränkte Herstellergarantie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
Produktübersicht
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Bei dem GlobalFiler
Express Kit (200 Reaktionen, Part no. 4476609 oder 1000 Reaktionen, Part no. 4474665) handelt es sich um ein
Short Tandem Repeat (STR) Multiplex-Assay zur Amplifizierung von 21 autosomalen STR-Loki, Amelogenin, 1 Y-STR-Lokus und
1 Y-Insertion/Deletion (Y-Indel)-Lokus. Es ist für die direkte Amplifizierung der folgenden Typen von Proben aus einer Quelle
vorgesehen:
• Blut- oder bukkale Proben, die auf behandelten Papiersubstraten genommen wurden (siehe Beschreibung in der Kurzanleitung,
Pub. no. 4481767)
• Blut- oder bukkale Proben, die auf unbehandelten Papiersubstraten genommen und mit Prep-n-Go
(siehe Beschreibung in der Kurzanleitung, Pub. no. 4481776)
• Bukkale Proben, die auf Tupfer-Substraten genommen und mit Prep-n-Go
dieser Kurzanleitung)
Allgemeine Vorbereitung
Legen Sie zu Beginn diese Kurzanleitung in den Arbeitsbereich des Labors, in dem Sie die PCR vorbereiten.
Richtlinien für die Ansetzung der Proben
• Lösen Sie jeden bukkalen Tupferkopf vor der Lyse vom Tupferschaft.
• Wenn Sie das Wärmelyse-Protokoll verwenden, führen Sie die Lyse in einem der folgenden Formate durch:
– 1,5-ml-Röhrchen mit einem Heizblock (VWR
– 96-Well Deep-Well Plate (Part no. 4392904) mit einem Ofen und einem Metallplattenadapter (Robbins Scientific
Hybridisierungsofen oder ähnlich, Agilent
ähnlich)
WICHTIG! Verwenden Sie keinen Plattenadapter aus Kunststoff.
• Um eine optimale Leistung zu erzielen, wird die Lyse eines gesamten Tupfers empfohlen. Um die Probe zu erhalten, werten Sie
die Lyse eines halben Tupfers aus.
Express PCR Amplification Kit –
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Tischgestell für 200-µl-Röhrchen/V-Bodenplatten (Metall) Teile-Nr. 410094 oder
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Scientific Select Trockenheizblock oder ähnlich)
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Buffer behandelt wurden
Buffer behandelt wurden (siehe Beschreibung in
Express PCR
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Modell 400
Verwandte Anleitungen für Applied Biosystems GlobalFiler Express PCR Amplification Kit
Inhaltszusammenfassung für Applied Biosystems GlobalFiler Express PCR Amplification Kit
- Seite 1 KURZANLEITUNG ™ GlobalFiler Express PCR Amplification Kit – PCR Setup – Swab Substrate Pub. No. 4481758 Rev. A Translated from English Publication Number 4477601 Rev. A ™ Hinweis: Richtlinien zur Sicherheit und Biogefährdung finden Sie im Abschnitt „Sicherheit“ im GlobalFiler Express PCR Amplification Kit User Guide (Pub.
- Seite 2 Ansetzen des Probenlysats (Raumtemperatur-Protokoll) ™ 1. Geben Sie 400 µl Prep-n-Go Buffer (Part. no. 4471406) in 1,5-ml-Röhrchen oder die entsprechenden Wells einer 96-Well Deep-Well Plate (Part no. 4392904). 2. Platzieren Sie in jedem Röhrchen oder Well den gesamten Kopf jedes Tupfers und lassen Sie es 20 Minuten bei Raumtemperatur (20 bis 25 °C) stehen, um die Probe zu lysieren.
- Seite 3 WICHTIG! Dieses Kit wurde für ein PCR-Reaktionsvolumen von 15 µl optimiert, um die erwartete PCR-Hemmung bei der Amplifizierung von nicht gereinigten Proben zu vermeiden. Die Verwendung eines geringeren PCR-Reaktionsvolumens kann die Fähigkeit der Chemikalien des Kits beeinträchtigen, vollständige STR-Profile zu erstellen. 3.
- Seite 4 Durchführung von PCR und Kapillarelektrophorese ™ Hinweise zur Durchführung der PCR-Amplifizierung und Kapillarelektrophorese (CE) finden Sie in der GlobalFiler Express PCR ™ Amplification Kit-PCR Amplification and CE Quick Reference Card (Pub. no. 4481785) und im GlobalFiler Express PCR Amplification Kit User Guide (Pub.